醫(yī)學(xué)影像技術(shù)技能精選(九篇)

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第1篇：醫(yī)學(xué)影像技術(shù)技能范文

[關(guān)鍵詞] 自體輸血；異體輸血；胃癌；炎性因子；免疫功能

[中圖分類號(hào)] R5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2016）02（a）-0106-02

Effect of Autogeneic or Allogeneic Transfusion on Inflammatory Factor and Immunologic Function in Patients with Radical Operation for Carcinoma of Stomach

LUO Yun， WANG Hong-mei

Blood Transfusion Department， The people s Hospital of Taixing of Jiangsu Province， Taixing， Jiangsu Province，225400 China

[Abstract] Objective To research the effect of autogeneic or allogeneic transfusion on inflammatory factor and immunologic function in patients with radical operation for carcinoma of stomach. Methods 96 cases of early gastric cancer patients receiving the radical operation for carcinoma of stomach in our hospital from June 2012 to August 2014 were selected and randomly divided into the autogeneic group and the allogeneic group with 48 cases in each， the allogeneic group were transfused with allogeneic whole blood， the autogeneic group were transfused with autologous blood， the natural killer （NK cells）， proleulzin（IL-2）and T lymphocyte subsets level（CD3+、CD4+、CD4+/CD8+）of the two groups before and after operation were compared. Results The NK cells and IL-2 of the two groups at the same day after operation were obviously decreased compared with those before operation，（P

[Key words] Autogeneic transfusion； Allogeneic transfusion； Gastric cancer； Inflammatory factor； Immunologic function

胃癌是源于胃黏膜上皮細(xì)胞的惡性腫瘤，患者早期可無任何體征，中晚期常見上腹壓痛及腫塊，晚期患者會(huì)出現(xiàn)貧血、消瘦、營養(yǎng)不良甚至惡病質(zhì)等表現(xiàn)[1-2]。由于胃癌的惡性程度較高，手術(shù)切除是根治早期胃癌的唯一方法[3]，該研究2012年6月―2014年8月臨床觀察96例在該院接受胃癌根治術(shù)的患者，旨在探討自體、異體輸血對(duì)患者炎性因子及免疫功能的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

整群抽選2012年6月―2014年8月就診于該院的早期胃癌患者96例，所有患者均經(jīng)臨床診斷及X線、腹部超聲、胃鏡等相關(guān)檢查確診，且自愿在該院接受根治術(shù)治療，排除伴有心、肝、腎其他嚴(yán)重疾病及免疫性疾病者，排除精神、意識(shí)障礙不能配合研究者，排除有放、化療和激素治療史患者，排除不簽署知情同意書者。且該研究經(jīng)該院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。上述96例患者按照隨機(jī)法將其分為自體組（n=48）和異體組（n=48），自體組中男30例，女18例，年齡34～68歲，平均（46.5±6.2）歲；體重53～79 kg，平均（66.3±5.4）kg；異體組中男29例，女19例，年齡35～67歲，平均（47.2±7.1）歲；體重52～79 kg，平均（68.4±5.1）kg，兩組患者在基線資料方面比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

所有患者在該院接受根治性手術(shù)，術(shù)前明確腫瘤部位、大小，制定手術(shù)方案，上腹正中切口，探查清除后切除病胃、重建消化道，術(shù)畢。兩組患者麻醉、手術(shù)方式相同，異體組術(shù)中輸異體全血400～600 mL，自體組麻醉后術(shù)前經(jīng)橈動(dòng)脈放血400～600 mL，并靜脈輸入同等6%羥乙基淀粉（國藥準(zhǔn)字H2006436），術(shù)畢將自體血輸回。

1.3 觀察指標(biāo)

分別于術(shù)前、術(shù)后當(dāng)天及術(shù)后7 d取患者清晨靜脈血，檢測(cè)自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）、白介素-2（IL-2）及T淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD4+/CD8+）水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析研究數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，行t檢驗(yàn)，P

2 結(jié)果

2.1 炎性因子

術(shù)后當(dāng)天兩組患者NK細(xì)胞、IL-2較術(shù)前顯著下降（P

表1 兩組患者手術(shù)前、后NK細(xì)胞及IL-2水平比較（x±s）

注：①與術(shù)前比較，P

2.2 疫功能指標(biāo)比較

術(shù)后當(dāng)天兩組T淋巴細(xì)胞亞群各指標(biāo)均顯著下降（P

3 討論

早期胃癌行根治性切除術(shù)是目前唯一治愈手段，術(shù)后5年生存率達(dá)80%以上[4]。但腫瘤患者圍術(shù)期輸血對(duì)其預(yù)后及5年生存率具有一定的消極影響[5]。由于血液是多種成分組成的混合物，可與機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)生相互作用，誘發(fā)受血者免疫功能抑制，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長，使腫瘤復(fù)發(fā)[6]。

有研究[7]顯示圍術(shù)期胃癌患者輸注異體紅細(xì)胞會(huì)影響其細(xì)胞免疫功能。IL-2具有免疫增強(qiáng)作用，參與B細(xì)胞激活、增殖，輸血后T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2減少，IL-2功能降低，B細(xì)胞激活和抗體產(chǎn)生減少、NK細(xì)胞功能不全，導(dǎo)致機(jī)體免疫功能抑制。因此，臨床應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行輸血標(biāo)準(zhǔn)，減少不必要的輸血。該研究中異體輸血組術(shù)后當(dāng)天IL-2水平顯著下降，且明顯低于自體輸血組，術(shù)后7 d異體輸血組NK細(xì)胞水平也顯著低于自體輸血組。異體輸血對(duì)患者免疫功能影響較大。且自體組術(shù)后7 d T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)恢復(fù)到術(shù)前水平，而異體組CD3+（60.3±11.2）%、CD4+（30.4±6.2）%、CD4+/CD8+（0.88±0.25）顯著少于自體組。可見自體輸血1周后患者免疫功能漸漸恢復(fù)，而異體組則出現(xiàn)了較長時(shí)間免疫功能抑制。

綜上，胃癌患者自體輸血較異體輸血對(duì)患者免疫功能影響小，值得推廣。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 洪金全，陳志遠(yuǎn)，張進(jìn)萍，等.圍術(shù)期異體紅細(xì)胞輸注對(duì)胃癌患者T細(xì)胞亞群的影響[J].中國輸血雜志，2014，27（12）：1299-1302.

[2] 陳超，陳騰，奉典旭，等.圍手術(shù)期輸血對(duì)老年胃癌術(shù)后近期影響及遠(yuǎn)期復(fù)發(fā)率的影響[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2014，23（5）：517-519.

[3] 李衛(wèi)，周鈴，李敏，等.圍手術(shù)期輸血對(duì)胃癌根治手術(shù)患者并發(fā)癥發(fā)生的影響[J].實(shí)用癌癥雜志，2015，30（7）：1065-1067.

[4] ，歐陽永忠，湯明，等.圍手術(shù)期輸血與胃癌根治術(shù)后并發(fā)癥的關(guān)系[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2014，94（10）：751-754.

[5] 李文靜，蔣學(xué)兵，王燕菊，等.輸血前不規(guī)則抗體篩查與臨床輸血安全[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（17）：2065-2066， 2068.

[6] 李嵐，孫彥.異體輸血對(duì)惡性腫瘤患者的影響[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（23）：3250-3251.

第2篇：醫(yī)學(xué)影像技術(shù)技能范文

關(guān)鍵詞：  海木； 小鼠； 學(xué)習(xí)記憶

海木Trichilia connaroides為楝科（Meliaceae）植物，別名老虎楝、雞波、鷓鴣花，在我國主要分布于廣西、云南、貴州［1］。民間用藥中，海木的根常被作為治療關(guān)節(jié)炎、咽喉炎、扁桃體炎和其他疾病的方藥［2］，有清熱解毒，祛風(fēng)濕腰腿痛和心、胃氣痛等功效［3］。有研究報(bào)道，海木氯仿提取物對(duì)通過化學(xué)處理、熱處理和甲醛誘導(dǎo)處理的昆明小鼠和Wistar大鼠建立的炎癥模型，表現(xiàn)出顯著的依賴性止痛作用和抗炎活性［4］。關(guān)于海木影響學(xué)習(xí)記憶功能的研究，目前尚未有報(bào)道。本文以昆明小鼠為對(duì)象，探討海木提取物對(duì)學(xué)習(xí)記憶功能的作用。

1  材料與儀器

1.1  動(dòng)物昆明小鼠300只，體質(zhì)量為（25±5）g，雄性，清潔級(jí)，購于廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。許可證號(hào)：SCXK桂2003-000。

1.2  藥物和試劑

海木枝葉于2009-03采于廣西桂林市永福縣壽城，經(jīng)廣西植物研究所劉演研究員鑒定為楝科植物海木（Trichilia connaroides）。采后粉碎，60度烘干備用；75%消毒酒精、乙醇（分析純）、石油醚（分析純）、氯仿（分析純）均購于天津福晨化學(xué)試劑廠；正丁醇（分析純），購于上海申博化工有限公司；0.9﹪氯化鈉注射液（廣西南寧百會(huì)藥業(yè)集團(tuán)有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：0902003）；銀杏葉片（12×24s，桂林益佰漓江制藥有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：090901）；鹽酸氯丙嗪注射液（50 mg∕2 ml，上海禾豐制藥有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：080502）；亞硝酸鈉（北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：991116）；無水乙醇（分析純）（廣東光華化學(xué)廠有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：20090115）。

1.3  儀器BA—200小鼠避暗儀，DT—200小鼠跳臺(tái)測(cè)試箱，MT—200Morris水迷宮視頻跟蹤分析系統(tǒng)，均由成都泰盟科技有限公司提供，RE—200旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），SHZ—D（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵（鞏儀市予華儀器有限責(zé)任公司），電子分析天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）等。

2  方法

2.1  海木萃取物的制備

稱取海木干枝葉適量，加入適量的無水乙醇，加熱回流2h，用四層紗布過濾，得到的上清液提取液，重復(fù)提取3次，合并提取液，減壓回收溶劑，得膏狀物，將此膏狀物用乙醇∶水=1∶3的比例除去葉綠素，回收溶劑至干，即得粗提部分。將所得粗提物分成兩份，一份備用，另一份依次用石油醚、氯仿、正丁醇、水進(jìn)行固-液萃取，即得到石油醚部分、氯仿部分、正丁醇部分、水提部分。將各部分分別減壓回收溶劑至干，最后得到的膏狀物即是石油醚萃取物、氯仿萃取物、正丁醇萃取物和水提物。

2.2  動(dòng)物分組在各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)分組之前均用相應(yīng)的儀器對(duì)小鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)測(cè)試和篩選，剔除與其他小鼠具有較大差異的，再將其余的小鼠隨機(jī)分組，每組10只。

2.3  海木對(duì)正常小鼠學(xué)習(xí)記憶功能作用的活性部位篩選（避暗法）將小鼠分為正常組、粗提物組、石油醚組、氯仿組、正丁醇組、水提物組和陽性對(duì)照組共7組。各給藥組按100 mg/kg劑量灌胃1 ml，正常對(duì)照組灌胃等容量的生理鹽水，陽性對(duì)照組按16 mg/kg劑量灌胃等容量銀杏葉片溶液，1次/d，連續(xù)給藥10 d，于給藥第9天進(jìn)行避暗訓(xùn)練，第10天給藥后30 min按文獻(xiàn)［5］方法測(cè)定小鼠在避暗儀中30 min內(nèi)的錯(cuò)誤次數(shù)（進(jìn)入暗室受到電擊的次數(shù)）和潛伏期（每只小鼠放入明室從開始測(cè)試到第一次進(jìn)入暗室的時(shí)間）。

2.4  海木氯仿萃取物對(duì)正常小鼠空間記憶功能的影響（Morris水迷宮法）將小鼠分為正常組、氯仿萃取物小、中、大劑量組和陽性對(duì)照組共5組。給藥組分別按50，100，150 mg/kg劑量灌胃海木氯仿萃取物1 ml，正常對(duì)照組灌胃等量生理鹽水，陽性對(duì)照組按16 mg/kg劑量灌胃等量銀杏葉片溶液，1次/d，連續(xù)給藥10 d。于給藥第5天進(jìn)行1次定位航行訓(xùn)練，于末次給藥后30 min按文獻(xiàn)［6］方法測(cè)定小鼠尋找平臺(tái)潛伏期及撤除平臺(tái)后經(jīng)過原平臺(tái)的次數(shù)及在原平臺(tái)象限停留的時(shí)間。

2.5  海木氯仿萃取物對(duì)鹽酸氯丙嗪所致記憶獲得障礙小鼠的影響（避暗法）動(dòng)物分組和給藥與“2.4”同，除正常對(duì)照組外，實(shí)驗(yàn)小鼠于給藥第9天皮下注射鹽酸氯丙嗪注射液（4 mg/kg），30 min后進(jìn)行避暗訓(xùn)練，第10天末次給藥30 min后測(cè)定小鼠在避暗箱中30 min內(nèi)的錯(cuò)誤次數(shù)和潛伏期。

2.6  海木氯仿萃取物對(duì)亞硝酸鈉所致記憶鞏固障礙小鼠的影響（跳臺(tái)法）動(dòng)物分組和給藥與“2.4”同，除正常對(duì)照組外，實(shí)驗(yàn)小鼠于給藥第9天進(jìn)行跳臺(tái)訓(xùn)練后立即皮下注射亞硝酸鈉水溶液（120 mg/kg），第10天末次給藥30 min后按文獻(xiàn)［5］方法測(cè)定小鼠在跳臺(tái)測(cè)試箱中30 min內(nèi)的錯(cuò)誤次數(shù)及潛伏期。

2.7  海木氯仿萃取物對(duì)乙醇所致記憶再現(xiàn)障礙小鼠的影響（跳臺(tái)法）動(dòng)物分組和給藥與“2.4”同，實(shí)驗(yàn)小鼠于給藥第9天進(jìn)行跳臺(tái)訓(xùn)練，第10天除正常對(duì)照組外，在末次給藥后灌胃40%乙醇（0.1 ml/10 g），30 min后測(cè)定小鼠在跳臺(tái)測(cè)試箱中30 min內(nèi)的錯(cuò)誤次數(shù)及潛伏期。

2.8  數(shù)據(jù)處理所有數(shù)據(jù)以±s表示,數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.for windows統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行組間t檢驗(yàn)和單因素方差分析比較組間差異，P＜0.05 為差異具有顯著性，P＜0.01為具有非常顯著性差異。

第3篇：醫(yī)學(xué)影像技術(shù)技能范文

摘　要：目的：探討地黃飲子對(duì)AD鼠學(xué)習(xí)記憶及膽堿能損害的影響。方法：模型組以D－乳糖(D－gal)腹腔注射合并β淀粉樣蛋白(Aβ)注射海馬制備AD動(dòng)物模型，各治療組分別在造模的同時(shí)灌胃地黃飲子和執(zhí)腦衰膠囊、哈伯因。運(yùn)用穿梭箱檢測(cè)各組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，采用生化法檢測(cè)備組大鼠腦勻漿AchE。免疫組化方法觀察SYN蛋白的變化。結(jié)果：中藥治療組均可使各組大鼠潛伏期降低、主動(dòng)回避反應(yīng)陽性率明顯升高。被動(dòng)遺避時(shí)間顯著降低，表明主動(dòng)、被動(dòng)反應(yīng)水平均有所回升，有顯著性差異。灌服中藥后各治療組腦組織AchE活性降低，大鼠海馬、皮層神經(jīng)元SYN蛋白表達(dá)增加。結(jié)論：地黃飲子對(duì)癡呆鼠學(xué)習(xí)記憶能力的提高及改善神經(jīng)元損傷的作用，可能與地黃飲子改善鼠腦神經(jīng)元膽堿能損害，來上調(diào)海馬和皮層神經(jīng)元SYN蛋白的表達(dá)有關(guān)。

關(guān)鍵詞：地黃飲子；老年性癡呆；p淀粉樣蛋白；乙酰膽堿酯酶；突觸素

中圖分類號(hào)：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673－7717(2007)07－1370－03

老年性癡呆，亦稱阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是一種常見于老年人的神經(jīng)退行性變性疾病。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)AD發(fā)病的β淀粉樣蛋白(AB)致病學(xué)說制備AD復(fù)合動(dòng)物模型，觀察地黃飲子對(duì)AD大鼠膽堿能損害及突觸素的影響，旨在探討本方防治AD的作用機(jī)理。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1．1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康Wistar雄性大鼠140只，普通級(jí)，重(2.60±20)g，黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1．2 藥物與試劑

地黃飲子制備方法：醇、水提取液與揮發(fā)油提取液，離心、濃縮至適量。合并上述醇、水提液及揮發(fā)油制成含生藥lg/mL的濃縮液。抗腦衰膠囊由石家莊四藥股份有限公司生產(chǎn)(國藥準(zhǔn)字Z13021850，生產(chǎn)批號(hào)040107)，配制成含生藥O.2403g/mL水溶液。哈伯因由河南竹林眾生制藥股份有限公司生產(chǎn)(國藥準(zhǔn)字H10940156，生產(chǎn)批號(hào)040103)，配制成0.0018/L水溶液。試劑：D－半乳糖(D－gal)由上海華舜生物工程有限公司提供(批號(hào)707222)。A13t－40，Sigma公司提供(Lot：088K49512)。乙酰膽堿酯酶(AchE)檢測(cè)試劑盒由南京建成生物化學(xué)有限公司提供。突觸素(SYN，Synaptophysin)免疫組化試劑盒，由武漢博士德生物工程有限公司提供，PV二步法免疫組化試劑盒由北京中山生物技術(shù)有限公司提供。

1．3 主要實(shí)驗(yàn)儀器

腦立體定位儀(NARISHIGE SN－2型日本)、大鼠穿梭程序控制儀(ZIL－2中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所)、攝影顯微鏡(OLYMPUS日本)等。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2．1 分組方法

140只Wistar大鼠隨機(jī)分成7組：空白組，假損傷組，模型組，抗腦衰對(duì)照組(中藥對(duì)照組)，哈伯因?qū)φ战M(西藥對(duì)照組)，中藥治療高、低劑量組，每組20只。

2．2 模型制備

假損傷組腹腔注射生理鹽水。余組均給予D－半乳糖[50mg/(kg?d)]腹腔注射4周，造成亞急性衰老；4周后再腦內(nèi)注射凝聚態(tài)Aβ1-40。假損傷組注射生理鹽水1μL。其余各組均注射Aβ。

2．3 給藥方法

中藥治療組腹腔注射造模同時(shí)分別給予地黃飲子高、低劑量灌胃[相當(dāng)含生藥5.4g/(kg?d)和2.7g/(kg?d)]，中、西對(duì)照組分別給予抗腦衰膠囊、哈伯因溶液灌胃[含生藥分別為2.403g/(kg?d)、0.018mg/(kg?d)]，余組灌胃等量蒸餾水，1次/天，共5周。

2．4 觀察指標(biāo)

2．4．1 大鼠穿梭實(shí)驗(yàn)操作方法，實(shí)驗(yàn)分為訓(xùn)練和正式測(cè)試兩部分，訓(xùn)練期為3天；第4天測(cè)試記憶能力，記錄第4天的電擊次數(shù)、電擊時(shí)間和主動(dòng)逃避時(shí)間。計(jì)算主動(dòng)回避的陽性率[(循環(huán)次數(shù)一遭受電擊次數(shù))/循環(huán)次數(shù)×100％]。

2．4．2 AchE測(cè)定行為學(xué)測(cè)試后大鼠斷頭取腦，制備腦勻漿，離心，取上清液。測(cè)定參照試劑盒說明書。

2．4．3 腦SYN蛋白表達(dá)檢測(cè)，行為學(xué)測(cè)試完畢，大鼠迅速處死取腦(去除小腦)，固定，修塊，標(biāo)本選在注射部位后。透明，包埋，切片，采用免疫組化(PV二步法)檢測(cè)，光鏡下觀察鼠腦海馬及皮層神經(jīng)元蛋白表達(dá)。滴加一抗(1：50比例稀釋)，滴加二抗(山羊抗小鼠)工作液，陰性對(duì)照為一抗加PBS。

2．5 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用x±s表示，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析均在spss11.0軟件中進(jìn)行，采用方差分析，多組間兩兩比較用LSD法。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3．1 地黃飲子對(duì)AD鼠穿梭箱試驗(yàn)的影響結(jié)果見表1。

結(jié)果表明，模型組大鼠潛伏期延長、主動(dòng)回避反應(yīng)陽性率明顯降低，被動(dòng)逃避時(shí)間顯著延長，與空白組、假損傷對(duì)照組有顯著差異(P＜0.01)，表明該造模方法可以使大鼠學(xué)習(xí)記憶獲得。各治療組均可使模型鼠潛伏期降低、主動(dòng)回避反應(yīng)陽性率明顯升高，被動(dòng)逃避時(shí)間顯著降低，表明主動(dòng)、被動(dòng)反應(yīng)水平均有所回升，有顯著性差異(P＜0.01)，說明地黃飲子各劑量組具有類似抗腦衰、哈伯因的作用，能夠提高癡呆鼠學(xué)習(xí)記憶能力。

3．2地黃飲子對(duì)AD鼠腦勻漿AchE的影響結(jié)果見表2。

結(jié)果表明，空白組與假損傷組比較無顯著性差異(P＞0.05)。造模可引起大鼠AchE活性異常升高，與空白組、假損傷對(duì)照組比較有顯著差異(P＜0.01)。而模型鼠在服用地黃飲子、抗腦衰膠囊、哈伯因后，可顯著抑制模型大鼠腦組織中的AchE活性(P＜0.01或P＜0.05)，其中哈伯因抑制Ache活性最為明顯(P＜0.01)，這與膽堿酯酶抑制劑類藥物已知的作用機(jī)制相符。

3．3 地黃飲子對(duì)AD鼠腦海馬和皮層SYN蛋白的影響

染色后在海馬區(qū)、皮層均可見彌漫性SYN棕黃色陽性表達(dá)，染色較深。結(jié)果采用CMIAS多功能真彩色病理圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行分析，計(jì)算陽性目標(biāo)總面積與統(tǒng)計(jì)場總面積比值。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果見表3。結(jié)果顯示，造模損傷所致的SYN低表達(dá)經(jīng)治療后，均有所提高，其中中高組、西藥對(duì)照組能明顯上調(diào)皮層及海馬SYN蛋白表達(dá)含量，與模型組相比具有顯著差異(P＜0.01)；而中藥對(duì)照組及中低組SYN含量也有所回升，與模型組比較有差異(P

第4篇：醫(yī)學(xué)影像技術(shù)技能范文

目的 觀察血管緊張素Ⅳ（AngⅣ）對(duì)糖尿病大鼠海馬膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶（ChAT）表達(dá)及認(rèn)知功能的影響。方法 38只SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、糖尿病組和糖尿病+AngⅣ組，建立STZ糖尿病大鼠模型， Morris水迷宮測(cè)試大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力，免疫組化觀察大鼠海馬ChAT的表達(dá)，RTPCR檢測(cè)ChAT mRNA水平的表達(dá)。結(jié)果 糖尿病+ AngⅣ組海馬chAT及其mRNA表達(dá)與糖尿病組相比明顯增高（P

【關(guān)鍵詞】 血管緊張素Ⅳ；膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶；認(rèn)知功能

【Abstract】Objective To explore the effects of angiotensin Ⅳ on the expression of choline acetyltransferase (ChAT) and its mRNA in hippocampus and cognitive function of diabetic rats. Methods 38 SD male rats were pided into normal， diabetic model and angiotensin Ⅳ treatment groups randomly. Diabetes was induced by a single peritoneal injection of streptozotocin. 11 weeks later， learning and memory behaviors were investigated by a spatial version of Morris water maze test. The expression of ChAT of all rats was examined with immunohistochemical method and its mRNA expression was detected by RTPCR. Results Compared with diabetic model group， the changes of ChAT and its mRNA in hippocampus significantly increased in angiotensin Ⅳ treatment group（P＜0.05）. Meanwhile， learning and memory grade in angiotensin Ⅳ treatment group were better than those in diabetic model group（P＜0.05）. Conclusions Angiotensin Ⅳ could improve cognitive ability in diabetic rats by increasing the expression of ChAT and its mRNA levels.

【Key words】Angiotensin Ⅳ；Choline acetyltransferase；Cognition

有研究發(fā)現(xiàn)與認(rèn)知功能有關(guān)的基底前腦、海馬等處的膽堿能神經(jīng)元在糖尿病認(rèn)知功能障礙早期就存在明顯退行性改變和代謝紊亂，ChAT表達(dá)減少〔1〕。膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶（ChAT）是乙酰膽堿合成過程中最重要的酶，是決定生物體內(nèi)乙酰膽堿含量的關(guān)鍵因素。國外有研究者報(bào)道血管緊張素Ⅳ（AngⅣ）對(duì)認(rèn)知功能有著重要的影響，但AngⅣ對(duì)膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)表達(dá)以及糖尿病認(rèn)知功能障礙的發(fā)病過程有無影響，目前尚未見報(bào)道。故本研究建立鏈脲佐菌素（STZ）糖尿病模型，運(yùn)用Morris水迷宮測(cè)試其行為學(xué)改變，用免疫組化和RTPCR技術(shù)觀察海馬神經(jīng)元ChAT及其mRNA表達(dá)變化，并用AngⅣ進(jìn)行干預(yù)，進(jìn)一步觀察AngⅣ對(duì)糖尿病大鼠海馬ChAT表達(dá)及其認(rèn)知功能改變的影響，探討糖尿病認(rèn)知功能障礙可能的發(fā)病機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

STZ（美國Alexis公司）；血糖儀（德國羅氏公司）；大鼠腦立體定位儀（美國Stoelting公司）；Morris水迷宮及水迷宮記錄分析系統(tǒng)（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所研制）；AngⅣ（購自美國鳳凰藥業(yè)有限公司）；兔抗大鼠膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶多克隆抗體（購自美國UCL公司）；RTPCR試劑盒（購自美國TaKaRa公司）；Trizol（上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司）；引物合成：賽百盛基因工程有限公司。

1.2 動(dòng)物分組與處理

SD雄性大鼠38只，8～10周齡，體重180～220 g，購自重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。動(dòng)物適應(yīng)喂養(yǎng)1 w后，隨機(jī)分為正常對(duì)照組10只、糖尿病組14只和糖尿病+AngⅣ組14只。建立STZ糖尿病模型，大鼠禁食12 h，糖尿病組和糖尿病+AngⅣ組按60 mg／kg劑量腹腔一次注射1%STZ（溶于pH4.2，0.1 mol／L檸檬酸檸檬酸鈉緩沖液），正常對(duì)照組注射等量緩沖液。血糖穩(wěn)定3 d后，尾靜脈隨機(jī)血糖＞16.67 mmol／L認(rèn)為糖尿病模型建立成功。成模后第11周，各組均進(jìn)行水迷宮測(cè)試，之后糖尿病+AngⅣ組側(cè)腦室每天注射AngⅣ5 nmol（1 nmol/μl），糖尿病組和正常對(duì)照組注射等體積的生理鹽水，持續(xù)1 w，所有實(shí)驗(yàn)大鼠再次進(jìn)行水迷宮測(cè)試。實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)糖尿病組大鼠死亡2只，糖尿病+AngⅣ組大鼠死亡3只。

1.3 Morris水迷宮測(cè)試

Morris水迷宮操作系統(tǒng)，包括直徑150 cm的圓形水池，高15 cm、直徑10 cm的平臺(tái)，平臺(tái)表面低于水面2 cm，水迷宮記錄分析系統(tǒng)。糖尿病模型建模成功后第11周，訓(xùn)練3 d，第4天進(jìn)行隱藏平臺(tái)獲得實(shí)驗(yàn)，分析潛伏期，考察學(xué)習(xí)能力。第5天撤去平臺(tái)進(jìn)行空間搜索實(shí)驗(yàn)去除平臺(tái)觀察2 min內(nèi)大鼠在中心區(qū)域停留時(shí)間百分比以及通過原平臺(tái)的次數(shù)，測(cè)試記憶能力。干預(yù)1 w再次重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)。

1.4 AngⅣ干預(yù)

成模后第11周，各組大鼠水迷宮測(cè)試完畢即行AngⅣ干預(yù)。大鼠經(jīng)4%水合氯醛（10 ml／kg）腹腔注射麻醉后，固定于腦立體定位儀，沿顱頂正中線剪開頭皮暴露顱骨，大鼠側(cè)腦室穿刺坐標(biāo)〔2〕：前囟后1.0 mm，右1.5 mm，深3.5 mm。微型電鉆沿此穿刺點(diǎn)鉆孔。將帶內(nèi)芯的不銹鋼套管（外徑0.9 mm，內(nèi)徑0.5 mm）垂直插入側(cè)腦室內(nèi)，牙托粉黏合固定套管，凝固后縫合傷口。術(shù)后大鼠分籠飼養(yǎng)并予青霉素抗炎。導(dǎo)管置入后第4天開始進(jìn)行側(cè)腦室注射，生理鹽水將AngⅣ配成所需濃度(1 nmol／μl)，微量注射器3 min內(nèi)將5 μl AngⅣ溶液勻速注入側(cè)腦室（AngⅣ組），留針1 min，每天給藥1次。正常對(duì)照組和糖尿病組注射等體積生理鹽水，持續(xù)7 d。

1.5 免疫組化

采用SP法免疫組織化學(xué)染色。 處死大鼠，1%多聚甲醛心臟灌注取腦，石蠟包埋連續(xù)冠狀切片，根據(jù)試劑盒說明檢測(cè)ChAT在各組大鼠海馬的表達(dá)。每只標(biāo)本隨機(jī)取1張切片，每張切片高倍鏡（×400）下隨機(jī)選擇3 個(gè)視野的海馬區(qū)域，采用ImagePro Plus6.0軟件測(cè)定該區(qū)域ChAT陽性染色神經(jīng)元的平均光密度值。

1.6 RTPCR法

大鼠斷頭，低溫下快速取出海馬組織，液氮凍存。稱取50 mg海馬組織，提取總RNA，進(jìn)行RTPCR，ChAT引物序列為5'ACCTCGTCTGTGGAGTTTGCG3'，5' TCAAGATTGCTTGGCTTGGTT3'。條件：94℃預(yù)變性2 min；94℃30 s；57℃退火30 s；72℃延伸30 s，26個(gè)循環(huán)；72℃再延伸10 min；4℃保存。取PCR產(chǎn)物5 μl進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳鑒定，照相記錄。凝膠成像分析系統(tǒng)掃描RTPCR電泳結(jié)果，用Quantity One軟件測(cè)定Volumn值，計(jì)算ChAT／βactin比值。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)用x±s表示，均經(jīng)過方差齊性檢驗(yàn)和正態(tài)性檢驗(yàn)，采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行方差分析。

2 結(jié) 果

2.1 隱藏平臺(tái)獲得實(shí)驗(yàn)

糖尿病組潛伏期增加，與正常對(duì)照組比較差異有顯著性（P＜0.05）。糖尿病+AngⅣ組較糖尿病組潛伏期明顯縮短（P＜0.05），較正常對(duì)照組稍延長，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。表1 大鼠空間搜索實(shí)驗(yàn)/隱蔽平臺(tái)搜索實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)

2.2 空間搜索實(shí)驗(yàn)

糖尿病組與正常對(duì)照組相比，中心區(qū)停留時(shí)間百分比和通過原平臺(tái)位置次數(shù)較明顯下降（P＜0.05）。上述參數(shù)，糖尿病+AngⅣ組較糖尿病組明顯增加（P＜0.05），與正常對(duì)照組比較無明顯差異（P＞0.05），見表2。

2.3 免疫組化結(jié)果

糖尿病組海馬ChAT陽性神經(jīng)元平均光密度明顯降低，與正常對(duì)照組相比有顯著性差異（P＜0.05）。糖尿病+AngⅣ組與糖尿病組比較，上述指標(biāo)明顯增加（P＜0.05），但與正常對(duì)照組比較無明顯差異（P>0.05）。見表2，圖1。

2.4 ChAT mRNA的表達(dá)

糖尿病組ChAT mRNA表達(dá)水平明顯下降（P＜0.05），經(jīng)AngⅣ干預(yù)后可顯著增加ChAT mRNA表達(dá)水平（P＜0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2，圖2。表2 各組大鼠海馬ChAT蛋白和mRNA表達(dá)結(jié)果(略)

3 討 論

糖尿病認(rèn)知功能障礙最早在上世紀(jì)20年代提出，隨后很多學(xué)者也證實(shí)糖尿病患者確實(shí)存在明顯的獲得性的認(rèn)知功能缺陷，這種認(rèn)知缺陷在1型糖尿病和2型糖尿病都可以發(fā)生，主要表現(xiàn)為學(xué)習(xí)和記憶功能的減退。本實(shí)驗(yàn)采用STZ糖尿病模型，結(jié)果提示糖尿病大鼠在成模11 w出現(xiàn)學(xué)習(xí)能力減退；記憶能力也顯著受損，與文獻(xiàn)報(bào)道相一致〔3〕。本實(shí)驗(yàn)通過免疫組化和RTPCR方法檢測(cè)糖尿病大鼠海馬ChAT的表達(dá)，結(jié)果提示ChAT表達(dá)的顯著降低導(dǎo)致糖尿病認(rèn)知功能障礙發(fā)生。

血管緊張素Ⅳ（AngⅣ）是血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）C末端的6肽片段，由AngⅡ在氨基肽酶B的作用下裂解而成，AngⅣ在體內(nèi)通過與其特異性的高親和力受體AT4結(jié)合發(fā)揮作用。近年來有系列研究發(fā)現(xiàn)，AngⅣ不僅可以在被動(dòng)回避反應(yīng)實(shí)驗(yàn)中增強(qiáng)記憶和學(xué)習(xí)，而且可以預(yù)防由美加明、東莨菪堿、乙醇和缺血導(dǎo)致的記憶缺失〔4～6〕。本研究表明AngⅣ對(duì)糖尿病認(rèn)知功能障礙有明顯的改善作用。目前AngⅣ改善認(rèn)知功能的機(jī)制仍不明確，推測(cè)其可能的途徑有：①易化海馬的長時(shí)程增強(qiáng)（LTP）效應(yīng)；②A抑制海馬神經(jīng)元凋亡；③改善腦灌注〔7〕。而且我們的實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)在給予AngⅣ干預(yù)以后，糖尿病大鼠海馬的ChAT的蛋白表達(dá)水平和mRNA表達(dá)水平都明顯增加，與其Morris水迷宮成績改善呈顯著正相關(guān)，因此我們認(rèn)為AngⅣ增加海馬的ChAT表達(dá)水平，促進(jìn)乙酰膽堿的合成，可能是其改善糖尿病認(rèn)知功能障礙的又一重要途徑，這為臨床防治糖尿病認(rèn)知功能障礙提供了新的思路。

然而，糖尿病認(rèn)知功能障礙的發(fā)病機(jī)制極其復(fù)雜，RAS系統(tǒng)各成員與糖尿病認(rèn)知功能的關(guān)系仍未完全闡明，繼續(xù)深入的研究二者的關(guān)系將為糖尿病慢性并發(fā)癥的防治提供堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，使更多的糖尿病患者受益。

參考文獻(xiàn)

1 盛樹力.糖尿病腦病與老年性癡呆〔J〕.中華內(nèi)分泌代謝雜志，2001；17：5860.

2 包新民，舒斯云.大鼠腦立體定向圖譜〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，1991：128.

3 Biessels GJ，Kamal A，Ramakers GM，et al.Place learning and hippocampal synaptic plasticity in streptozotocininduced diabetic rats〔J〕. Diabetes，1996；45(9):125966.

4 Tchekalarova J，Kambourova T，Georgiev V.Interaction between angiotensin IV and adenosine A(1) receptor related drugs in passive avoidance conditioning in rats〔J〕.Behav Brain Res，2001；123(1):1136.

5 Albiston AL，Pederson ES，Burns P，et al.Attenuation of scopolamineinduced learning deficits by LVVhemorphin7 in rats in the passive avoidance and water maze paradigms〔J〕.Behav Brain Res，2004；154(1):23943.

第5篇：醫(yī)學(xué)影像技術(shù)技能范文

[關(guān)鍵詞] 依達(dá)拉奉;血管性癡呆;學(xué)習(xí)記憶;Chat;NR2B

[中圖分類號(hào)] R965[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]1673-7210(2010)02(c)-023-02

Effect of Edaravone on learning, memory and expressions of hippocampal Chat and NR2B in rats with vascular dementia

LI Yanbo, ZHANG Shenglin

(Department of Geriatrics, the First Clinical Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China)

[Abstract] Objective: To research the effect of Edaravone on learning, memory and expressions of hippocampal of Chat and NR2B in rats with vascular dementia (VD). Methods: VD rat models were established by two-vessel occlusion and Sodium Nitroprusside depressurization. Morris test was performed to detect the cognition of rats. Immunohistochemistry was used to observe the expressions of Chat and NR2B in hippocamp. Results: The learning and memory of VD group (group B) were higher compared with sham-operation group (group A), Edaravone group (group C) and preventive treatment group (group D), and the expressions of Chat and NR2B were decreased in hippocamp of group B (P0.05). Conclusion: Edaravone improves the learning and memory in VD rats, its effects may result from the increase in hippocampal Chat and NR2B expression, we can also conclude that Edaravone has a preventive effect on cognitive decline in rats.

[Key words] Edaravone; VD; Learning and memory; Chat; NR2B

依達(dá)拉奉是一種新型的腦保護(hù)藥,具有清除自由基、抗細(xì)胞凋亡和神經(jīng)保護(hù)作用[1]。臨床研究結(jié)果表明,依達(dá)拉奉在腦梗死中有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用[2-3]。血管性疾呆(VD)是一組由于缺血或出血性的腦血管病及全腦缺血低氧引起的認(rèn)知功能障礙綜合征。本文通過觀察依達(dá)拉奉對(duì)VD大鼠海馬Chat、NR2B表達(dá)的影響,研究依達(dá)拉奉的預(yù)防及治療作用,為VD的治療提供新思路。

1 材料與方法

1.1動(dòng)物分組及模型制備

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,選用雄性Wistar大鼠36只,體重200～250 g,適應(yīng)性飼養(yǎng)2周,采用“兩血管阻斷+硝普鈉降壓法”[4]制備VD大鼠模型,B組(VD組)、C組(依達(dá)拉奉治療組)、D組(預(yù)防治療組)行雙側(cè)頸總動(dòng)脈反復(fù)缺血-再灌注2次,每次10 min,同時(shí)在缺血-再灌注前給予硝普鈉2.5 mg/kg腹腔注射,A組僅暴露雙側(cè)頸總動(dòng)脈而不結(jié)扎,且不注射硝普鈉。

1.2 給藥方法

C組大鼠于術(shù)后第7天給予依達(dá)拉奉皮下注射3 mg/kg,D組于造模麻醉前給予同等劑量的依達(dá)拉奉,每天1次給藥,共20 d;A組與B組給予等量生理鹽水皮下注射。

1.3 學(xué)習(xí)記憶能力的測(cè)定

根據(jù)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)進(jìn)行大鼠學(xué)習(xí)記憶功能測(cè)定,歷時(shí)5 d,前4 d記錄在2 min內(nèi)找到并爬上平臺(tái)的時(shí)間為大鼠的逃避潛伏期,即學(xué)習(xí)成績;第5天撤掉平臺(tái)后,記錄大鼠穿越平臺(tái)的次數(shù)以測(cè)試其記憶能力。

1.4 制備組織切片

各組動(dòng)物分別于造模后第30天處死,灌洗固定后剝?nèi)『ｑR組織,石蠟包埋,脫蠟,應(yīng)用免疫組化方法制片。

1.5灰度值分析

各組取海馬CA1、CA3區(qū)各10個(gè)測(cè)試點(diǎn),求平均值進(jìn)行分析。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,然后運(yùn)用SPSS 13.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析,顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果

見表1。

2.1.1定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)果B組逃避潛伏期均較A、C、D組延長(P

2.1.2 空間搜索實(shí)驗(yàn)結(jié)果B組穿越平臺(tái)次數(shù)較A、C、D組減少(P

2.2 圖像灰度值分析

與A組比較,B組海馬CA1、CA3區(qū)的Chat及NR2B表達(dá)明顯,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

表2 各組大鼠海馬CA1、CA3區(qū)Chat、NR2B表達(dá)(x±s)

與A組比較,■P

3討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,B組大鼠逃避潛伏期明顯延長,而C組與D組較B組均縮短,且D組與A組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明依達(dá)拉奉能夠改善VD大鼠的認(rèn)知,同時(shí)說明依達(dá)拉奉有預(yù)防VD發(fā)生的作用。其機(jī)制可能與依達(dá)拉奉能夠抑制脂質(zhì)過氧化、清除過量自由基、保護(hù)細(xì)胞線粒體、阻止自由基釋放而引起的遲發(fā)型的組織損害有關(guān)[5]。

Chat是膽堿能神經(jīng)元的特殊標(biāo)志,Chat免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元減少與大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙程度呈正相關(guān)[6]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),Chat蛋白在B組海馬區(qū)表達(dá)極少,可能是因?yàn)槟X組織遭受自由基的氧化損傷,導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞凋亡。在C組與D組中其表達(dá)增加可能是因?yàn)橐肋_(dá)拉奉清除過量生成的自由基保護(hù)細(xì)胞線粒體,抑制脂質(zhì)過氧化作用和血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷[2],阻止了caspase-3的活化[7],提高了Bcl-2的表達(dá)[8],減少了缺血區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡。

NR2B是NMDA受體的調(diào)節(jié)亞單位,在學(xué)習(xí)和記憶中起關(guān)鍵作用[9]。腦缺血引起神經(jīng)元去極化,導(dǎo)致谷氨酸(Glu)的大量釋放,Ca2+內(nèi)流主要由谷氨酸受體的一種亞型NMDA受體通道介導(dǎo),Ca2+超載造成神經(jīng)元損傷,這就是Glu對(duì)神經(jīng)元的興奮毒性損傷[10]。本研究中,VD大鼠海馬NR2B表達(dá)減少的機(jī)制可能與海馬缺血、低氧致神經(jīng)元死亡或結(jié)構(gòu)受損有關(guān),也可能與神經(jīng)元低代謝影響神經(jīng)傳遞有關(guān),而經(jīng)依達(dá)拉奉干預(yù)后NR2B表達(dá)增加可能與依達(dá)拉奉能夠抑制谷氨酸釋放[11],進(jìn)而改善局部腦血流量和腦微循環(huán)及腦能量代謝有關(guān)。

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),C組Chat及NR2B表達(dá)與D組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但水迷宮實(shí)驗(yàn)中D組較C組學(xué)習(xí)記憶能力提高,可能仍有其他機(jī)制的影響,有待于進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Shimon A, Tatsushi K, Chika KON, et al. Anti-apoptotic and neuroprotective effects of edaravone following transient focal ischemia in rats [J]. Eur J Pharmacol,2005,516(2):125-130.

[2]Edaravone Acute Infarction Study Group. Effect of a novel free radical scavenger, edaravone (MCI2186), on acute brain infarction. Randomized, placebo-controlled, double-blind study at multicenters [J]. Cerebrovas Dis,2003,15(3):222-229.

[3]Watanabe T, Tanaka M, Watanabe K, et al. Research and development of the free radical scavenger edaravone as a neuroprotectant [J]. Yakugaku Zasshi,2004,124(3):99.

[4]王蕊,楊秦飛,唐一鵬,等.大鼠擬“血管性癡呆”模型的改進(jìn)[J].中國病理生理雜志,2000,16(10):914.

[5]Ikeda T, Xia YX. Effect of the free radical scanvenger, 3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolirr-5-one (MCI-186), on hypoxia-ischemia-induced brain injury in neonatal rats [J]. Nero Lett,2002,329(1):33-36.

[6]范文輝,李露斯,劉之榮,等.血管性癡呆的動(dòng)物模型、神經(jīng)病理及其膽堿能機(jī)制[J].中國臨床康復(fù),2002,6(21):3172-3173.

[7]Xiao B, Bi FF, Hu YQ, et al. Edaravone neuroprotection effected by suppressing the gene expression of the Fas signal pathway following transient focal ischemia in rats [J]. Neurotox Res,2007,12(3):155-162.

[8]Miyasou T, Kwon AH, Tsuji K, et al. Edaravone prevents Fas-induced culminant hepatic failure in mice by regulating mitochondrial Bcl-xl and Bax [J]. Shock,2008,30(2):212-216.

[9]Loftis JM. The N-methyl-D-aspartate receptor subunit NR2B: localization, functional properties, regulation, and clinical implications [J]. Pharmacol Ther,2003,97(1):55-85.

[10]Choi DW. Calcium: still center-stage in hypoxic-ischemic neuronal death [J]. J Trend Neuro,1995,18(2):58-60.

第6篇：醫(yī)學(xué)影像技術(shù)技能范文

【關(guān)鍵詞】 紫草素;D-半乳糖;老年性癡呆模型

老年性癡呆(AD)是一種嚴(yán)重危害老年人群身心健康的慢性神經(jīng)退行性疾病,其發(fā)生機(jī)制與自由基過載造成的氧化應(yīng)激反應(yīng)密切相關(guān),后者可引起癡呆模型動(dòng)物腦內(nèi)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量增高、超氧化物歧化酶(SOD)水平降低,是AD發(fā)生的重要影響因素。新疆軟紫草有效成分紫草素具有體外抗氧化及抗衰老等多種藥理活性,對(duì)氧化應(yīng)激損傷具有較好的拮抗作用,但其是否具有腦內(nèi)抗氧化及改善AD患者學(xué)習(xí)記憶的作用尚未見明確報(bào)道。本研究采用AD大鼠模型,通過觀察其腦內(nèi)MDA和SOD含量的變化,初步探討紫草素對(duì)AD的防治作用。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物及分組 30只雄性Wistar大鼠,體質(zhì)量230~270 g,購自新疆實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,合格證號(hào)XJLA-2008-04。動(dòng)物

基金項(xiàng)目:石河子大學(xué)高層次人才科研基金項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào):RCZX200664)

作者單位:721000寶雞市人民醫(yī)院(景富春);石河子大學(xué)藥學(xué)院藥本05級(jí)1班(高建波 劉冬);石河子大學(xué)藥學(xué)院藥理系(許玉華 王振華); 石河子大學(xué)藥學(xué)院中藥系(譚勇)

被隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、陽性藥組、紫草素高劑量組和紫草素低劑量組, 5只/組。

1.2 藥物和試劑 D-半乳糖(批號(hào)080120)和考馬斯亮藍(lán)G250購自上海藍(lán)季公司、超氧化物歧化酶(SOD,批號(hào)20080515)及丙二醛(MDA,批號(hào)20080407)試劑盒為南京建成生物工程研究所提供,軟紫草有效成分紫草素(20070806)購自中國生物制品檢定所,其他試劑均為國產(chǎn)分析純,水為超純水。

1.3 儀器 Thermo 多功能酶標(biāo)儀,Morris水迷宮(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所),德國IAK-R104組織勻漿機(jī),湖南凱達(dá)TGL20M高速冷凍離心機(jī)。

1.4 造模及給藥方法 模型組、陽性藥組、紫草素高劑量組和紫草素低劑量組大鼠均腹腔注射D-半乳糖300 mg/(kg•d),對(duì)照組同樣方法注射0.9%氯化鈉注射液2 ml/(kg•d),連續(xù)6周。于第6周末次給藥結(jié)束后開始進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn),將篩選合格動(dòng)物納入后續(xù)實(shí)驗(yàn),水迷宮試驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)[1]。其中,陽性藥組給予灌胃給藥哈伯因0.008 mg/100(g•d),紫草素高劑量組和低劑量組分別灌胃給藥紫草素0.7 mg 和0.35 mg/100 g•d,連續(xù)1周。對(duì)照組及模型組灌胃給藥等容積生理鹽水。給藥結(jié)束后先行水迷宮實(shí)驗(yàn),然后進(jìn)行腦勻漿SOD和MDA測(cè)定。

1.5 腦勻漿SOD和MDA含量測(cè)定 對(duì)照組、模型組、陽性藥組、紫草素高劑量組和低劑量組均于末次給藥后迅速置0℃冰面斷頭處死,冰浴下快速勻漿,繼以低溫高速離心,設(shè)定速度3000 r/min,離心時(shí)間10 min。取上清液備用。SOD和MDA試劑的配制均參照試劑盒相應(yīng)說明書。腦勻漿中蛋白含量測(cè)定用考馬斯亮藍(lán)G250法。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所獲數(shù)據(jù)均采用x±s表示,用SPSS for Windows 10.0統(tǒng)計(jì)軟件作單因素方差分析(ANOVA),以P

2 結(jié)果

2.1 紫草素對(duì)D半乳糖損傷所致老年性癡呆模型大鼠的行為學(xué)影響 見表1。與對(duì)照組大鼠相比,模型組大鼠在Morris水迷宮中的游泳持續(xù)時(shí)間明顯延長,搜索策略多為隨機(jī)式或邊緣式。兩種指標(biāo)的組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

表1

紫草素D半乳糖致老年性癡呆模型大鼠在Morris水迷宮中的游泳時(shí)間(x±s,n=30)

組別劑量(mg/kg)游泳時(shí)間(s)

Day1Day2Day3Day4Day5

空白2.0092.71±22.6771.81±43.0654.42±45.0928.01±25.3425.22±25.46

模型150.00106.33±36.992.23±39.94*84.24±43.84**52.78±48.27*48.74±46.40*

陽性藥0.0898.56±27.7281.76±41.1266.92±41.1140.91±24.6531.47±27.52

紫草素高劑量7.00102.85±29.5483.23±38.6172.67±39.8842.35±26.4337.08±23.32

紫草素低劑量3.50104.53±30.6386.30±45.2382.79±40.3751.33±27.9047.55±33.12

注:與空白組比較,*P

2.2 紫草素對(duì)D半乳糖損傷所致老年性癡呆模型大鼠腦勻漿中SOD和MDA含量的影響 見表2。模型組大鼠各時(shí)間點(diǎn)的SOD濃度均明顯低于對(duì)照組,而陽性藥組和紫草素高劑量組在各時(shí)間點(diǎn)則顯著高于模型組,兩兩比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

表2

紫草素對(duì)D半乳糖致老年性癡呆模型大鼠腦勻漿中SOD和 MDA含量的影響(x±s,n=6)

組別劑量(mg/kg)SOD(NU/mg•prot)MDA(nmol/mg•prot)

空白2.00471.98±12.16**49.74±11.53**

模型2.00439.92±8.1286.82±18.47

陽性藥0.08467.18±10.74**59.87±6.69*

紫草素高劑量7.00458.55±7.30*59.31±16.40*

紫草素低劑量3.50451.78±0.0661.55±7.90*

注:與模型組比較,*P

與SOD不同,MDA的濃度在各組呈現(xiàn)出相反的變化,其差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

3 討論

老年性癡呆(AD)是一種嚴(yán)重危害老年人群身心健康的慢性神經(jīng)退行性疾病。近年來,隨著全球人口老齡化步伐的加快,該病的患病率呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。據(jù)國內(nèi)外有關(guān)調(diào)查顯示,西方發(fā)達(dá)國家60歲以上老年人的癡呆患病率達(dá)2.3%~11.9%,我國在北京、上海、西安和成都等四個(gè)中心城市對(duì)年齡≥55歲人口進(jìn)行的調(diào)查表明癡呆患病率為2.7%~7.3%。

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研究表明,AD的發(fā)生與多種因素導(dǎo)致腦內(nèi)學(xué)習(xí)記憶相關(guān)神經(jīng)元損傷有關(guān)[2],其中氧化脅迫反應(yīng)是主要病理改變之一。氧化脅迫可引起癡呆模型動(dòng)物腦組織膽堿能神經(jīng)和多巴胺能神經(jīng)功能受損,膽堿乙?；富钚越档?單胺氧化酶活性(MAO-B)升高,造成腦內(nèi)與學(xué)習(xí)記憶和認(rèn)知功能相關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿(ACh)及多巴胺等的水平降低。還可導(dǎo)致衰老神經(jīng)元胞漿中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)的含量明顯增高,后者呈帽狀結(jié)構(gòu)圍繞脂褐素沉積,并成為老年斑的組成部分。氧化脅迫尚能造成其頂下小葉中表達(dá)超氧化物歧化酶(SOD)及在海馬中表達(dá)谷光甘肽(GSH)的mRNA基因轉(zhuǎn)錄水平降低,促進(jìn)了神經(jīng)元變性和癡呆的發(fā)生。

新疆軟紫草提取物具有抗氧化和抗衰老等多種藥理活性[3],其抗氧化能力相當(dāng)于2,6-二叔丁基對(duì)甲酚的42%和維生素C的35.5 %[4],對(duì)D-半乳糖所致急性氧化性肝損傷具保護(hù)作用,對(duì)超氧陰離子(O-2)、羥自由基(•OH)和單線態(tài)氧(1O2)等有較強(qiáng)清除能力,對(duì)氧化脅迫損傷具有較好的拮抗作用[5],同時(shí)尚可延長果蠅壽命并呈現(xiàn)出一定的量效關(guān)系[6]。這些研究結(jié)果表明,軟紫草可能具有抗AD患者神經(jīng)元氧化脅迫損傷作用。

本研究發(fā)現(xiàn)紫草素具有一定的抗腦內(nèi)氧化脅迫作用,能明顯改善D半乳糖癡呆模型大鼠腦勻漿中的SOD 和MDA的活性及含量變化,改善其學(xué)習(xí)記憶能力,提示以紫草素為研究靶點(diǎn)有可能開發(fā)出新的抗老年癡呆藥物,開展紫草素抗老年性癡呆作用研究具有重要基礎(chǔ)及臨床研究價(jià)值。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 叢偉紅,劉建勛,徐立. 腦維康對(duì)D半乳糖致腦老化模型大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響. 中藥藥理與臨床,2007,23(5):155.

[2] 刑宏義,孫圣剛. Alzheimer病的膽堿能系統(tǒng)研究進(jìn)展.國外醫(yī)學(xué)神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊(cè),2000,27(5):262-264.

[3] 肖培根. 新編中藥志. 化學(xué)工業(yè)出版社,2002:976-986.

[4] 王威. 天然紫草素的研究. 食品科學(xué), 2002, 23(6):56-58

[5] 買爾旦•馬合木提, 劉燕 , 尼加提•熱合木. 新疆紫草提取物對(duì) D2氨基半乳糖致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用. 中國中藥雜志,2006,31(19):1646-1649.

第7篇：醫(yī)學(xué)影像技術(shù)技能范文

【摘要】

目的 探討高脂膳食對(duì)學(xué)習(xí)記憶及突觸可塑性的影響，為合理膳食預(yù)防腦老化提供科學(xué)依據(jù)。方法 雄性ICR小鼠分為4組，即高脂膳食組、腦老化組、模型組、普通對(duì)照組，每組10只。以每天D半乳糖100 mg/kg皮下注射法制備腦老化模型，實(shí)驗(yàn)干預(yù)期共9 w。以Morris水迷宮測(cè)試小鼠空間記憶和學(xué)習(xí)能力，流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定皮層海馬神經(jīng)元突觸體數(shù)量，熒光偏振法測(cè)定突觸體膜流動(dòng)性。結(jié)果 ①水迷宮實(shí)驗(yàn)中，腦老化組小鼠的逃避潛伏期 (EL) 明顯大于普通對(duì)照組小鼠(P0.05)，高脂膳食組與普通對(duì)照組小鼠的EL無顯著差異(P>0.05)。②突觸體數(shù)量：腦老化組和模型組小鼠低于非腦老化組(高脂膳食組和普通對(duì)照組，P0.05)，但高脂膳食組顯著低于普通對(duì)照組(P

【關(guān)鍵詞】 高脂膳食；腦老化；突觸可塑性；膜流動(dòng)性

【Abstract】 Objective To examine the effects of high fat diet on learning as well as on synaptic plasticity and afford scientific evidence to rational diet and prevent brain aging. Methods Forty male ICR mice were randomly pided into the high fat diet only， the Dgalactoseinduced brain aging， brain aging plus high fat diet， and normal control groups. Mice were given 100 mg·kg-1·d-1 subcutaneous injection of Dgalactose to prepare brain aging model for 9 w. Morris water maze (MWM) test was employed to determine their spatial learning and memory abilities. Flow cytometry (FCM) was used to analyze the amount of hippocampal synaptosomes. Membrane fluidity of synaptosomes was measured by fluorescence polarization technique. Results (1)In Morris water maze test， brain aging mice showed a significanly longer escape latency (EL) than that of the normal control mice (P＜0.05). There was no statistical difference in EL between brain aging mice plus high fat diet and brain aging mice groups (P＞0.05)， and between the control and high fat diet groups (P＞0.05). (2)Number of synaptosomes: The number of synaptosomes in brain aging mice and brain aging mice plus high fat diet groups were less than those in nonbrain aging mice (the high fat diet and the control mice groups) (P＜0.05). There were no statistical difference in the number of synaptosomes between brain aging mice plus high fat diet and brain aging mice groups(P＞0.05). The high fat diet group was less than that of the normal control group (P＜0.05). (3)Membrane fluidity of synaptosomes: The fluidity of membrane in brain aging group and brain aging mice plus high fat diet group were less than that in the control group (P＜0.05). There were no statistical difference between brain aging mice plus high fat diet groups and brain aging mice group (P＞0.05). The high fat diet group was less than that of the normal control group (P＜0.05). Conclusions High fat diet can reduce the number and the fluidity of hippocampal synaptosomes in mice. But high fat diet has no significant influence on learning and has no significant synergism effects on the Dgalactoseinduced brain aging.

【Key words】 High fat diet; Brain aging; Synaptic plasticity; Membrane fluidity

大腦皮層和海馬是學(xué)習(xí)記憶功能相關(guān)腦區(qū)，研究發(fā)現(xiàn)，衰老時(shí)該區(qū)域突觸形態(tài)結(jié)構(gòu)和數(shù)量發(fā)生變化，包括突觸密度減少、突觸界面曲率降低、間隙寬度加大和變寬、突觸后致密物質(zhì)變薄、突觸體膜的流動(dòng)性降低以及突觸素含量減少等，這些變化可引起學(xué)習(xí)記憶功能障礙〔1〕 。阿爾茨海默病(AD)常被認(rèn)為是一種加速的腦老化，患者學(xué)習(xí)記憶功能障礙的機(jī)制之一是海馬神經(jīng)元的突觸丟失和突觸可塑性的變化〔2〕。膳食脂肪的攝入量與認(rèn)知功能及某些神經(jīng)系統(tǒng)疾患密切相關(guān)，例如高脂膳食增加AD和其他類型癡呆發(fā)生的危險(xiǎn)性〔3，4〕。本研究以D半乳糖腦老化小鼠模型為陽性對(duì)照，探討髙脂膳食對(duì)大腦突觸可塑性相關(guān)指標(biāo)的影響，為合理膳食抗腦老化提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其處理

3月齡清潔級(jí)雄性ICR小鼠40只，體重30～45 g，由首都醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，自由攝食和飲水。適應(yīng)性飼養(yǎng)1 w后，將小鼠按體重隨機(jī)分為4組，即腦老化組、模型組、高脂膳食組、普通對(duì)照組，每組10只。腦老化模型構(gòu)建：以D半乳糖100 mg/kg 頸背部皮下注射，1次/d，連續(xù)9 w。高脂膳食干預(yù)：相關(guān)小鼠飼以特制高脂飼料，配方為基礎(chǔ)飼料79%、豬油10%、蛋黃粉10%、膽固醇1%。其余飼養(yǎng)條件同普通對(duì)照鼠。

1.2 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)

完成9 w實(shí)驗(yàn)干預(yù)后進(jìn)行Morris水迷宮（MWM）實(shí)驗(yàn)以檢測(cè)小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力，具體方法見文獻(xiàn)〔5〕，共進(jìn)行5 d，其間各組小鼠保持原干預(yù)措施不變。

1.3 突觸體流式計(jì)數(shù)

參照文獻(xiàn)〔6〕，稍作改動(dòng)。小鼠斷頭處死，迅速取大腦皮層及海馬，清潔稱重，用預(yù)冷的0.32 mol/L蔗糖液（pH7.0）制成10%勻漿，離心10 min，取上清液鋪加在1.2 mol/L冷蔗糖液表面，50 000 r/min離心15 min，小心取出突觸體層帶，按1∶3的比例用0.32 mol/L冷蔗糖液稀釋。稀釋液緩慢鋪加在0.8 mol/L冷蔗糖液表面，50 000 r/min離心15 min，棄上清，沉淀即為突觸體。用Na介質(zhì)（NaPSS）緩沖液1 ml懸浮突觸體，考馬斯亮藍(lán)法（Bradford）測(cè)定突觸體懸液蛋白質(zhì)濃度，調(diào)整蛋白濃度在120～200 mg/L，4°C保存。取突觸體懸液100 μl，以突觸泡膜素為一抗，異硫氰酸熒光素（FITC）標(biāo)記的羊抗鼠單克隆抗體為二抗，對(duì)突觸體進(jìn)行免疫熒光間接染色，基本步驟為：固定液4℃固定2 h，一抗工作液4℃孵育1.5 h，F(xiàn)ITC熒光標(biāo)記二抗工作液4℃孵育1.5 h。洗滌液洗滌2次，離心5 min，適量磷酸鹽緩沖液（PBS）重懸浮，流式細(xì)胞儀(FCM)計(jì)數(shù)。

1.4 突觸體膜流動(dòng)性測(cè)定

采用熒光偏振法〔7〕。取突觸體懸液500 μl，加入等體積20 μmol/L熒光探針1，62苯基1，3，5乙三烯（DPH）工作液，37℃避光孵育15 min，4℃，13 000 r/min離心2 min，沉淀重懸浮于NaPSS液中，37℃均衡10 min，用熒光分光光度計(jì)測(cè)熒光偏振強(qiáng)度。激發(fā)光波長360 nm，發(fā)射光波長430 nm。先用無標(biāo)記對(duì)照突觸體懸液測(cè)定I90°，0°和I90°，90°的熒光光度值，計(jì)算熒光偏振校正因子，然后測(cè)樣品I90°，0°和I90°，90°，計(jì)算樣品突觸體膜偏振度和膜黏滯度η，蛋白濃度測(cè)定采用Bradford法。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)以x±s表示，多組均數(shù)間比較采用OnewayANOVA分析，兩兩比較采用最小顯著差法(LSD)檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 突觸體計(jì)數(shù)和突觸體膜流動(dòng)性

腦老化組和模型組突觸體數(shù)量顯著低于非腦老化組(高脂膳食組和普通對(duì)照組，P0.05)。高脂膳食組突觸體數(shù)量顯著低于普通對(duì)照組(P＜0.05)。腦老化組及模型組突觸體膜黏滯度顯著高于普通對(duì)照組(P0.05)。高脂膳食組顯著高于普通對(duì)照組(P

2.2 MWM結(jié)果

腦老化組小鼠的逃避潛伏期（EL）顯著高于普通對(duì)照組(P0.05)。

3 討論

腦組織由于代謝水平高而自身抗氧化能力弱，易受活性氧自由基損害，根據(jù)老化的自由基理論，通過注射D半乳糖可使動(dòng)物產(chǎn)生過量氧自由基而誘導(dǎo)發(fā)生腦老化，以此形成的腦老化動(dòng)物模型已被用于老化和抗老化研究。本研究以D半乳糖誘導(dǎo)的腦老化小鼠為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，通過Morris水迷宮測(cè)試，證實(shí)其學(xué)習(xí)記憶能力明顯受損，表明腦老化模型建立成功。但模型組EL與腦老化組無差異，表明高脂膳食并未使腦老化小鼠學(xué)習(xí)能力進(jìn)一步受損。高脂膳食對(duì)正常小鼠的學(xué)習(xí)能力也無明顯影響。這與有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道〔8〕的結(jié)果不一致，分析可能與本研究所采用的高脂飼料中添加了蛋黃粉有關(guān)。蛋黃粉中含有豐富的卵磷脂和維生素A等腦營養(yǎng)成分。

本研究發(fā)現(xiàn)，D半乳糖誘導(dǎo)的腦老化小鼠大腦神經(jīng)元突觸體形成數(shù)量減少，突觸體膜流動(dòng)性降低，表明該腦老化模型小鼠有神經(jīng)突觸的丟失，突觸細(xì)微形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化和突觸功能下降。腦老化的一個(gè)基本表現(xiàn)是學(xué)習(xí)記憶能力的衰退，學(xué)習(xí)記憶的基礎(chǔ)是神經(jīng)系統(tǒng)的高度可塑性。突觸是實(shí)現(xiàn)腦功能的關(guān)鍵部位，其可塑性代表了整個(gè)神經(jīng)回路的可塑性。突觸可塑性包括突觸傳遞可塑性、突觸發(fā)育可塑性和突觸形態(tài)（包括突觸丟失和新的突觸聯(lián)系的形成）的可塑性〔9，10〕。本研究所檢測(cè)的小鼠的皮層和海馬的突觸體數(shù)量和突觸體膜流動(dòng)性均為突觸可塑性相關(guān)指標(biāo)〔9，10〕。突觸體形成的數(shù)量一定程度上可反映神經(jīng)元突觸連接的多少，突觸體膜的流動(dòng)性則可反映突觸傳遞功能。老年鼠大腦突觸體膜膽固醇含量較年輕鼠顯著增高〔11〕，而膜中膽固醇含量增加，特別是膽固醇與磷脂比例增加，可引起細(xì)胞膜流動(dòng)性下降〔12〕。皮層和海馬神經(jīng)細(xì)胞膜的膽固醇含量較其他腦區(qū)高。因此，在腦老化過程中，皮層、海馬神經(jīng)元的膜流動(dòng)性最易受到影響。本研究采用的D半乳糖腦老化模型，主要基于脂質(zhì)過氧化損傷機(jī)制，研究表明同樣能夠造成大腦突觸體形成數(shù)量減少和突觸體膜流動(dòng)性下降，但高脂膳食并未使D半乳糖的這種不良效應(yīng)進(jìn)一步加重，原因可能在于高脂膳食本身也是主要通過引發(fā)過氧化反應(yīng)而損害腦功能，兩種因素通過同一種機(jī)制影響突觸可塑性，使其協(xié)同效應(yīng)相對(duì)不明顯。

本研究發(fā)現(xiàn)，盡管高脂膳食并未明顯影響正常小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，但卻已導(dǎo)致正常小鼠突觸體數(shù)量衰減和突觸體膜流動(dòng)性下降，說明高脂膳食對(duì)突觸可塑性有確實(shí)的影響，另一方面說明學(xué)習(xí)記憶能力并不單純依賴于突觸可塑性。本文關(guān)于高脂膳食對(duì)腦老化小鼠和正常小鼠突觸可塑性影響的研究結(jié)果提示，預(yù)防腦老化不僅是在老年期，更根本的措施應(yīng)該是在各個(gè)年齡階段均保持良好飲食習(xí)慣，避免長期高脂膳食。

參考文獻(xiàn)

1 Zhang X，Liu H，Wu J，et al.Metabonomic alterations in hippocampus，temporal and prefrontal cortex with age in rats〔J〕.Neurochem Int，2009；54(8)：4817.

2 Walsh DM，Selkoe DJ.Deciphering the molecular basis of memory failure in Alzheimer′s disease〔J〕.Neuron，2004；44(1)：18193.

3 Bennett DA，Schneider JA，Wilson RS，et al.Neurofibrillary tangles mediate the association of amyloid load with clinical Alzheimer disease and level of cognitive function〔J〕.Arch Neurol，2004；61(3)：37884.

4 Kanoski SE，Meisel RL，Mullins AJ，et al.The effects of energyrich diets on discrimination reversal learning and on BDNF in the hippocampus and prefrontal cortex of the rat〔J〕.Behav Brain Res，2007；182(1)：5766.

5 高秋菊，劉愛國，薛春洪，等.不同劑量碘對(duì)小鼠迷宮前后大腦乙酰膽堿和乙酰膽堿酯酶的影響〔J〕.中國地方病學(xué)雜志，2005；24(5)：5079.

6 Gylys KH，F(xiàn)ein JA，Yang FS，et al.Increased cholesterol in a betapositive nerve terminals from Alzheimer′s disease cortex〔J〕.Neurobiol Aging，2007；28(1)：817.

7 Maruoka N，Murata T，Omata N，et al.Effects of chlorpromazine on plasma membrane permeability and fluidity in the rat brain:a dynamic positron autoradiography and fluorescence polarization study〔J〕.Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry，2007；31(1)：17886.

8 Winocur G，Greenwood C E.Studies of the effects of high fat diets on cognitive function in a rat model〔J〕.Neurobiol Aging，2005；26(11)：469.

9 Farmer J，Zhao X，van Praag H，et al.Effects of voluntary exercise on synaptic plasticity and gene expression in the dentate gyrus of adult male SpragueDawley rats in vivo〔J〕.Neuroscience，2004；124(1)：719.

10 Vaynman S，Ying Z，GomezPinilla F.Hippocampal BDNF mediates the efficacy of exercise on synaptic plasticity and cognition〔J〕.Eur J Neurosci，2004；20(10)：258090.

第8篇：醫(yī)學(xué)影像技術(shù)技能范文

慢性支氣管炎(CB)是一種嚴(yán)重危害人類健康的常見病，隨著世界人口老齡化的到來，臨床上CB的患病率逐年升高，早期積極防治具有重要意義。野為清熱類藥，具有疏風(fēng)清熱、消腫解毒、抗感染、抗病毒的功效，在全國各地(包括甘肅在內(nèi))均有出產(chǎn)。本實(shí)驗(yàn)旨在探討野提取物對(duì)CB大鼠免疫功能及病理形態(tài)學(xué)的影響，通過實(shí)驗(yàn)揭示其效應(yīng)及其部分作用機(jī)理，為野的臨床廣泛應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

材料與方法

藥物與試劑：精制脂多糖，美國Sigma公司產(chǎn)品；野提取物，野購自甘肅中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，提取物由甘肅中醫(yī)學(xué)院中藥制劑教研室協(xié)助制備；SOD測(cè)試盒，南京建成生物工程研究所提供(批號(hào)20080424)；其他試劑均為分析純級(jí)。

實(shí)驗(yàn)儀器：電子天平，電子分析天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)，VIS-7220分光光度儀(北京瑞利分析儀器廠)，HH.SH.CV2型電熱恒溫水浴鍋(濟(jì)南醫(yī)療器械廠)。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SPF級(jí)Wistar大鼠，48只，體重200±20g，雌雄各半，由甘肅中醫(yī)學(xué)院科研實(shí)驗(yàn)中心提供。

分組及模型制備：48只Wistar大鼠，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，CB慢性支氣管炎模型組，喘息靈對(duì)照組，野提取物低、中、高劑量組，每組8只。各組大鼠腹腔注射烏拉坦(1.4g/kg)麻醉后，仰臥位固定于操作臺(tái)，常規(guī)消毒，縱向切開頸部，分離皮下，暴露氣管，4號(hào)針頭穿刺氣管，除了正常對(duì)照組氣管注入液以生理鹽水代替內(nèi)毒素外，其余注入1g/L的脂多糖200μl建立CB模型［1,2］；第8天起，正常對(duì)照組、CB模型組每日灌服等體積生理鹽水，中藥對(duì)照組灌服喘息靈膠囊0.13g/（kg•日），野低、中、高劑量組分別灌胃野提取物0.7、1.4，2、8g/（kg•日），共21天。

觀察指標(biāo)：①脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)檢測(cè)：各組動(dòng)物按上述方法給藥后，第22天各組大鼠稱重后處死，解剖，取脾臟、胸腺，用生理鹽水洗凈，吸干，稱重，以臟器濕重(mg/g)表示脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)。②血清及肺組織勻漿的制備：各組動(dòng)物按上述方法給藥后，第22天各組大鼠股動(dòng)脈取血分離血清待檢。③用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定各組大鼠血清及組織中的SOD水平。

結(jié) 果

野提取物對(duì)大鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)的影響：模型組脾臟指數(shù)較空白對(duì)照組下降明顯(P＜0.05)，野中、高劑量組脾臟指數(shù)比慢性支氣管炎模型組大鼠明顯升高(P＜0.05)，且高劑量組脾臟指數(shù)與低劑量組比較有顯著差異(P＜0.05)；胸腺指數(shù)各組間比較無顯著性差異。見表1。

野提取物對(duì)大鼠血清及肺組織SOD含量變化的影響：模型組大鼠血清和肺組織中的SOD活力與空白對(duì)照組比較明顯降低(P＜0.05)，除野提取物低劑量組外，其余各組與模型組比較，大鼠血清和肺組織中的SOD活力均明顯升高差異(P＜0.05)，且高劑量組與低劑量組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

討 論

本研究CB模型制造成功，脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)是反映機(jī)體免疫功能最直接的指標(biāo)。采用脂多糖復(fù)制的CB大鼠模型由于缺氧和慢性炎癥，細(xì)胞耗氧量明顯增加，體內(nèi)產(chǎn)生大量自由基，其血清、肺組織中SOD活力顯著下降，脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強(qiáng)，而肺部慢性炎癥又使得機(jī)體抵抗力降低，抗自由基能力減弱，加劇了細(xì)胞壞死和組織損傷，致使病情進(jìn)一步加重，肺功能進(jìn)一步減退［1］。而經(jīng)野提取物具有抗氧化作用，治療后，SOD水平顯著提高，表明野提取物確具有降低脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，減輕氧自由基損傷，保護(hù)肺組織的作用。

本課題實(shí)驗(yàn)證明調(diào)節(jié)免疫、降低脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，改善肺組織的病理損傷均為野提取物減輕CB炎癥效應(yīng)的機(jī)制。

第9篇：醫(yī)學(xué)影像技術(shù)技能范文

【關(guān)鍵詞】 瑞舒伐他??；奧美沙坦酯；高血壓

DOI：10.14163/ki.11-5547/r.2016.30.094

高血壓多發(fā)于老年群體中， 為臨床常見心血管疾病。其致病原因?yàn)樯罘绞讲唤】?、膳食結(jié)構(gòu)不合理等。高血壓老年患者臨床癥狀不典型， 易受外界因素影響， 血壓較不穩(wěn)定， 且易產(chǎn)生性低血壓[1]。相關(guān)研究指出， 高血壓患者心血管不良事件的發(fā)生率不僅與患者的血壓值密切相關(guān)， 且與血壓變異性的變化聯(lián)系緊密[2]。傳統(tǒng)治療高血壓多采用單藥口服治療， 效果較不理想。本研究選取本院收治的68例老年高血壓患者， 通過分組， 對(duì)比分析瑞舒伐他汀聯(lián)合奧美沙坦酯對(duì)老年高血壓患者內(nèi)皮功能及血壓變異性的影響。結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2013年5月～2015年4月收治的68例老年高血壓患者， 隨機(jī)為對(duì)照組和研究組， 各34例。對(duì)照組男18例， 女16例， 平均年齡（69.4±7.5）歲；研究組男19例， 女15例， 平均年齡（69.5±7.6）歲。兩組患者一般資料比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 對(duì)照組患者予以奧美沙坦酯（福建天泉藥業(yè)股份有限公司， 國藥準(zhǔn)字H20150016）口服治療， 1次/d， 20 mg/次。研究組患者在對(duì)照組基礎(chǔ)上予以瑞舒伐他?。ㄉ綎|朗諾制藥有限公司， 國藥準(zhǔn)字H20153194）口服治療， 1次/d， 10 mg/次。兩組患者均連續(xù)治療12周。

1. 3 觀察指標(biāo) 比較兩組患者治療前后血壓變異性及內(nèi)皮功能指標(biāo)變化。包括內(nèi)皮功能指標(biāo)ET-1、NO。血壓變異性包括日間收縮壓標(biāo)準(zhǔn)差（dSSD）、日間舒張壓標(biāo)準(zhǔn)差（dDSD）、夜間收縮壓均數(shù)（nSBP）、夜間舒張壓均數(shù)（nDBP）、24 h SBP、24 h DBP。

1. 4 檢測(cè)方法 兩組患者均于清晨抽取5 ml空腹外周靜脈血， 予以抗凝及離心處理后， 取上清液置入EP管內(nèi)低溫下保存。應(yīng)用放射免疫法及化學(xué)比色法分別測(cè)定ET-1、NO水平。

1. 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P

2 結(jié)果

2. 1 兩組患者內(nèi)皮功能指標(biāo)變化比較 治療前， 兩組患者內(nèi)皮功能指標(biāo)比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.319、0.755， P>0.05）；治療后， 兩組患者內(nèi)皮功能指標(biāo)均顯著改善， 研究組ET-1及NO水平優(yōu)于對(duì)照組（t=6.349、6.916， P

2. 2 兩組患者血壓變異性比較 治療前， 兩組患者血壓變異比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.779、0.182、0.304、0.526、0.759、0.412， P>0.05）；治療后， 兩組患者血壓變異性均優(yōu)于治療前， 且研究組明顯優(yōu)于對(duì)照組（t=3.022、3.162、3.353、2.038、2.022、2.135， P

3 討論

近年來， 隨著我國人口老齡化趨勢(shì)的發(fā)展及人們生活方式的轉(zhuǎn)變， 其發(fā)病率逐年增長。但相關(guān)研究顯示[3]， 我國老年高血壓患者的血壓控制達(dá)標(biāo)率與治療率較低。目前， 高血壓的臨床治療目標(biāo)為最大程度降低死亡率及心血管并發(fā)癥發(fā)生率。

相關(guān)研究表明[4]， 血壓波動(dòng)幅度較大是引發(fā)腦卒中的獨(dú)立影響因素， 血壓波動(dòng)上升， 腦卒中發(fā)生危險(xiǎn)隨之增加， 同時(shí)還可引發(fā)內(nèi)皮炎癥反應(yīng)。因此控制高血壓患者血壓變異性水平可有效預(yù)防、減少心血管事件發(fā)生。ET-1與NO為血管內(nèi)皮細(xì)胞功能重要標(biāo)識(shí)， 由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成， 二者水平與高血壓形成與發(fā)展聯(lián)系密切。本研究對(duì)老年高血壓患者予以瑞舒伐他汀與奧美沙坦酯聯(lián)合治療， 結(jié)果顯示治療后， 兩組患者內(nèi)皮功能指標(biāo)均顯著改善， 研究組ET-1及NO水平優(yōu)于對(duì)照組（P

綜上所述， 對(duì)老年高血壓患者予以瑞舒伐他汀與奧美沙坦酯聯(lián)合治療， 可顯著降低患者血壓變異性， 有效改善內(nèi)皮功能， 在臨床治療中具有重要意義。

參考文獻(xiàn)

[1] 沈燕青， 徐欣， 陳浩.瑞舒伐他汀聯(lián)合奧美沙坦對(duì)老年高血壓患者內(nèi)皮功能和血壓變異性的影響.中國老年學(xué)雜志， 2016， 36（3）：611-613.

[2] 賀文婷， 歐妍， 拓紅梅.瑞舒伐他汀和纈沙坦對(duì)高血壓患者頸動(dòng)脈內(nèi)膜厚度及血清炎癥因子的影響.陜西醫(yī)學(xué)雜志， 2014， 43（11）：1531-1532.

[3] 黃玨凡.瑞舒伐他汀聯(lián)合坎地沙坦治療高血壓合并高脂血癥的臨床觀察.包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2013， 29（3）：45-47.

[4] 周政.纈沙坦氨氯地平片聯(lián)合瑞舒伐他汀對(duì)高血壓患者h(yuǎn)s-CRP和MMP-9濃度的影響.吉林醫(yī)學(xué)， 2016， 37（3）：567-568.