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分子生物學(xué)進(jìn)展精選(九篇)

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第1篇:分子生物學(xué)進(jìn)展范文

Abstract: The animal protects own one driving way to ambient temperature's adaptation, displays in the duplication and the expression pattern change of the cell and presents the new gene open and the new protein factor synthesis. The gene level, the protein level, the cell membrane level and so on three aspects has carried on the summary about the research survey of animal which adapts to the ambient temperature, and discussed the molecular biology mechanism as well as in evolution significance which animal adapts to the ambient temperature.

關(guān)鍵詞: 動(dòng)物;溫度;基因;蛋白質(zhì);細(xì)胞膜

Key words: animal;temperature;gene;protein;cell membrane

中圖分類號(hào):Q291文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1006-4311(2011)25-0324-02

0 引言

動(dòng)物的一切生命活動(dòng)(生長(zhǎng)、發(fā)育和生殖等)都是在一定的環(huán)境溫度中進(jìn)行的。一般說來,變溫動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育所要求的溫度條件在 6-36℃范圍內(nèi);恒溫動(dòng)物由于自身有調(diào)節(jié)體溫的能力,對(duì)環(huán)境溫度的適應(yīng)范圍廣些[1]。當(dāng)環(huán)境溫度在最低和最適溫度之間時(shí),動(dòng)物體內(nèi)的生理生化反應(yīng)會(huì)隨著溫度的升高而加快,代謝活動(dòng)加強(qiáng),從而加快生長(zhǎng)發(fā)育速度;當(dāng)溫度高于最適溫度后,參與生理生化反應(yīng)的酶系統(tǒng)受到影響,代謝活動(dòng)受阻,勢(shì)必影響到動(dòng)物正常的生長(zhǎng)發(fā)育。環(huán)境溫度若超出動(dòng)物所要求的范圍,動(dòng)物的生命活動(dòng)就會(huì)出現(xiàn)停滯;溫度過高或過低會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物體死亡[2]。近年來關(guān)于動(dòng)物對(duì)外界環(huán)境溫度適應(yīng)的分子生物學(xué)研究主要集中在基因水平、蛋白質(zhì)水平和細(xì)胞膜水平三個(gè)方面。

1 基因水平上的溫度

動(dòng)物對(duì)環(huán)境溫度的適應(yīng),會(huì)使自身的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄和表達(dá)模式發(fā)成變化,以適合環(huán)境的變化,此時(shí)它會(huì)出現(xiàn)新的基因開放和新蛋白因子的合成,這總的來說是動(dòng)物對(duì)自身的一種保護(hù)方式。

外界環(huán)境溫度的改變可以誘導(dǎo)動(dòng)物體內(nèi)熱激蛋白家族基因的大量表達(dá),從而調(diào)整動(dòng)物有機(jī)體對(duì)外界環(huán)境溫度的適應(yīng)。

盡管熱激蛋白家族基因序列保守,編碼序列變異較低,但是,由于目前動(dòng)物種類逐漸增多,熱激蛋白基因序列和拷貝數(shù)等也在逐步顯示出不同的趨勢(shì)。

適應(yīng)不同溫度的果蠅居群,其熱激蛋白70基因內(nèi)存在兩個(gè)顯著的差異[4],一個(gè)大的插入/缺失(indel)多態(tài)位點(diǎn)(56H8/122)和一個(gè)單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)差異;對(duì)于來自澳大利亞東部不同緯度的11個(gè)居群,插入/缺失位點(diǎn)的頻率與緯度呈正相關(guān),由于緯度與溫度最大(?。┲岛推骄党守?fù)相關(guān),提示溫度和熱值變化可能對(duì)Hsp70基因的這一變異頻率產(chǎn)生了影響,Anderson[5]等也發(fā)現(xiàn)黑腹果蠅3號(hào)染色體右臂上hsr-omega基因的8bp缺失作為一個(gè)遺傳標(biāo)記與緯度及最高溫(最熱月)呈正相關(guān),另一個(gè)3端重復(fù)的標(biāo)記則多出現(xiàn)于溫帶群體中,與冷適應(yīng)性相關(guān)。適應(yīng)于較低緯度的Drosophila lummei有7個(gè)Hsp70基因拷貝,其熱脅迫抗性高于具有5個(gè)拷貝的Drosophila lummei,后者在分布上處于較高的緯度,提示Hsp70基因結(jié)構(gòu)與果蠅的適應(yīng)緯度有相關(guān)性[6]。

果蠅體內(nèi)一個(gè)名為“DmDG”的基因活性一旦下降,果蠅就會(huì)“怕熱”,從而喜歡向溫度更低的地方轉(zhuǎn)移,其喜好的環(huán)境溫度要比正常情況下低5攝氏度[7]?!癉mDG”基因可能與果蠅的代謝功能相關(guān)。這個(gè)基因活性下降后,果蠅體內(nèi)能量代謝就會(huì)活躍,于是就會(huì)更喜歡低溫環(huán)境。動(dòng)物體內(nèi)利用基因調(diào)節(jié)溫度適應(yīng)性的機(jī)制普遍存在,這可以使動(dòng)物適應(yīng)很大的溫度變化。

克隆斑潛蠅(Liriomyza sativae)3種小分子Hsp(Hsp19.5、Hsp20.8和Hsp21.7)和2種Hsp60(TCP1α,TCP1ζ),定量PCR分析表明,3種小分子Hsp均能被低溫所誘導(dǎo)表達(dá),而且Hsp20.8對(duì)低溫更敏感,這意味著不同的小分子Hsp可能響應(yīng)不同強(qiáng)度的低溫脅迫。6種Hsp基因(Hsp19.5、Hsp20.8、Hsp21.7、TCP1α、TCP1ζ和Hsp90)的相對(duì)表達(dá)量在不同生長(zhǎng)發(fā)育階段差異顯著??偟谋磉_(dá)趨勢(shì)是:小分子Hsp(Hsp19.5、Hsp20.8、Hsp21.7)在蛹期表達(dá)量最高,而大分子Hsp(TCP1α、TCP1ζ、Hsp90)的表達(dá)量則隨著生長(zhǎng)發(fā)育而遞增[8]。這意味著除響應(yīng)溫度脅迫外,熱激蛋白基因可能還在昆蟲的生長(zhǎng)發(fā)育中起著一定的作用。

2 蛋白質(zhì)水平上的溫度適應(yīng)

熱激蛋白(Hsps)是生物適應(yīng)環(huán)境溫度變化的一個(gè)重要媒介分子。受到熱脅迫刺激后,動(dòng)物有機(jī)體對(duì)熱的脅迫抗性提高與熱激蛋白表達(dá)量普遍成正相關(guān)[9]。

熱激蛋白存在于所有動(dòng)物細(xì)胞中,是動(dòng)物受到應(yīng)激原刺激后誘導(dǎo)產(chǎn)生的一組應(yīng)激蛋白,與機(jī)體的應(yīng)激關(guān)系密切,在進(jìn)化上高度保守。對(duì)滯育的吉普賽蛾(Lymantria dispar)幼蟲給以37-41℃的熱激可以誘發(fā)合成7種Hsps(分子量分別為90,75,73,60,42,29和22ku),-10--20℃的冷休克導(dǎo)致其產(chǎn)生2種Hsps(90和75ku),當(dāng)在25℃下恢復(fù)時(shí)另外又合成分子量29ku的熱激蛋白[10]。斑馬魚在熱脅迫(28-37℃)和冷脅迫(20-28℃)下的熱激蛋白表達(dá)模式存在差異,在熱脅迫條件下,Hsp70呈上調(diào)表達(dá),而冷脅迫下Hsp70則顯穩(wěn)定表達(dá)[11]。將新月魚的成纖維細(xì)胞系的培養(yǎng)溫度從28℃調(diào)節(jié)到37℃時(shí)誘導(dǎo)產(chǎn)生3種不同的熱休克蛋白[12]。

較緩和的高溫對(duì)B型煙粉虱Hsp70表達(dá)具有誘導(dǎo)作用,極端高溫會(huì)抑制Hsp70表達(dá)。在37-41℃范圍內(nèi),Hsp70的表達(dá)量隨著溫度的升高而升高,在41℃時(shí)達(dá)到最高峰;當(dāng)溫度升高到43℃和45℃,B型煙粉虱Hsp70的表達(dá)量迅速降低。B型煙粉虱溫室種群體內(nèi)的Hsp70表達(dá)量與溫室內(nèi)的溫度有關(guān):上午到中午隨著氣溫的升高,B型煙粉虱體內(nèi)Hsp70表達(dá)量隨之上升;傍晚氣溫降低時(shí),Hsp70表達(dá)量也隨之下降[13]。Kimura(1998)比較過3個(gè)果蠅近緣種熱休克蛋白基因的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)在冷激條件下,亞熱帶低海拔種(Drosophila watanabe)誘導(dǎo)熱休克蛋白表達(dá)的閾溫度要比溫帶種(D.traurara)和亞熱帶高海拔種(D.trapezifrons)高,而亞熱帶低海拔種的耐寒性卻最低,說明在果蠅中熱休克蛋白基因表達(dá)和耐寒性呈負(fù)相關(guān)[14]。Sorensen et al(2001)研究果蠅(D.huzzatii)不同自然種群間HSP70基因表達(dá)后,發(fā)現(xiàn)在冷激下寒溫帶種群誘導(dǎo)熱休克蛋白基因表達(dá)的閾溫度要明顯低于熱帶種群[15]。

3 細(xì)胞膜水平上的溫度適應(yīng)

在正常生理溫度下,細(xì)胞膜的主動(dòng)運(yùn)輸、酶的活性、胞外分泌等機(jī)能才能正常進(jìn)行[16]。細(xì)胞的膜脂在不同溫度下具有不同的?;満玩滈L(zhǎng)度[16]。細(xì)胞膜化學(xué)成分改變可能是對(duì)溫度適應(yīng)的最普遍模式[16]。低溫通過影響細(xì)胞膜的流動(dòng)性而影響細(xì)胞正常的機(jī)能,對(duì)低溫的適應(yīng)不可避免地會(huì)涉及到細(xì)胞膜化學(xué)成分的改變。膽固醇能夠促使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的有序化,從而增加細(xì)胞膜的流動(dòng)性。魚類通過改變脂肪酸中不飽和成分含量和極性磷脂頭部組分,減少細(xì)胞膜中甾醇/磷脂比率來改變膜的流動(dòng)性使魚類更加適應(yīng)寒冷的外界環(huán)境[17]。通過對(duì)不同溫度適應(yīng)下虹鱒魚(rainbow trout)的肝、腎、腮等組織細(xì)胞細(xì)胞膜中膽固醇(C)與磷脂(P)含量的研究發(fā)現(xiàn),5℃適應(yīng)組細(xì)胞膜的C/P 值顯著低于20℃適應(yīng)組[3]。把魚體暴露于低溫下會(huì)導(dǎo)致的極性磷脂中非飽和脂肪酸/飽和脂肪酸比例增高,有利于在低溫下維持細(xì)胞膜流動(dòng)性,使魚體更能抵抗低溫?fù)p害[18]。低溫還誘導(dǎo)細(xì)胞脂肪酸氧化酶的生成,由于它可以提高細(xì)胞膜中不飽和脂肪酸的含量,從而提高了細(xì)胞膜在低溫條件下的流動(dòng)性[19]。

在動(dòng)物對(duì)溫度的適應(yīng)過程中,動(dòng)物細(xì)胞還通過膜上各種離子通道數(shù)量及分布的改變使細(xì)胞內(nèi)離子的成分和濃度發(fā)生相應(yīng)的改變。研究表明,在北極生活的兩種魚類:Trematomus bernacchii和Trematomus newnesi在適應(yīng)較高溫度過程中,腮和腎等滲透壓調(diào)節(jié)器官細(xì)胞膜上的Na/K+-ATP酶活性升高,將細(xì)胞內(nèi)鈉的、氯離子快速泵出體外,從而使得血清中滲透壓明顯降低,與海水間的滲透壓差增大。研究結(jié)果表明,在冷環(huán)境中,魚類靠升高體液離子濃度及滲透壓來縮小與外界海水之間的差異,從而減少能量損耗[3]。鴨子對(duì)冷適應(yīng)表現(xiàn)為肌漿網(wǎng)或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上Ca2+-ATPase活性及Ca2+釋放通道數(shù)量上的改變時(shí)相與非寒顫產(chǎn)熱的發(fā)生相一致[20]。

參考文獻(xiàn):

[1]林育真.生態(tài)學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,2004.

[2]孫儒泳.動(dòng)物生態(tài)學(xué)原理[M].北京:北京師范大學(xué)出版社,2001.

[3]葛偉文,王之賢.溫度適應(yīng)的分子生物學(xué)機(jī)制[J].生理科學(xué)進(jìn)展,1997, 28(3):268-270.

[4]Bettencourt B R,I Kim,A A Hoffmann,et al. Response to natural and laboratory selection at the Drosophila hsp70 genes[J]. Evolution,2002,56(9):1796-1801.

[5]Anderson A R,Collinge J E,Hoffmann A A,et al. Thermal tolerance trade-offs associated with the right arm of chromosome 3 and marked by the hsr-omega gene in Drosophila melanogaster[J].Heredity,2003,90(2):195-202.

[6]Evgen'ev M B,Zatsepina O G,Garbuz D G,et al. Evolution and arrangement of the hsp70 gene cluster in two closely-related species of the virilis group of Drosophila[J].Chromosoma,2004,113(5):223-232.

[7]Ken-ichi T,Yoshiro N,Utako K,et al. Changes in Temperature Preferences and Energy Homeostasis in Dystroglycan Mutants[J]. Sciense,2009,323:1740-1743.

[8]Li H H,Chen Z W,Le K. Cloning and expression of five heat shock protein genes in relation to cold hardening and development in the leafminer,Liriomyza sativa[J]. Journal of Insect Physiology,2009,55(3):279-285.

[9]陳亞瓊,肖調(diào)江,周浙昆.熱激蛋白與生物環(huán)境適應(yīng)及進(jìn)化的關(guān)系[J].自然科學(xué)進(jìn)展,2006,16(9):1066-1073.

[10]Yocum G D,Joplin K H,Denlinger D L. Expression of heat shock proteins in response to high and low temperature extremes in diapausing pharate larva of the gypsy moth,Lymantria dispar [J]. Arch Insect Biochem Physiol,1992,18:239-249.

[11]Airaksinen S,Jokilehto T,Rabergh C M I,et al. Heat-and cold-inducible regulation of HSP70 expression in zebra- fish ZF4 cells[J]. Comparative Biochemistry and Physio- logy-B Biochemistry and Molecular Biology,2003,136(2):275-282.

[12]Yatnasaki M,Tajitna M,Lee K W,et al. Molecular cloning and phylogenetic analysis of Babesia gibsoni heat shock protein 70[J]. Veterinary Parasitology,2002,110(1-2):123-129.

[13]崔旭紅.B型煙粉虱和溫室粉虱熱脅迫適應(yīng)性及其分子生態(tài)機(jī)制[D]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2007.

[14]Kimura R H,Choudary P V,Sehinid C W. Silk worm Bml SNIE increase following cellular insults[J]. Nucleic Acids Res,1999,27:3380-3387.

[15]Sorensen J G,Dahlgaard J,Loeschcke V. Genetic variation in thermal tolerance among natural populations of Drosophila buzzatii:Down regulation of Hsp70 expression and variation in heat stress resistance traits[J].Functional Ecology,2001,15:289-296.

[16]Hazel J R. Thermal adaptation in biological membranes: is homeoviscous adaptation the explanation [J]. Ann Rev Physiol,1995,57:19-42.

[17]Farkas T,F(xiàn)odor E,Kitajka K,et al. Response of fish membranes to environmental temperature[J]. Aquaculture Research,2001,32:645-655.

[18]Jobling M,Bendiksen E A. Dietary lipids and temperature interact to influence tissue fatty acid compositions of Atlantic salmon,Salmo Salar L. parr [J]. Aquculture Research,2003,34:1423-1441.

第2篇:分子生物學(xué)進(jìn)展范文

【關(guān)鍵詞】 纖維素酶;生物學(xué)研究;生物學(xué)應(yīng)用進(jìn)展

doi:10.3969/j.issn.1004—7484(x).2012.10.659 文章編號(hào):1004—7484(2012)—10—4174—02

纖維素酶由多種水解酶組成,既能在大自然中合成,也是我國(guó)四大工業(yè)酶種工業(yè)合成的重要組成部分,它是一種可再生的、可持續(xù)發(fā)展的酶,它的主要作用就是催化纖維素轉(zhuǎn)化成葡萄糖,纖維素酶普遍存在于大自然中,很多真菌能夠分泌,纖維素酶多年來也廣泛的應(yīng)用于我國(guó)的食品工業(yè)、制酒工業(yè)以及紡織工業(yè)中,對(duì)我國(guó)發(fā)展具有極大的促進(jìn)作用。近年來,隨著生物工程的發(fā)展,對(duì)于纖維素酶分離純化、克隆以及其結(jié)構(gòu)的研究已經(jīng)成為人們研究的熱點(diǎn)以及要解決的難點(diǎn)問題。本文主要分析了纖維素酶組分、基因結(jié)構(gòu)、克隆及表達(dá)、作用機(jī)理、纖維素酶生活中應(yīng)用以及進(jìn)展研究。

1 纖維素酶組分

竇全林1等對(duì)于不同真菌產(chǎn)生的纖維素酶性質(zhì)以及種類做了研究,狹義上一般分成纖維二糖水解酶、內(nèi)切葡聚糖酶以及β葡糖苷酶,內(nèi)切葡聚糖酶是最初破壞纖維素鏈并且起作用的酶,纖維二糖水解酶經(jīng)內(nèi)切葡聚糖酶激活之后的酶,β葡糖苷酶可以分解纖維二糖,使之成為葡萄糖。通過三種酶的共同作用,能夠成功時(shí)的纖維素分解,變成葡萄糖,三者稱為完全纖維素酶系。

2 纖維素酶基因結(jié)構(gòu)

真菌編碼纖維素酶的基因主要在染色體上面,并且隨機(jī)分布,形成基因簇,各具備自己的轉(zhuǎn)錄以及調(diào)節(jié)相應(yīng)的單位,轉(zhuǎn)錄單位叫做轉(zhuǎn)錄終止子,但是目前纖維素酶基因結(jié)構(gòu)上的主要啟動(dòng)因子還不是很明了,值得進(jìn)行進(jìn)一步研究。

3 纖維素酶克隆及表達(dá)

陳小堅(jiān)等對(duì)纖維素酶克隆及表達(dá)進(jìn)行了研究,纖維素酶克隆及表達(dá)主要包括獲得高產(chǎn)菌株以及基因、選擇宿主、構(gòu)建表達(dá)載體、進(jìn)行轉(zhuǎn)化等四大階段。首先是獲得高產(chǎn)菌株以及基因,對(duì)微生物進(jìn)行篩選,選出高產(chǎn)菌株,實(shí)施誘變措施進(jìn)行誘變,然后是獲得基因,如果已知基因序列的情況下,可以從基因組中調(diào)出,未知的情況下,可以從自然界中進(jìn)行微生物分離以及培養(yǎng),選擇基因進(jìn)行克隆。其次,真菌是比較好的表達(dá)宿主,可以達(dá)到分泌蛋白量,進(jìn)行乙?;约疤腔?,獲得纖維素酶的正確表達(dá),獲得很高的蛋白產(chǎn)量。再者是構(gòu)建表達(dá)載體,對(duì)篩選方式、轉(zhuǎn)化以及表達(dá)的方式以及載體進(jìn)行構(gòu)建,爭(zhēng)取能夠啟動(dòng)強(qiáng)啟動(dòng)子,實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)錄,提高啟動(dòng)子效率,表達(dá)目標(biāo)蛋白,提高目標(biāo)蛋白產(chǎn)量。最后是進(jìn)行轉(zhuǎn)化,主要的轉(zhuǎn)化方式有氯化鋰、原生質(zhì)以及農(nóng)桿菌等轉(zhuǎn)化方式,有效提高轉(zhuǎn)化率。

4 纖維素酶作用機(jī)理

陳燕勤2等對(duì)纖維素酶作用機(jī)理進(jìn)行了探討,在1954年,GiIIigan等學(xué)者提出了纖維素酶能夠有效的促進(jìn)纖維素酶的分解的觀點(diǎn),并且復(fù)合分解的效果大于單獨(dú)分解的效果。此后年間,更過的學(xué)者對(duì)于這種作用進(jìn)行了證明,證明方法包括電子顯微鏡以及多種菌種的纖維素酶的應(yīng)用。隨后,F(xiàn)aterstam等發(fā)現(xiàn),纖維二糖水解酶的分解作用是一般的單組酶的兩倍之多,并且分解的時(shí)候,與內(nèi)切葡聚糖酶具有協(xié)同的作用,隨后更多的學(xué)者證明了這種理論,目前,專家以及學(xué)者們對(duì)于這種協(xié)同作用理論也大多呈認(rèn)可或者不反對(duì)狀態(tài),具體還要做進(jìn)一步研究。

5 纖維素酶生活中應(yīng)用

李燕紅3等已經(jīng)對(duì)目前纖維素酶生活中應(yīng)用做了一個(gè)比較系統(tǒng)的研究,從1995到2005年,2005年工業(yè)上酶使用已經(jīng)為1995年的三倍,主要來源為美國(guó)以及日本,這兩個(gè)國(guó)家是纖維素酶應(yīng)用的兩大巨頭,目前纖維素酶以及被廣泛的應(yīng)用于我國(guó)的制酒、紡織、飼料以及食品業(yè)中,并且對(duì)于我國(guó)工業(yè)起到了極大的推動(dòng)作用,首先在食品工業(yè)中,一方面,主要是進(jìn)行橄欖油以及果蔬汁的榨取,去除掉果汁以及蔬菜汁的沉淀物,促進(jìn)谷物水分吸收,去除豆子中的豆衣,實(shí)現(xiàn)谷物蛋白以及淀粉的成功分離等。另一方面,纖維素酶可以用于提取纖維寡糖等可溶性糖,脫離細(xì)胞壁,取出有用的蛋白等。

其次在制酒工業(yè)中,主要有力于葡萄酒以及啤酒的制造,利用纖維素酶,能夠促進(jìn)水解制酒過程中葡萄汁以及大麥汁,有效的分解沉淀物,提高過濾的效率,增加酒香,提高釀酒的效率,促進(jìn)釀酒業(yè)的發(fā)展。

再者是在紡織行業(yè)中,紡織行業(yè)纖維素酶的應(yīng)用仍然屬于比較新興的應(yīng)用,主要用于拋光以及打磨兩個(gè)階段,日常應(yīng)用范圍也比較廣,主要是能夠有效的取出衣物表面存在的碎纖維,方便家庭日常的洗滌工作,通過拋光以及打磨兩個(gè)階段,提高衣物光澤。

最后是飼料行業(yè)。這個(gè)行業(yè)我我國(guó)農(nóng)業(yè)的基礎(chǔ),是保證滿足16億人口大國(guó)溫飽的關(guān)鍵環(huán)節(jié),而纖維素酶又是其中的重點(diǎn)問題,纖維素酶加入到飼料當(dāng)中,能夠起到很好的補(bǔ)充作用,增強(qiáng)動(dòng)物體能,防止動(dòng)物反芻事件發(fā)生。除此以外,還能通過應(yīng)用在纖維素物質(zhì)如去掉谷物殼等中,有效提高動(dòng)物消化的效率,并且分泌相應(yīng)的物質(zhì),促進(jìn)動(dòng)物體內(nèi)的粗糙糧食得到消化以及吸收。

當(dāng)前,無論是能源問題還是食品問題都是建設(shè)中要解決的重點(diǎn)以及難點(diǎn)問題,纖維素酶作為一種生物工程主要建設(shè)工業(yè)酶,其成功的提取以及應(yīng)用,對(duì)于保證我國(guó)解決能源以及食品問題,促進(jìn)我國(guó)農(nóng)業(yè)發(fā)展有著空前意義,纖維素酶憑借其價(jià)格以及成本低廉、應(yīng)用廣泛、使用方便等特點(diǎn),已經(jīng)成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)話題之一,只有加強(qiáng)對(duì)纖維素酶組分、基因結(jié)構(gòu)、克隆及表達(dá)、作用機(jī)理、纖維素酶生活中應(yīng)用以及進(jìn)展進(jìn)行研究,才能使得各環(huán)節(jié)出現(xiàn)的問題得到很好的改善,促進(jìn)各個(gè)環(huán)節(jié)的完善,使得纖維素酶克隆及表達(dá)順利,實(shí)現(xiàn)成功的合成,并且利用纖維素酶,為我國(guó)的農(nóng)業(yè)、紡織業(yè)、制酒業(yè)以及飼料行業(yè)做出貢獻(xiàn),隨著發(fā)展的深入,擴(kuò)展纖維素酶使用的范圍,促進(jìn)纖維素酶的發(fā)展,使其使用范圍深入到我們生活的各個(gè)方面,為我們生活做出貢獻(xiàn)。

參考文獻(xiàn)

[1] 竇全林,陳剛.纖維素酶的研究進(jìn)展及應(yīng)用前景.畜牧與飼料科學(xué),2006,27(5):57—61.

第3篇:分子生物學(xué)進(jìn)展范文

CD44是分布極為廣泛的細(xì)胞表面跨膜糖蛋白,在淋巴細(xì)胞,成纖維細(xì)胞表面均能檢測(cè)到它的表達(dá)[1,2]。CD44蛋白屬于未分類的粘附分子,其正常功能是作為受體識(shí)別透明質(zhì)酸(HA)和膠原蛋白Ⅰ、Ⅳ等,主要參與細(xì)胞-細(xì)胞,細(xì)胞-基質(zhì)之間的特異性粘連過程。

1.1 CD44基因的定位與結(jié)構(gòu)

人類CD44基因位于11號(hào)染色體短臂上,有20個(gè)高度保守的外顯子,完整基因組在染色體DNA上大約跨越50kb。CD44基因的外顯子按表達(dá)方式分為兩種類型:一種是組成型外顯子,另一種是V區(qū)變異型外顯子。組成型外顯子有10個(gè),其中轉(zhuǎn)錄片段存在于所有CD44轉(zhuǎn)錄子中。僅含組成型外顯子的CD44轉(zhuǎn)錄子,稱為標(biāo)準(zhǔn)型CD44(CD44S),它編碼361個(gè)氨基酸(Aa)。V區(qū)外顯子也有10個(gè),在基因組上位于第5和第6個(gè)組成型外顯子之間,在染色體DNA中專25kb。含有V區(qū)外顯子的CD44轉(zhuǎn)錄子統(tǒng)稱為CD44拼接變異體(CD44V)。V區(qū)外顯子的拼接方式非常特殊,它們既能以連續(xù)方式拼接,也能以跳躍方式拼接,參與拼接的V區(qū)外顯子多少不一,從而使轉(zhuǎn)錄片段長(zhǎng)短不一。目前通過PCR技術(shù)在許多細(xì)胞系中已發(fā)現(xiàn)10多種CD44V。早期發(fā)現(xiàn)血細(xì)胞的CD44分子(CD44H)為標(biāo)準(zhǔn)型。最先獲得克隆的拼接變異體是含有CD44V8-10的CD44V,它主要存在于上皮細(xì)胞又稱為上皮細(xì)胞型CD44V(CD44E)。目前對(duì)CD44的研究較多,如V3、V5、V6。

1.2 CD44分子的結(jié)構(gòu)特征

從已知的cDNA序列推測(cè),CD44S由341個(gè)Aa組成,N-末端起臺(tái)于21位Aa,前面20個(gè)Aa為信號(hào)肽,緊接著是胞質(zhì)外區(qū)域的248個(gè)Aa,第249個(gè)Aa至269位的21個(gè)是疏水性的,為跨膜區(qū),其后是胞質(zhì)內(nèi)C-末端尾部有72個(gè)Aa。另外還有一種CD44S的短尾形式,其胞質(zhì)內(nèi)C-末端尾部?jī)H3個(gè)Aa。這種Aa序列具有Ⅰ類膜蛋白的特征。Lokeshwar等[3]用實(shí)驗(yàn)觀察CD44S分子的合成過程,發(fā)現(xiàn)CD44分子首先被合成43KD的蛋白前體,接著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)進(jìn)行N-糖基化,形成58KD的N-糖基化前體,其后在高爾基復(fù)合體內(nèi)進(jìn)行O-糖基化和其它翻譯后修飾,形成最終的85-95KD分子。

1.2.1 CD44S胞質(zhì)外結(jié)構(gòu)域特征:CD44S分子信號(hào)肽的N-末端的130Aa內(nèi)編碼了5個(gè)Asn-x-Ser/Thr序列和6個(gè)半胱氨酸殘基,前者是5個(gè)N-糖苷鍵連接位點(diǎn),其中3個(gè)被利用。6個(gè)半胱酸形成3個(gè)二硫鍵,形成球形結(jié)構(gòu)域,這一球形結(jié)構(gòu)域的重要特征是與動(dòng)物連接蛋白有較高的同源性。有兩個(gè)區(qū)域與透明質(zhì)酸結(jié)合,分別是21-45Aa,135-195Aa。

CD44S的胞外近膜區(qū)存在一個(gè)56Aa的結(jié)構(gòu)域(161Arg-216Asp),含有19個(gè)ser和Thr殘基,常以2~4個(gè)成簇,這些是已知的O-糖基化位點(diǎn)特征,表明CD44有7個(gè)潛在的O-糖基化位點(diǎn),其中4~5個(gè)位點(diǎn)被利用。此外這一區(qū)域含有4個(gè)Ser-Gly二肽,是潛在的硫酸軟骨素連接位點(diǎn)。并且已得到證實(shí),CD44分子加上硫酸軟骨素后,與其結(jié)合細(xì)胞外基質(zhì)的能力有關(guān),包括Ⅰ型膠原、層粘邊蛋白、纖粘連蛋白。

CD44分子細(xì)胞膜外區(qū)域有多個(gè)潛在的N-糖苷鍵連接位點(diǎn),可連換多個(gè)碳水化合物,不僅與分子成熟過程中的翻譯后修飾有關(guān),也與細(xì)胞的功能狀態(tài)有關(guān)。糖基化賦予CD44分子異質(zhì)性,而其異質(zhì)性與不同的O-糖基化程度有關(guān),這種現(xiàn)象是CD44分子所特有的。這種新的糖基化調(diào)節(jié)方式在CD44S結(jié)合不同的細(xì)胞外基質(zhì)成分的能力方面超著重要作用。深入研究這一分子的糖基化調(diào)節(jié)機(jī)制及生物功能方面的聯(lián)系是十分有意義的。

1.2.2 CD44S胞質(zhì)內(nèi)結(jié)構(gòu)特征:CD44S分子第249-269跨膜區(qū)的Aa序列中存在一個(gè)半胱氨酸殘基,代表著一個(gè)潛在的脂?;稽c(diǎn),這一位點(diǎn)可與軟脂酸連接導(dǎo)致CD44分子脂?;?。在CD44S的胞質(zhì)內(nèi)區(qū)域尾部存在一結(jié)構(gòu)域可與錨蛋白(ankyntn)結(jié)合。胞質(zhì)內(nèi)尾部序列有5個(gè)保守的絲氨酸殘基,可作為蛋白激酶C(PKC)的底物被磷化[4]。上述脂?;^程均可增強(qiáng)CD44S分子與錨蛋白的結(jié)合能力。比較CD44S和其他G蛋白的序列發(fā)現(xiàn)存在4個(gè) 同源性高的區(qū)域,實(shí)驗(yàn)證實(shí)CD44還是一種GTP結(jié)合蛋白,可結(jié)合GDP底物并且有GTP酶活性,顯著增強(qiáng)CD44與錨蛋白的相互作用[5]。在CD44合成過程的各種中間產(chǎn)物,發(fā)現(xiàn)均有錨蛋白結(jié)合位點(diǎn)和結(jié)合活性,提示糖基化對(duì)錨蛋白結(jié)合位點(diǎn)的形成無關(guān),并且結(jié)合錨蛋白對(duì)于CD44分子的輸送和信號(hào)傳導(dǎo)功能起重要作用。

1.2.3 CD44V的特征:目前發(fā)現(xiàn)10個(gè)V外顯子編碼的氨基酸中有約30%的絲、蘇氯酸殘基,具有廣泛潛在O-糖基化位點(diǎn),如:V6具有潛在的O-糖基化位點(diǎn)。V3外顯子序列分析中發(fā)現(xiàn)Ser-Gly-Ser-Gly片段,它可結(jié)合硫酸肝素,結(jié)合硫酸肝素后的CD44V能與堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(b-FGF)結(jié)合肝素的表皮生長(zhǎng)(HBEGF)因子結(jié)合,此結(jié)果提示這種CD44參與了傳遞細(xì)胞因子的過程。

1.3 CD44蛋白的主要功能

CD44基因編碼合成的CD44蛋白具有一系列功能,包括:①作為導(dǎo)向性受體,調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞在血液和淋巴液間的運(yùn)行,即淋巴細(xì)胞歸巢或再循環(huán)[6]。②在淋巴細(xì)胞自溶、離體淋巴細(xì)胞的活化中發(fā)揮作用。③促進(jìn)成纖維細(xì)胞和淋巴細(xì)胞與胞外基質(zhì)成分如透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素、纖維素、糖原等的粘附。④參與信號(hào)傳遞蛋白可影響蛋白在細(xì)胞間的位置,刺激其分泌特異的生長(zhǎng)因子具不同的傳導(dǎo)作用。⑤結(jié)合并中和透明質(zhì)酸,該作用類似于清除間質(zhì)組織。⑥調(diào)節(jié)藥物的吸收及細(xì)胞對(duì)藥物的敏感性。

究竟是何種CD44蛋白參與了何種調(diào)節(jié),至今不清楚,選擇性剪切過程中的多樣性CD44蛋白與細(xì)胞結(jié)合的多樣性也表明其中有重要的協(xié)間或調(diào)節(jié)功能[7]。有研究認(rèn)為,跨膜的CD44糖蛋白,其膜外成分的變異與細(xì)胞粘附及導(dǎo)向作用有關(guān)[8]。,而胞內(nèi)分子的尾部則與活化T淋巴細(xì)胞的潛在作用有關(guān),而且胞內(nèi)分子長(zhǎng)度可調(diào)節(jié)蛋白激酶A/C位置,影響細(xì)胞的信號(hào)傳遞[9]。

2 CD44分子在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)

1989年Stamenkevie等使用不同的單抗分離和克隆了一個(gè)編碼CD44標(biāo)準(zhǔn)型的cDNA,該基因不僅由淋巴樣細(xì)胞表達(dá),也可由不同的癌細(xì)胞系包括實(shí)體瘤典型標(biāo)本中表達(dá)。在裸鼠研究某些人的轉(zhuǎn)移癌時(shí)發(fā)現(xiàn),CD44基因表達(dá)在轉(zhuǎn)移中起作用。在大鼠胰腺癌細(xì)胞中非轉(zhuǎn)移性細(xì)胞株只表達(dá)標(biāo)準(zhǔn)CD44(CD44S),而轉(zhuǎn)移性細(xì)胞株表達(dá)CD44V,而且將CD44V變異體cDNA轉(zhuǎn)染到非轉(zhuǎn)移性的細(xì)胞株可引起轉(zhuǎn)移[10]。Hofmann[11]用 notherm印跡法研究了20多個(gè)體外培養(yǎng)的人癌細(xì)胞系,也發(fā)現(xiàn)許多腫瘤組織能表達(dá)CD44V,但在不同細(xì)胞中V區(qū)外顯子的轉(zhuǎn)錄拼接模式不盡相同。第一份臨床腫瘤標(biāo)本(結(jié)腸癌)的檢測(cè)結(jié)果是1992年由英國(guó)年津大學(xué)病理實(shí)驗(yàn)室的研究人員首先報(bào)道的,以后人們應(yīng)用免疫組化及RNA-cDNA-PCR印跡雜交在肺癌、結(jié)腸癌、食道癌、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、宮頸癌、腎癌和非何杰金淋巴瘤等中發(fā)現(xiàn)有CD44V表達(dá)。認(rèn)為CD44V5、CD44V6的表達(dá)與腫瘤進(jìn)展程度、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)[12]。對(duì)于各種癌的實(shí)驗(yàn)研究已經(jīng)進(jìn)入腫瘤的發(fā)生、生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移增殖潛能及預(yù)后復(fù)發(fā)各環(huán)節(jié)與CD44分子表達(dá)的相關(guān)性,并提出實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和假說加以論證。

2.1 CD44分子與腫瘤的發(fā)生、生長(zhǎng)、發(fā)展

癌的發(fā)生發(fā)展與癌基因(c-erb2、c-myc, ras)和抑癌基因(P53,nm23)等異常表達(dá)有關(guān)。有研究表明CD44異常表達(dá)可早于ras、P53等基因的異常,所以CD44的變異可能與ras部基因激活有關(guān),是癌形成的一個(gè)因素[13]。Muider[14]對(duì)結(jié)腸癌腫瘤P53突變和CD44蛋白的研究,在結(jié)腸腫瘤各期中觀察到有統(tǒng)計(jì)顯著性的P53、CD44V6表達(dá)增強(qiáng)的趨勢(shì),P53和CD44V6表達(dá)間有顯著相關(guān)性。P53被認(rèn)為監(jiān)視基因突變的“分子警察”,失活的P53可引起失控的腫瘤生長(zhǎng),因此P53突變引起失去最后控制時(shí),V6‘表型獲得明顯的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)’。郭亞軍等[15]用抗CD44的單抗以阻斷其與透明質(zhì)酸的結(jié)合,從而抑制CD44陽性的腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)的生長(zhǎng)。他推測(cè)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)可能是CD44陽性的細(xì)胞能與細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)中的透明質(zhì)酸結(jié)合,從而獲得附著性,并更易從ECM中獲得生長(zhǎng)因子。FasanoM等[16]報(bào)道成人非腫瘤患者肺泡Ⅰ型上皮不表達(dá)CD44V6。Ⅱ型上皮細(xì)胞和基 底細(xì)胞有CD44V6低量表達(dá),Ⅱ型細(xì)胞與基底細(xì)胞屬于干細(xì)胞,估計(jì)CD44V6對(duì)于肺生長(zhǎng)有重要意義。所以認(rèn)為CD44V6對(duì)于幼稚細(xì)胞生長(zhǎng)和對(duì)于腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的機(jī)理可能相似。Lu等[17]發(fā)現(xiàn)在宮頸腺癌,無論是原位癌還是浸潤(rùn)癌均有CD44S彌漫表達(dá),且浸潤(rùn)癌比原位癌明顯高表達(dá)CD44S,幾乎所有的原位癌與浸潤(rùn)癌CD44V9均增加,僅有較少的浸潤(rùn)癌表達(dá)CD44V4與CD44V6,而原位癌幾乎不表達(dá)。說明宮頸上皮的癌變與CD44S和幾種CD44V表達(dá)的量變和質(zhì)變有關(guān)。

2.2 分子表達(dá)與腫瘤的轉(zhuǎn)移、侵潤(rùn)

Matsumura等[18]用PCR技術(shù)檢測(cè)了轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌、非轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌、正常結(jié)腸粘膜的CD44基因表達(dá)活性,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌細(xì)胞CD44變異拼接外顯子表達(dá)明顯增強(qiáng)。Pales等[19]用單克隆抗體檢測(cè)以CD44表達(dá)情況發(fā)現(xiàn),在人類結(jié)腸癌標(biāo)本中,CD44V在浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的腫瘤中呈陽性表達(dá),并認(rèn)為CD44V的表達(dá)可作為結(jié)腸腫瘤浸潤(rùn)的標(biāo)志。Herrtich[20]研究發(fā)現(xiàn)在一些分化不良的息肉中檢測(cè)以V6外顯子在腫瘤浸潤(rùn)中有增強(qiáng)的高頻率表達(dá),推測(cè)表達(dá)CD44V6的腫瘤細(xì)胞能夠有利于癌細(xì)胞浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的條件。

Granberg等[21]發(fā)現(xiàn)在支氣管類癌瘤患者,表達(dá)CD44S可減低遠(yuǎn)距離轉(zhuǎn)移,CD44V77-8陽性腫瘤降低遠(yuǎn)距離轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn),CD44V9陽性可降低遠(yuǎn)距離轉(zhuǎn)移及死亡,而CD44V4、CD44V5、CD44V10與臨床結(jié)果無關(guān),證明支氣管類癌瘤具有潛在惡性,CD44S、V7-8、V9陽性可能引起較好的臨床結(jié)果,可以考慮作為預(yù)后評(píng)估的指標(biāo)。

關(guān)于CD44V與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)性的假說如下:激活的淋巴細(xì)胞和轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞具有許多共性,即都有很強(qiáng)的侵出行為,均有可逆的粘附接觸過程進(jìn)行細(xì)胞遷移,在引流淋巴結(jié)中兩類細(xì)胞皆能大量積聚和快速增殖,最后它們都能釋放到循環(huán)系統(tǒng),并通過外滲作用進(jìn)入周圍組織,這些相似性很可能基于CD44V6在二者中的共同作用,提示CD44V6在淋巴細(xì)胞活化中的作用機(jī)理與CD44V6在腫瘤轉(zhuǎn)移中作用機(jī)理是相同的。即CD44V6高表達(dá)的癌細(xì)胞可能獲得淋巴細(xì)胞“偽裝”,逃避人體免疫系統(tǒng)的識(shí)別和殺傷,更易進(jìn)入淋巴結(jié),形成轉(zhuǎn)移[10]。

有結(jié)論認(rèn)為CD44V6變異體可能通過促進(jìn)癌細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)的粘附,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向基質(zhì)侵襲,從而影響腫瘤細(xì)胞的遷移和運(yùn)動(dòng)能力。也有結(jié)論認(rèn)為CD44V6可能通過影響癌細(xì)胞的骨架構(gòu)像和分布,從而影響癌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力,而影響癌轉(zhuǎn)移。

3 CD44分子對(duì)治療腫瘤的展望

因?yàn)镃D44V6對(duì)于腫瘤的發(fā)生、發(fā)展都有一定的相關(guān)性,推測(cè)CD44V6與腫瘤的分型、分化、分期有一定關(guān)系,如果這種關(guān)系得以明確,我們就可以通過癌組織CD44V6的表達(dá)程度來判斷癌的類型,所處時(shí)期來進(jìn)行適當(dāng)治療。

有研究認(rèn)為CD44V6的表達(dá)要先于抑癌基因的表達(dá),如果能夠檢測(cè)出CD44異常表達(dá),則對(duì)于癌的早期診斷有密切關(guān)系。已有研究表明,CD44V6可用于診斷。如1997年吳忠等報(bào)道,應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)CD44V6在30例尿液標(biāo)本脫落細(xì)胞檢測(cè)到CD44V6的表達(dá),而在膀胱炎患者和正常志愿者未檢測(cè)到CD44V6的表達(dá)。

腫瘤的轉(zhuǎn)移是癌癥患者的主要死亡原因,Seiter等[10]用抗CD44變異型蛋白的抗體與CD44變異型產(chǎn)物相結(jié)合,顯示鼠癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能被終止,這也為大腸癌的治療提供了又一個(gè)可能途徑。

手術(shù)切除的腫瘤標(biāo)本中如有CD44V6蛋白陽性,常會(huì)伴術(shù)后腫瘤再發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。CD44V6可作為一種有效的癌預(yù)后的標(biāo)志物,用以指導(dǎo)治療方案的制定。

CD44基因及其選擇性剪切在癌的預(yù)測(cè)、早期診斷、病情進(jìn)展、轉(zhuǎn)移潛能與預(yù)后的估計(jì)等方面具有很大的潛在價(jià)值。隨著分子生物學(xué)不斷的發(fā)展,癌基因研究的不斷深入,相信該基因?qū)Π┑念A(yù)測(cè)、診斷、治療、預(yù)后的價(jià)值會(huì)得到更加全面的認(rèn)識(shí)。

參考文獻(xiàn)

Haynes BF et al .Cancer Cells ,1991;3(9):347-350

Korfuruta et al .Clin Cancer Res ,1998;4:21-29

Lokeshwar VB et al .J Biol Chem,1991;266(27):17983

Kalomiris EJ Biol Chem,1989;264(14):8113-8119

Lokeshwar VB et al .J Biol Chem ,1992;267(31):22073

Protin U et al .J Immunol,1999;163(9):4917-4923

Tarin D et al .J Path ,1993;177(2):249-250

Screaton GR et al .Proc Natl Acad Sci USA,1992;89(24):12610-12164

Camp RL et al .Cell Biol,1991;115(5):1283-1299

Seiter S et al .J Exp Med,1993;177(2):442-455

Hofmann M et al .Cancer Res,1991;51(9):5290-5299

Keigo Y et al .Int J Cancer,1998;4:21-29

田文等,中華醫(yī)學(xué)雜志,1997;77(8):631-632

Finke LH et al.Lancet ,1997;345(8949):583

Ruosahti E et al .Cell ,1991;65(5):867

Fasano M et al .Cancer,1997;80(1):34-41

Lu D et l .Gynecol Oncol,1999;75(1):84-90

Matsumura Y et al .Lancet ,1992;340(8827):1053

Wielenga VJ et al .Cancer Res ,1993;53(20):4754

第4篇:分子生物學(xué)進(jìn)展范文

一、善待錯(cuò)誤資源,樹立學(xué)習(xí)信心

作為老師,當(dāng)學(xué)生出現(xiàn)錯(cuò)誤時(shí),應(yīng)該換位思考,多站在學(xué)生的角度去想想他們此時(shí)的心理狀況和情緒??梢猿38嬖V學(xué)生:失敗乃成功之母,不要害怕錯(cuò)誤,學(xué)習(xí)就是在不斷出現(xiàn)錯(cuò)誤、不斷糾正錯(cuò)誤中前進(jìn)的。課堂上,在學(xué)生出錯(cuò)時(shí),老師要做的不是責(zé)備或任由同學(xué)取笑,而是理解和鼓勵(lì),為學(xué)生營(yíng)造一個(gè)有安全感的學(xué)習(xí)氛圍,使他們敢于行動(dòng),繼續(xù)不斷地探索和思考。特別是老師應(yīng)給這樣的學(xué)生再一次表現(xiàn)的機(jī)會(huì),并當(dāng)取得一點(diǎn)點(diǎn)進(jìn)步時(shí),及時(shí)給予肯定和鼓勵(lì)。

一些優(yōu)秀的老師就在教學(xué)中用開“綠燈”的方式對(duì)待學(xué)生的錯(cuò)誤,在課堂上提倡幾個(gè)允許:錯(cuò)了允許重答;答得不完整允許再想;不同的意見允許爭(zhēng)論。他們?cè)诿裰鳉夥罩袑W(xué)習(xí),思維活躍,敢說、敢做、敢問,勇于創(chuàng)新,而且?guī)熒年P(guān)系也非常融洽。這盞“綠燈”使他們的自尊心得到了切實(shí)的保護(hù),信心也得到了充分的激發(fā)。

二、妙用錯(cuò)誤實(shí)例,培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)意識(shí)

學(xué)生獲得知識(shí)本來就應(yīng)該是在不斷的探索中進(jìn)行的。在這過程中,學(xué)生的思維方法各不相同的,出現(xiàn)偏差和錯(cuò)誤是正常的。

曾聽過一位老師教學(xué)《林海》一課,有位學(xué)生把“大不一樣”讀成了“不大一樣”。表面上看這只是兩個(gè)字的字序顛倒,其實(shí)意思的出入?yún)s很大,所以老師沒有簡(jiǎn)單地糾正一下了事,而是以此為契機(jī)及時(shí)調(diào)控,趁勢(shì)進(jìn)行追問:“他哪兒讀錯(cuò)了?”“這兩個(gè)詞有什么不同?”學(xué)生很快回答:“‘大不一樣’說明差別很大;而‘不大一樣’說明差別不大?!崩蠋熯M(jìn)一步引導(dǎo):“仔細(xì)讀一讀課文,體會(huì)一下秦嶺與大興安嶺的差別究竟大不大?”學(xué)生再讀課文后,有學(xué)生明白了:“差別其實(shí)很大,秦嶺是‘云橫秦嶺’,而大興安嶺是‘那么溫柔’。”老師根據(jù)學(xué)生的回答,隨即板書作圖小結(jié):“一個(gè)險(xiǎn)峻,一個(gè)溫柔,看來二者確實(shí)是――大不一樣。”

由此可見,錯(cuò)誤是有價(jià)值的一種資源。課堂上“意外”情況發(fā)生時(shí),老師妙用錯(cuò)誤的實(shí)例,及時(shí)調(diào)整教學(xué)環(huán)節(jié),往往就能產(chǎn)生耳目一新的課堂效果。

三、智用將錯(cuò)就錯(cuò),發(fā)展思辨能力

課堂教學(xué)中,當(dāng)學(xué)生出現(xiàn)與預(yù)期答案不符的回答時(shí),如果老師能利用學(xué)生的錯(cuò)誤資源“將錯(cuò)就錯(cuò)”,就能使學(xué)生體驗(yàn)知識(shí)的內(nèi)在聯(lián)系與區(qū)別,還能激發(fā)他們進(jìn)入思辨的新境界。

有位老師上《黃山奇石》一課時(shí),讓學(xué)生匯報(bào)課文中有哪幾塊黃山奇石。當(dāng)匯報(bào)到“金雞叫天都”時(shí),由于一時(shí)慌張,竟說成了“公雞叫天都”。老師不慌不忙地寫出“公雞叫天都”,“不對(duì),不對(duì)!應(yīng)該是‘金雞叫天都’”口快的同學(xué)大叫起來。老師隨即用黃粉筆寫上“金”?!巴瑯拥钠媸?,我們用了兩個(gè)不同的名字來命名,哪個(gè)名字更適合這奇石呢?”同學(xué)們不約而同地回答“金雞叫天都?!薄盀槭裁从谩痣u’而不用‘公雞’,你們從哪里看出來的呢?”于是,同學(xué)們又開始仔細(xì)閱讀,并從“金光閃閃”、“雄雞”、“每當(dāng)太陽升起”等處找到了理由。

由此可見,通過巧妙的點(diǎn)化,這些“錯(cuò)誤”成為了教學(xué)的最佳切入點(diǎn),學(xué)生在爭(zhēng)中分析、爭(zhēng)中內(nèi)化知識(shí),他們的思辯能力得到了發(fā)展,從而為課堂的動(dòng)態(tài)生成創(chuàng)造出意想不到的“美麗”。

四、利用列錯(cuò)糾錯(cuò),提高反思能力

建構(gòu)主義學(xué)習(xí)觀認(rèn)為,學(xué)生的錯(cuò)誤必須是一個(gè)“自我否定”的過程,而“自我否定”又以自我反省作為必要的前提。利用學(xué)生的錯(cuò)誤這一資源,就能引發(fā)這種“觀念沖突”,促使他們有批判性的再思考。

一位老師教學(xué)《小露珠》時(shí),發(fā)現(xiàn)許多學(xué)生把“草稈”寫成“草桿”。顯然,是由于學(xué)生對(duì)“稈”“桿”兩字的讀音和意義模糊不清,造成混淆了。利用這個(gè)錯(cuò)誤資源,老師引導(dǎo)比較“稈”“竿”“桿”三個(gè)字。學(xué)生觀察、比較、分析,還動(dòng)手查字典,終于弄清三個(gè)字的區(qū)別,明白“竿”是用竹子做的,所以是竹字頭;“稈”是指高粱、玉米等草本類植物的莖,所以是禾字旁;而“桿”是指用木頭或水泥等制成的,所以是木字旁。

在這里,“錯(cuò)誤”已成為點(diǎn)燃學(xué)生智慧火花的火種。通過找錯(cuò)、議錯(cuò)、改錯(cuò)的反思過程,既加深了學(xué)生對(duì)知識(shí)的理解和掌握,又提高了他們的分析反思能力,可謂一舉兩得。

第5篇:分子生物學(xué)進(jìn)展范文

關(guān)鍵詞:分子生物學(xué);課程設(shè)計(jì);教學(xué)評(píng)價(jià);探索

分子生物學(xué)是在分子水平上研究生命現(xiàn)象與生命本質(zhì)的科學(xué)。作為生命科學(xué)的共同語言,主要闡明生物大分子的結(jié)構(gòu)、代謝途徑、調(diào)控機(jī)制以及人體各種生理和病理狀態(tài)的分子機(jī)制,是推動(dòng)新的診斷、治療和預(yù)防方法。對(duì)于中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)學(xué)生而言,學(xué)習(xí)醫(yī)學(xué)分子生物學(xué),不僅是為未來的專業(yè)課的學(xué)習(xí)打下基礎(chǔ),也為將來的工作和繼續(xù)深造學(xué)習(xí)提供知識(shí)儲(chǔ)備。學(xué)生在學(xué)習(xí)時(shí)靠死記硬背,缺乏對(duì)知識(shí)的思考,不能將分子生物學(xué)的知識(shí)和臨床學(xué)科的內(nèi)容進(jìn)行橫向聯(lián)系,導(dǎo)致基礎(chǔ)理論知識(shí)和臨床實(shí)際應(yīng)用嚴(yán)重脫節(jié)。這無疑更不利于優(yōu)秀的中西醫(yī)結(jié)合人才的培養(yǎng)。因此,針對(duì)目前社會(huì)對(duì)高素質(zhì)中西醫(yī)結(jié)合人才的要求,必然需要我們針對(duì)中西醫(yī)結(jié)合專業(yè)的特點(diǎn),優(yōu)化分子生物學(xué)的教學(xué)內(nèi)容,探索有效的教學(xué)方法,以激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,強(qiáng)化學(xué)生對(duì)知識(shí)的記憶,培養(yǎng)學(xué)生將理論知識(shí)應(yīng)用到其他課程學(xué)習(xí)及今后臨床工作中的能力,真正發(fā)揮分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的重要作用。

一分子生物學(xué)課程教學(xué)的總體設(shè)計(jì)

分子生物學(xué)作為醫(yī)學(xué)臨床和科學(xué)研究的基本工具,發(fā)展速度快、應(yīng)用廣泛。根據(jù)中西醫(yī)結(jié)合人才培養(yǎng)的目標(biāo)與要求,以“理論適度,突出應(yīng)用”為原則,優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容,對(duì)教材內(nèi)容進(jìn)行更新、精簡(jiǎn)和重組。同時(shí)對(duì)教學(xué)學(xué)時(shí)加以調(diào)整,做到重點(diǎn)主要講,拓展自學(xué)為主,并且改變教學(xué)模式,采用多種教學(xué)方法。

(一)教學(xué)內(nèi)容整合和優(yōu)化

分子生物學(xué)內(nèi)容改革主要是以基礎(chǔ)知識(shí)為主體,積極反映本學(xué)科發(fā)展的新動(dòng)向、新進(jìn)展,力求做到“少而精”,由淺入深,循序漸進(jìn),既注意層次分明,又注意知識(shí)的連貫性及實(shí)用性。擬對(duì)教學(xué)內(nèi)容包括以下幾點(diǎn)更新和優(yōu)化。目前我校采用的《分子生物學(xué)》教材是第八版《生物化學(xué)與分子生物學(xué)》,之前采用過新世界中醫(yī)藥院校創(chuàng)新教材《分子生物學(xué)》第一版。中西醫(yī)結(jié)合專業(yè)分子生物學(xué)大綱要求授課內(nèi)容包括緒論、基因與基因組、DNA的生物合成、RNA的生物合成、蛋白質(zhì)的生物合成、基因表達(dá)與調(diào)控、基因工程與癌基因。在培養(yǎng)設(shè)計(jì)中,《分子生物學(xué)》一般在《生物化學(xué)》之后學(xué)習(xí)。為了增強(qiáng)知識(shí)的連貫性和整體性將原來基因與基因組這章的內(nèi)容與基因表達(dá)調(diào)控內(nèi)容進(jìn)行整合,重點(diǎn)介紹基因的結(jié)構(gòu),病毒、原核和真核生物基因組的特點(diǎn)。原癌基因和癌基因這章的內(nèi)容,適度減少,原因是為了適應(yīng)當(dāng)前知識(shí)的更新,在此處只做基本概念的介紹,同時(shí),提醒學(xué)生要緊跟科學(xué)發(fā)展,追蹤相關(guān)知識(shí)的更新。其他章節(jié)適度增加科學(xué)研究的新進(jìn)展,而教學(xué)內(nèi)容基本不變。除此之外,需要對(duì)一些章節(jié)的知識(shí)進(jìn)行更新。例如基因表達(dá)牽涉到遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)的內(nèi)容,尤其是表觀遺傳學(xué)是近幾年生命科學(xué)研究的熱點(diǎn),其對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控涉及生殖發(fā)育、環(huán)境適應(yīng)和疾病的產(chǎn)生。而目前《分子生物學(xué)》的“基因表達(dá)調(diào)控”一章只介紹了“原核生物的表達(dá)調(diào)控”和“真核生物表達(dá)的調(diào)控”兩節(jié)內(nèi)容,沒有表觀遺傳學(xué)的內(nèi)容,應(yīng)予以適當(dāng)添加,考慮到學(xué)時(shí)的限制,我們擬在表觀遺傳學(xué)的基本概念、調(diào)控方式和研究策略上做簡(jiǎn)單的概括性的介紹。另外,在目前的分子生物學(xué)研究中,常常牽涉到基因組學(xué)的研究,其內(nèi)容涉及海量的生物學(xué)信息的推導(dǎo)和計(jì)算。例如引物設(shè)計(jì)、測(cè)序比對(duì)、同源分析、表觀遺傳位點(diǎn)分析和組學(xué)研究分析等等。這就牽涉到一個(gè)重要的工具學(xué)科—生物信息學(xué)的學(xué)習(xí)。但是目前許多中醫(yī)類院校忽視對(duì)此內(nèi)容的學(xué)習(xí)。考慮到此學(xué)科的難度,我們擬簡(jiǎn)單介紹生物信息學(xué)的基本內(nèi)容和常用的生物軟件的用途及使用方法,為他們?cè)谝院蟮墓ぷ骱脱芯恐写蛳禄A(chǔ)。再而,細(xì)胞通訊和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是目前中醫(yī)藥科學(xué)研究重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)的內(nèi)容,但目前本章的學(xué)習(xí)內(nèi)容主要在強(qiáng)調(diào)基礎(chǔ)知識(shí),忽視了與科研和臨床實(shí)際問題相結(jié)合。因此在本章中,我們擬整合和提煉基礎(chǔ)知識(shí),重點(diǎn)講授與常見生理病理(例如糖尿病、細(xì)胞凋亡等)密切相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。

(二)課時(shí)的合理分配

分子生物學(xué)是從分子水平探索生命現(xiàn)象、生命活動(dòng)的規(guī)律和本質(zhì)的一門學(xué)科。因此,學(xué)習(xí)的內(nèi)容牽涉到蛋白質(zhì)、核酸等分子。本科階段的教學(xué)目標(biāo)是通過本課程的學(xué)習(xí),使學(xué)生掌握分子生物學(xué)的基本理論、基本技能和最新進(jìn)展,并特別注重與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的結(jié)合,從而為學(xué)生進(jìn)一步學(xué)習(xí)其他專業(yè)課程和開展醫(yī)學(xué)研究工作奠定醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)基礎(chǔ)。因而,在課時(shí)分配上注重對(duì)基本理論和基本技能的側(cè)重。安徽中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合專業(yè)分子生物學(xué)的總學(xué)時(shí)是36學(xué)時(shí),其中理論27學(xué)時(shí),實(shí)驗(yàn)時(shí)。理論學(xué)時(shí)中,緒論1學(xué)時(shí),基因與基因組2學(xué)時(shí),DNA的生物合成•4學(xué)時(shí),RNA的生物合成4學(xué)時(shí),蛋白質(zhì)的生物合成4學(xué)時(shí),基因表達(dá)與調(diào)控4學(xué)時(shí),基因工程6學(xué)時(shí)和癌基因2學(xué)時(shí)將原來的DNA生物合成的4學(xué)時(shí)變?yōu)?學(xué)時(shí),原癌基因與抑癌基因由2學(xué)時(shí)變?yōu)?學(xué)時(shí)。原來的基因表達(dá)調(diào)控由4學(xué)時(shí)變?yōu)?學(xué)時(shí)(將基因與基因組的內(nèi)容整合到基因表達(dá)調(diào)控章節(jié)之前)。實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)的分配沒有變化,PCR技術(shù)應(yīng)用3學(xué)時(shí),核酸的制備和測(cè)定6學(xué)時(shí)。

二教學(xué)方法的革新

在教學(xué)過程中我們要根據(jù)教學(xué)內(nèi)容采用一定的教學(xué)方法,這主要是由于不同的教學(xué)方法都有其適用性,而教學(xué)方法本身不存在絕對(duì)的優(yōu)劣?!斗肿由飳W(xué)》各章內(nèi)容都有其關(guān)鍵知識(shí)點(diǎn),而每一知識(shí)點(diǎn)都有其特點(diǎn),任何單一的教學(xué)方法對(duì)每一關(guān)鍵知識(shí)點(diǎn)而言并不總是最適合的。學(xué)生有了實(shí)際的參考的物質(zhì)加以想象后就很容易理解這些抽象的知識(shí)要點(diǎn),再進(jìn)行理解記憶就變得相對(duì)簡(jiǎn)單了。且有了這樣的類比經(jīng)驗(yàn)可以啟發(fā)學(xué)生產(chǎn)生更多的想象,讓這個(gè)分子生物學(xué)的某些知識(shí)變得簡(jiǎn)單易懂。歸納和總結(jié)一直是醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課學(xué)習(xí)的重要方法。分子生物學(xué)的許多概念、分子結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和反應(yīng)過程比較相近,學(xué)生易于混淆。例如,重疊基因與重復(fù)序列、啟動(dòng)子與增強(qiáng)子等。諸如這類概念或化學(xué)過程相近的知識(shí)點(diǎn),關(guān)鍵是使學(xué)生掌握兩者的相同和不同點(diǎn),因此對(duì)比歸納式教學(xué)方法就有其優(yōu)越性。教師通過對(duì)有聯(lián)系的知識(shí)點(diǎn)的對(duì)照歸納分析,有助于突出重點(diǎn)、易化難點(diǎn),有助于將知識(shí)條理化、系統(tǒng)化,使學(xué)生把握住知識(shí)點(diǎn)內(nèi)在的聯(lián)系和區(qū)別,達(dá)到認(rèn)識(shí)其本質(zhì)的目的?;谏鲜鲈?,對(duì)優(yōu)化后的各章關(guān)鍵知識(shí)點(diǎn),采用不同教學(xué)方法如類比聯(lián)想、歸納比較、引導(dǎo)啟發(fā)和理論聯(lián)系實(shí)際等方法進(jìn)行講授,比較各教學(xué)方法在此知識(shí)點(diǎn)的適用性和優(yōu)劣性,最終優(yōu)化出一套適合中西醫(yī)結(jié)合臨床專業(yè)多元教學(xué)方法體系。

三緊密聯(lián)系臨床實(shí)際應(yīng)用

分子生物學(xué)學(xué)習(xí)的目的是為臨床服務(wù)的,因此在教學(xué)上需要多聯(lián)系實(shí)際的醫(yī)學(xué)問題,即理論聯(lián)系實(shí)際的教學(xué)方法。例如,在講授DNA是遺傳信息載體的時(shí)候,可以將DNA指紋聯(lián)系到實(shí)際醫(yī)學(xué)的基因診斷和基因治療;在基因表達(dá)調(diào)控中,將遺傳學(xué)(單基因與多基因遺傳?。┖捅碛^遺傳學(xué)調(diào)控,如DNA甲基化(組蛋白修飾)的表觀遺傳調(diào)控與心血管等疾病聯(lián)系在一起;在癌基因與抑癌基因內(nèi)容時(shí),可以將臨床實(shí)際遇到的癌癥的遺傳特點(diǎn)和檢測(cè)方式中加以引入。通過這種和實(shí)際的醫(yī)學(xué)診斷和治療相結(jié)合的方法使學(xué)生認(rèn)識(shí)到學(xué)習(xí)內(nèi)容可以直接解決實(shí)際的健康問題,將極大地調(diào)動(dòng)學(xué)習(xí)熱情和興趣,提高學(xué)習(xí)效果。四建立科學(xué)合理的評(píng)價(jià)體系為了提高學(xué)生的質(zhì)量,使其更能適應(yīng)社會(huì)需求,安徽中醫(yī)藥大學(xué)積極進(jìn)行教學(xué)改革,要求轉(zhuǎn)變教育思想,改變以前課堂教學(xué)的形式和對(duì)學(xué)生的評(píng)價(jià)體系。為此,在中西醫(yī)結(jié)合專業(yè)分子生物學(xué)的評(píng)價(jià)體系中,初步建立形成性評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)體系主要包括考勤(10%)、課堂問題(20%)、每章科學(xué)問題討論(20%)和試卷成績(jī)(50%)課堂提問主要是每次課教師準(zhǔn)備三個(gè)問題,讓學(xué)生回答,根據(jù)回答情況,進(jìn)行評(píng)分。每章科學(xué)問題討論采用PBL形式,分組完成,最后給于評(píng)價(jià)。這種方式實(shí)施極大的調(diào)動(dòng)學(xué)生的積極性,根本上改變之前僅依靠期末試卷帶來的學(xué)生惰性式學(xué)習(xí)習(xí)慣,培養(yǎng)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,課堂氣氛活躍,學(xué)生課下投入的時(shí)間大大提高,學(xué)習(xí)的自主性和能動(dòng)性都得到大大增強(qiáng)。和一些形成性評(píng)價(jià)相似,課時(shí)、場(chǎng)地的限制和教師與學(xué)生比例失調(diào)限制了這種評(píng)價(jià)體系的實(shí)施。五結(jié)語分子生物學(xué)是生命科學(xué)的分支,是中西醫(yī)結(jié)合臨床醫(yī)學(xué)生必須熟練的基本知識(shí)和基本技能。在分子生物學(xué)的教學(xué)過程中,要密切聯(lián)系臨床的實(shí)際應(yīng)用,及時(shí)聯(lián)系科學(xué)研究動(dòng)態(tài),才能激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,培養(yǎng)學(xué)習(xí)的積極性和調(diào)動(dòng)學(xué)生自主學(xué)習(xí)的能力,使他們不僅能現(xiàn)在掌握分子生物學(xué)的基本知識(shí),還能在未來工作中繼續(xù)跟蹤醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)的發(fā)展,適應(yīng)社會(huì)對(duì)新型中西醫(yī)結(jié)合專門醫(yī)療人才的要求。

參考文獻(xiàn):

[1] •秦崇濤,張捷平,王一錚等.醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的探索[J].廣西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2012,15(4):102-104.

[2] 馬•克龍,汪遠(yuǎn)金,黃金鈴等.中西醫(yī)結(jié)合專業(yè)分子生物學(xué)教學(xué)改革探索[J].中醫(yī)教育,2013,30(1):50-52.

[3] 程•玉鵬,李慧玲,高寧等.《藥學(xué)分子生物學(xué)》在中醫(yī)院校的課程設(shè)計(jì)與教學(xué)評(píng)價(jià)[J].林區(qū)教學(xué),2011(5):7-8.

[4] •聶晶,韓為東.•醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)教學(xué)個(gè)體化改革探討[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育,2014,16(5):351-353.

第6篇:分子生物學(xué)進(jìn)展范文

關(guān)鍵詞:研究生;醫(yī)學(xué)分子生物學(xué);教學(xué)改革

中圖分類號(hào):G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1674-9324(2013)42-0173-02

分子生物學(xué)是生命科學(xué)中發(fā)展最為迅速的前沿學(xué)科之一,其研究方法和技術(shù)廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)相關(guān)的許多學(xué)科領(lǐng)域。分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的使命,就是應(yīng)用分子生物學(xué)的理論與技術(shù),從分子水平上揭示疾病發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制,進(jìn)而對(duì)危害人類健康的各種疾病提供預(yù)防、診斷以及治療方法[1,2]。對(duì)醫(yī)學(xué)各專業(yè)的研究生而言,學(xué)習(xí)和掌握扎實(shí)的分子生物學(xué)知識(shí),是將來成為合格醫(yī)學(xué)研究者和臨床工作者的內(nèi)在需求和必備條件。研究生《醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)》是本校一門重要的基礎(chǔ)課程,從1994年開設(shè)以來,一直是全?;A(chǔ)與臨床專業(yè)共計(jì)400余人/年的碩士研究生必修課,2010年后改為選修課。然而隨著分子生物學(xué)理論和技術(shù)的日新月異,雖然教學(xué)內(nèi)容在不斷更新,但沿襲舊有的重視知識(shí)傳授而忽視學(xué)生自主學(xué)習(xí)的教學(xué)模式已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不適應(yīng)新的教學(xué)理念需要,對(duì)新的教學(xué)模式的探索已勢(shì)在必行。

一、現(xiàn)階段存在的問題

總結(jié)多年的教學(xué)實(shí)踐,我們發(fā)現(xiàn)在《醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)》理論課教學(xué)中存在著一些問題,主要反映在:(1)課程體系及教學(xué)方法里學(xué)生自主學(xué)習(xí)、交互式團(tuán)隊(duì)學(xué)習(xí)的模塊少,學(xué)生未能養(yǎng)成自主閱讀文獻(xiàn)、集體討論、發(fā)現(xiàn)問題和解決問題的習(xí)慣;(2)學(xué)生知識(shí)基礎(chǔ)參差不齊,專業(yè)背景及研究方向差異較大,課堂講授難度較大且有時(shí)收效不好;(3)部分內(nèi)容理論性強(qiáng),較為枯燥且不屬于學(xué)生的研究方向,學(xué)生學(xué)習(xí)積極性不高;(4)在教學(xué)內(nèi)容上只關(guān)注教材講授而不重視其專業(yè)發(fā)展方面的探究,雖然分子生物學(xué)教材內(nèi)容時(shí)有更新,但相關(guān)領(lǐng)域的最新進(jìn)展并不能及時(shí)涵蓋,這將使教師更新知識(shí)的主動(dòng)性下降,同時(shí)研究生也會(huì)失去學(xué)習(xí)分子生物學(xué)的興趣。(5)期末考試閉卷問答式方式由于考試時(shí)間和考試內(nèi)容的限制,而不利于開拓研究生視野和創(chuàng)新意識(shí)的培養(yǎng);(6)在成績(jī)?cè)u(píng)價(jià)上,未能對(duì)學(xué)習(xí)積極的學(xué)生加以激勵(lì)。

二、教學(xué)改革內(nèi)容及方式

針對(duì)教學(xué)中存在的這些問題,我們對(duì)2012級(jí)研究生《醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)》理論課教學(xué)進(jìn)行了改革嘗試。我校2012級(jí)選修《醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)》課程的研究生共279人,將其分為兩個(gè)班,其中基礎(chǔ)專業(yè)和部分臨床專業(yè)共105人為1班,其余臨床專業(yè)174人為2班。本學(xué)期對(duì)1班學(xué)生進(jìn)行了教學(xué)改革活動(dòng),對(duì)2班學(xué)生仍按往年教學(xué)模式正常上課作為對(duì)比。本次教學(xué)改革活動(dòng)的方式為:將1班的105名學(xué)生分成小組,每組4~5名學(xué)生。以小組為單位,要求學(xué)生課后閱讀中外文文獻(xiàn),內(nèi)容可以是分子生物學(xué)方面的經(jīng)典理論、熱點(diǎn)問題或最新研究進(jìn)展(如:PCR技術(shù)、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與疾病、藥物基因組學(xué))等,小組同學(xué)分析討論后將文獻(xiàn)內(nèi)容制作成多媒體課件,分別在學(xué)期中和學(xué)期末各抽取4~5個(gè)課時(shí)在全班進(jìn)行讀書報(bào)告,每組推薦一名同學(xué)做報(bào)告,報(bào)告時(shí)間15~20分鐘,報(bào)告完畢由學(xué)生提問及老師點(diǎn)評(píng),每小組共計(jì)耗時(shí)30分鐘,期末對(duì)兩個(gè)班的成績(jī)進(jìn)行分析比對(duì)。

三、考試成績(jī)分析

我們對(duì)1班和2班學(xué)生的期末考試成績(jī)進(jìn)行了對(duì)比。從表1可以看出,1班的考試平均成績(jī)比2班高出3.07分,且1班的最高分(88分)和最低分(59分)均分別高于2班的83分和43分。其次,1班不及格人數(shù)為1人,不及格率為0.95%;2班不及格人數(shù)為13人,不及格率為7.47%。兩班比較不及格率具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P箓0.05)。表1結(jié)果說明1班考試成績(jī)明顯超過2班。

四、本次教改活動(dòng)的思考

經(jīng)過本次教改活動(dòng),我們體會(huì)到:研究生教育與本科的基礎(chǔ)教育不同,我們培養(yǎng)的研究生必須具備扎實(shí)的理論基礎(chǔ)和鮮明的創(chuàng)新性。教師雖然是授課環(huán)節(jié)中的主導(dǎo)者,但學(xué)習(xí)是互動(dòng)的過程,這個(gè)過程不僅是教師在講臺(tái)上的授課過程,也應(yīng)是臺(tái)下學(xué)生主動(dòng)學(xué)習(xí)的過程。因此教師在教學(xué)中除進(jìn)行啟發(fā)式的教學(xué)外,還更應(yīng)該注重培養(yǎng)研究生主動(dòng)學(xué)習(xí)的意識(shí),塑造研究生的創(chuàng)新精神。本次在2012級(jí)研究生1班通過進(jìn)行讀書報(bào)告,首先優(yōu)化了教學(xué)氛圍,充分調(diào)動(dòng)了學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性。通過查找文獻(xiàn)、歸納總結(jié)文獻(xiàn)并制作課件等,鍛煉了學(xué)生的科研思維能力和寫作能力;通過口頭報(bào)告鍛煉了他們的表達(dá)能力;通過小組討論鍛煉了他們的團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力。這些能力的訓(xùn)練為他們將來的研究工作和畢業(yè)論文答辯等打下了一定的基礎(chǔ)。其次,拓展了學(xué)生的知識(shí)面,有利于增強(qiáng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。教師在課堂上的講授只有幾十分鐘,時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠,只能是內(nèi)容上的引導(dǎo),而切實(shí)掌握的知識(shí)還有待于學(xué)生課后的學(xué)習(xí)與思考,這就要求研究生必需樹立主人翁的意識(shí),積極主動(dòng)地完成自學(xué)過程并培養(yǎng)創(chuàng)新精神。我們?cè)诮虒W(xué)中也發(fā)現(xiàn),很多學(xué)生在課間以及課程結(jié)束后會(huì)主動(dòng)向老師請(qǐng)教分子生物學(xué)方面的問題,這說明研究生的學(xué)習(xí)主動(dòng)性增強(qiáng)了。但本次教改活動(dòng)也有不足之處。從老師授課的情況和學(xué)生咨詢的問題來看,大部分研究生對(duì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的理解及操作很弱,由于本校的《分子生物學(xué)技術(shù)》實(shí)驗(yàn)課程已交給學(xué)校“醫(yī)學(xué)與生物學(xué)研究中心”實(shí)驗(yàn)室承擔(dān),本次教改未能涉及到實(shí)驗(yàn)技術(shù)方面的改革。因此如何提供更好的實(shí)驗(yàn)室條件,加強(qiáng)學(xué)生的操作能力,是我們分子生物學(xué)教學(xué)改革的重要目標(biāo)。分子生物學(xué)的發(fā)展十分迅速,而本校使用的教材相對(duì)陳舊,雖然老師在講授時(shí)可以適當(dāng)介紹新的研究進(jìn)展,但陳舊的教材不利于學(xué)生自學(xué)。在本次教學(xué)活動(dòng)中,雖然我們考慮過師生討論、互動(dòng)式的教學(xué),但由于授課人數(shù)多,學(xué)生基礎(chǔ)參差不齊,甚至少部分學(xué)生只是為了獲取學(xué)分,對(duì)本課程毫無興趣等諸多原因,最終本課程36學(xué)時(shí)的教學(xué)中,大部分仍然是采用老師講授的方式進(jìn)行教學(xué)。

經(jīng)過對(duì)《醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)》這門課程的教學(xué)改革,我們雖然取得了一定的教學(xué)效果,但深知這門課程具有很強(qiáng)的理論性和實(shí)踐性,教師必須不斷探索合適的教學(xué)手段和教學(xué)方法。在今后的教學(xué)中,如何變革教學(xué)思路,體現(xiàn)以“醫(yī)學(xué)”為中心,并調(diào)整教學(xué)內(nèi)容使之與科研課題需求相結(jié)合,以進(jìn)一步激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣和創(chuàng)造性思維等,將成為教研室教學(xué)改革重點(diǎn)思考的問題。作者認(rèn)為可以考慮在授課中盡量引用科學(xué)先驅(qū)們的成功事跡,以“故事”的形式進(jìn)行授課;在講解分子生物學(xué)經(jīng)典現(xiàn)象和原理時(shí),可以從相關(guān)現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)、科學(xué)家如何提出假設(shè)、如何通過實(shí)驗(yàn)證明假設(shè)的思路,在講解中引導(dǎo)學(xué)生思考,從而鍛煉學(xué)生的科研思維;在介紹新進(jìn)展時(shí)應(yīng)充分結(jié)合生活中和醫(yī)學(xué)中的熱點(diǎn)問題進(jìn)行講述,明確本學(xué)科同臨床的聯(lián)系程度,這不僅強(qiáng)調(diào)了學(xué)科的重要性,同時(shí)也加強(qiáng)了研究生學(xué)習(xí)的迫切性,使他們真正喜愛這門課程,同時(shí)能高效地接收相關(guān)理論知識(shí),應(yīng)該會(huì)取得更好的效果。

以上是本教研室為適應(yīng)教學(xué)改革需求,在研究生層次上的分子生物學(xué)教學(xué)的一些嘗試與體會(huì)。隨著高教改革的深入進(jìn)行,我們還將不斷完善、不斷總結(jié)、不斷創(chuàng)新,以使研究生的分子生物學(xué)教學(xué)走上新臺(tái)階,使學(xué)生學(xué)以致用,努力創(chuàng)新,最終成為教學(xué)、科研、醫(yī)療的棟梁之材。

基金項(xiàng)目:遵義醫(yī)學(xué)院教學(xué)改革項(xiàng)目“研究生分子生物學(xué)教學(xué)改革的研究與實(shí)踐”

第7篇:分子生物學(xué)進(jìn)展范文

【關(guān)鍵詞】醫(yī)學(xué)碩士研究生 實(shí)驗(yàn)教學(xué) 改革 實(shí)踐

分子生物學(xué)是研究核酸等生物大分子的功能、形態(tài)結(jié)構(gòu)特征及其重要性和規(guī)律性的科學(xué),是人類從分子水平真正揭開生物世界的奧秘,由被動(dòng)地適應(yīng)自然界轉(zhuǎn)向主動(dòng)地改造和重組自然界的基礎(chǔ)學(xué)科[1]。分子生物學(xué)技術(shù)被認(rèn)為是20世紀(jì)生物學(xué)一項(xiàng)最偉大的成就,也是當(dāng)今新技術(shù)革命的重要組成部分。目前這項(xiàng)新技術(shù)已經(jīng)滲透到生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,尤其是在醫(yī)學(xué)科學(xué)中已廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、疾病診斷與臨床治療中。一位醫(yī)學(xué)相關(guān)專業(yè)的碩士研究生學(xué)好、學(xué)通、學(xué)精分子生物學(xué),是作為碩士研究生必須走好的一個(gè)階段,才能把本科階段學(xué)習(xí)的基礎(chǔ)知識(shí)與臨床研究和科學(xué)研究的最新進(jìn)展聯(lián)系好[2]。

分子生物學(xué)是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科,但相對(duì)于其他學(xué)科的實(shí)驗(yàn)而言,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)復(fù)雜而理論難以理解,技術(shù)性很強(qiáng),是理論和實(shí)踐相結(jié)合的典型課程,而且要求學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中感受、理解知識(shí)的產(chǎn)生和發(fā)展過程,培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立思考的能力和創(chuàng)新精神[3]。這就對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)提出了更高的要求和目標(biāo),因此建立科學(xué)合理的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系,將對(duì)生命科學(xué)研究的思維方法帶進(jìn)課堂,激發(fā)學(xué)生對(duì)分子生物學(xué)及科學(xué)研究的興趣和潛能,并可提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)的主動(dòng)性和積極性,提升研究生實(shí)際操作能力,發(fā)現(xiàn)問題解決問題的能力。

研究生的培養(yǎng)更應(yīng)側(cè)重于獨(dú)立從事科學(xué)研究工作能力的培養(yǎng),為使研究生一年級(jí)的學(xué)生盡快轉(zhuǎn)換角色,逐漸順利地進(jìn)入真正的研究領(lǐng)域,并為了與現(xiàn)代技術(shù)接軌,提高教學(xué)質(zhì)量和培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)研究的能力。我們結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)設(shè)備以及實(shí)驗(yàn)教學(xué)人員的素質(zhì)能力,對(duì)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了改革與探索。

(一)結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容編寫相關(guān)的實(shí)驗(yàn)教材

我們對(duì)醫(yī)學(xué)碩士研究生的分子生物學(xué)理論部分選用的教材是朱玉賢《現(xiàn)代分子生物學(xué)》(第三版),本版教材有二章介紹分子生物學(xué)技術(shù),但不能作為實(shí)驗(yàn)教材。我們根據(jù)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)目的進(jìn)行合理組合,力求使該實(shí)驗(yàn)體系內(nèi)容新穎、實(shí)用、注重創(chuàng)新、體現(xiàn)素質(zhì)教育和能力培養(yǎng)。編寫教材的主要參考書為薩姆布魯克《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》,是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)比較好的教材和參考書[4]。我們?cè)诮滩闹兄饕榻B常見的各種分子生物學(xué)技術(shù)及其原理, 并精心挑選了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。其中重點(diǎn)介紹了基因工程技術(shù)的常用到的質(zhì)粒提取、核酸電泳、技術(shù)、酶切、轉(zhuǎn)化、重組體的篩選、蛋白電泳等實(shí)驗(yàn)。

(二)合理按排分子生物學(xué)理論與實(shí)驗(yàn)課教學(xué)

我們將分子生物學(xué)分為理論和實(shí)驗(yàn),分別采用的教材為《現(xiàn)代分子生物學(xué)》和自編的《分子生物學(xué)技術(shù)》,學(xué)時(shí)都為36學(xué)時(shí)。理論課在實(shí)驗(yàn)課之前進(jìn)行,讓學(xué)生先了解部分基礎(chǔ)理論。在上實(shí)驗(yàn)課時(shí),還須講解實(shí)驗(yàn)的基本原理,這部分知識(shí)尤其重要。它是實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的理論基礎(chǔ),有利于指導(dǎo)學(xué)生更好地理解實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、了解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,有助于增加學(xué)生對(duì)分子生物學(xué)的學(xué)習(xí)興趣,鍛煉學(xué)生的實(shí)驗(yàn)思維。只有理論與實(shí)踐相結(jié)合,才能使學(xué)生真正掌握理論中抽象的知識(shí)。 靈活按排實(shí)驗(yàn)課時(shí)間,并控制班級(jí)規(guī)模。

我們將2010級(jí)180名碩士研究分為6個(gè)班,每班30個(gè)學(xué)生。根據(jù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)將實(shí)驗(yàn)集中安排在一段時(shí)間里,保證實(shí)驗(yàn)的連續(xù)性,將實(shí)驗(yàn)課全部按排在周末2天時(shí)內(nèi)。這樣,改變了傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)時(shí)間安排過于死板,時(shí)間過少且不連貫的現(xiàn)象。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)授課上主要是以基因工程的內(nèi)容為主線,順序是基因分離克隆,載體選擇、酶切,片段與載體的連接,重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化,重組子的鑒定、表達(dá)。這樣的安排有助于增加學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,使學(xué)生主動(dòng)探索未知的知識(shí),最重要的一點(diǎn)是有利于培養(yǎng)學(xué)生的科研思維。課程周期為3個(gè)星期,每周完成一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,在這3個(gè)星期里,學(xué)生剛好能完成一個(gè)基因工程的流程,形成一個(gè)完整的實(shí)驗(yàn)概念,同時(shí)又有充足的時(shí)間讓學(xué)生思考和解決問題,加深了對(duì)實(shí)驗(yàn)的印象。

充分做好實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作,以二人為1小組,精心準(zhǔn)備每組使用的器材,如槍頭、離心管、鑷子、一次性手套,微量離心機(jī)、電泳儀、電泳槽、染色缸等。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)課老師和實(shí)驗(yàn)人員反復(fù)對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了多次預(yù)實(shí)驗(yàn),并取得較理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

錄像是良好的視聽媒體,其直觀性好,不受實(shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)材料的限制。在學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)之前,觀看我們實(shí)驗(yàn)教師親自錄制的實(shí)驗(yàn)演示。演示的內(nèi)容不僅所有的同學(xué)都能看清楚,而且能給同學(xué)們實(shí)驗(yàn)過程的真實(shí)感受。同時(shí)還具有很強(qiáng)的表現(xiàn)力和感染力,能激發(fā)學(xué)生們的興趣,集中他們的注意力。

(三)雙語教學(xué)

在實(shí)際科研中,由于目前商品化的試劑盒應(yīng)用廣泛以及大部分使用的儀器、藥品、試劑都是進(jìn)口的,其說明書以英文多見,實(shí)驗(yàn)步驟也多是采用英文。而剛?cè)雽W(xué)的研究生們掌握的專業(yè)詞匯少,不能準(zhǔn)確翻譯與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的英文資料和說明書,更不用說閱讀專業(yè)文獻(xiàn)。我們精心組織備課,用英文制作課件、書寫教案和講稿,同時(shí)要求學(xué)生用英文寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

(四)實(shí)踐總結(jié)

本次實(shí)驗(yàn)課改革探索,使分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課環(huán)環(huán)相扣,而且全部操作由學(xué)生自己完成,每一部分實(shí)驗(yàn)都承上啟下,要求學(xué)生態(tài)度認(rèn)真、思路清楚、操作仔細(xì)、相互協(xié)作才能完成。這樣的實(shí)驗(yàn)課過程完整、結(jié)果明顯、教學(xué)效果良好。不僅使學(xué)生得到了分子生物學(xué)技術(shù)操作的訓(xùn)練,也提高了教師的實(shí)驗(yàn)技術(shù)能力,對(duì)相關(guān)技術(shù)和知識(shí)有了更深入的了解和認(rèn)識(shí)。

參 考 文 獻(xiàn)

[1]朱玉賢,李毅,鄭曉峰.現(xiàn)代分子生物學(xué).高等教育出版社. 2007.

[2]寧啟蘭,馬捷,李冬民等.研究生實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革中的分子生物學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì).西北醫(yī)學(xué)教育.2009, 17: 693-694.

第8篇:分子生物學(xué)進(jìn)展范文

[關(guān)鍵詞]現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù);醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)

隨著基因克隆技術(shù)趨向成熟和基因測(cè)序工作逐步完善,后基因時(shí)代逐步到來。20世紀(jì)末數(shù)理科學(xué)在生物學(xué)領(lǐng)域廣泛滲透,在結(jié)構(gòu)基因組學(xué),功能基因組學(xué)和環(huán)境基因組學(xué)逢勃發(fā)展形勢(shì)下,分子診斷學(xué)技術(shù)將會(huì)取得突破性進(jìn)展,也給檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)帶來了嶄新的領(lǐng)域,為學(xué)科發(fā)展提供了新的機(jī)遇。

1 分子生物傳感器在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用

分子生物傳感器是利用一定的生物或化學(xué)的固定技術(shù),將生物識(shí)別元件(酶、抗體、抗原、蛋白、核酸、受體、細(xì)胞、微生物、動(dòng)植物組織等)固定在換能器上,當(dāng)待測(cè)物與生物識(shí)別元件發(fā)生特異性反應(yīng)后,通過換能器將所產(chǎn)生的反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢暂敵?、檢測(cè)的電信號(hào)和光信號(hào)等,以此對(duì)待測(cè)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析,從而達(dá)到檢測(cè)分析的目的。

分子生物傳感器可以廣泛地應(yīng)用于對(duì)體液中的微量蛋白、小分子有機(jī)物、核酸等多種物質(zhì)的檢測(cè)。在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中,這些項(xiàng)目是臨床診斷和病情分析的重要依據(jù)。能夠在體內(nèi)實(shí)時(shí)監(jiān)控的生物傳感器對(duì)于手術(shù)中和重癥監(jiān)護(hù)的病人很有幫助。

Skladal等用經(jīng)過寡核苷酸探針修飾的壓電傳感器檢測(cè)血清中的丙型肝炎病毒(HCV)并實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)其DNA的結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增過程,完成整個(gè)監(jiān)測(cè)過程僅需10 min且裝置可重復(fù)使用。

Petricoin等用壓電傳感器研究了破骨細(xì)胞生成抑制因子(OPG)和幾種相應(yīng)抗體的相互作用,研發(fā)出可快速檢驗(yàn)血清中OPG的壓電免疫傳感器。

Dro-sten等報(bào)道了檢測(cè)神經(jīng)遞質(zhì)的酶電報(bào),將電極放置在神經(jīng)肌肉接點(diǎn)附近可實(shí)時(shí)測(cè)定并記錄鄰近的神經(jīng)元去極化后所釋放的遞質(zhì)谷氨酸。

2 分子生物芯片技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用

隨著分子生物學(xué)的發(fā)展及人們對(duì)疾病過程的認(rèn)識(shí)加深,傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)已不能完全適應(yīng)微量、快速、準(zhǔn)確、全面的要求。

所謂的生物芯片是指將大量探針分子固定于支持物上(通常支持物上的一個(gè)點(diǎn)代表一種分子探針),并與標(biāo)記的樣品雜交或反應(yīng),通過自動(dòng)化儀器檢測(cè)雜交或反應(yīng)信號(hào)的強(qiáng)度而判斷樣品中靶分子的數(shù)量。

在檢測(cè)病原菌方面,由于大部分細(xì)菌、病毒的基因組測(cè)序已完成,將許多代表每種微生物的特殊基因制成1張芯片。通過反轉(zhuǎn)錄可檢測(cè)標(biāo)本中的有無病原體基因的表達(dá)及表達(dá)的情況,以判斷病人感染病原及感染的進(jìn)程、宿主的反應(yīng)。由于P53抑癌基因在多數(shù)腫瘤中均發(fā)生突變,因此其是重要的腫瘤診斷靶基因。

Nam等人將硅基質(zhì)上合成的寡核苷酸芯片用于血清樣品中的丙型肝炎病毒分型。3 分子生物納米技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用生物活性物質(zhì)的檢測(cè)有很多種方法,其中,以抗體為基礎(chǔ)的技術(shù)尤其重要。免疫分析加上磁性修飾已成功地用于各種生物活性物質(zhì)和異生質(zhì)(如藥物、致癌物等)的檢測(cè)。將特異性抗體或抗原固定到納米磁球表面,并以酶、放射性同位素、熒光染料或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)為基礎(chǔ)所產(chǎn)生的檢測(cè)與傳統(tǒng)微量滴定板技術(shù)相比具有簡(jiǎn)單、快速和靈敏的特點(diǎn)。

Van Helden等將抗體連接的納米磁性微球與高效率、快速的化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)相結(jié)合的自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng),則成功地用于血清中人免疫缺陷病毒1型和2型(HIV-1和HIV-2)抗體的檢測(cè)。另外,用于人胰島素檢測(cè)的全自動(dòng)夾心法免疫測(cè)定技術(shù)也已建立,其中亦用到抗體、蛋白納米磁性微粒復(fù)合物和堿性磷酸酶標(biāo)記二抗。

4 分子蛋白組學(xué)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用

當(dāng)前有關(guān)分子蛋白質(zhì)組學(xué)的大量研究成果喜人,但一大部分結(jié)論是眾說紛紜、甚至是互相矛盾。一些經(jīng)典的腫瘤標(biāo)志物卻無法在當(dāng)前以表面增強(qiáng)激光解析離子化-飛行時(shí)間質(zhì)譜(SELDI-TOF-MS)技術(shù)為代表的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)中體現(xiàn)出來??赡艽嬖谝韵聨追矫娴膯栴}。一方面是SELDI-TOF-MS技術(shù)自身的限制性,包括敏感性、重復(fù)性以及使用當(dāng)前設(shè)備對(duì)每個(gè)峰值蛋白確認(rèn)的局限性;另一方面是實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及對(duì)照組選擇是否恰當(dāng),某個(gè)蛋白組模式反映的是腫瘤的特異性,還是炎癥反應(yīng),或是代謝紊亂等無法定論;另一方面是不同實(shí)驗(yàn)室結(jié)果可比性、標(biāo)本處理過程的差異無法探究。只有這些問題得到解決, SELDI-TOF-MS技術(shù)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中才能發(fā)揮革命性作用。

5 分子生物學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)發(fā)展中的趨勢(shì)

檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)有二:一是定量PCR;二是PCR的全自動(dòng)化,如應(yīng)用擴(kuò)增與檢測(cè)于一體的一次性試驗(yàn)卡,可較好地解決PCR污染問題。除PCR以外的體外基因擴(kuò)增技術(shù)如連接酶反應(yīng)(LCR),鏈置換擴(kuò)增系統(tǒng)(SDA),轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增系統(tǒng)(TAS),自限序列擴(kuò)增系統(tǒng)(3SR),QB復(fù)制酶擴(kuò)增系統(tǒng)等技術(shù)也將由科研進(jìn)入臨床。分子生物學(xué)技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量控制引起了廣泛關(guān)注,特別是衛(wèi)生部頒發(fā)的PCR實(shí)驗(yàn)室管理辦法對(duì)PCR技術(shù)應(yīng)用的健康發(fā)展起到了關(guān)鍵作用。為解決PCR交叉污染問題,從標(biāo)本制備到檢測(cè)的全封閉系統(tǒng)及相應(yīng)的自動(dòng)化儀器已在國(guó)內(nèi)逐步普及。

結(jié)語:通過對(duì)現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的作用的研究,可以證明,不管是從什么角度看待這兩門看似毫不相關(guān)的學(xué)科,其實(shí)有著莫大的聯(lián)系。二者如果能很好的結(jié)合運(yùn)用,將會(huì)為醫(yī)學(xué)與生物學(xué)帶來許多好處,并且可以相互發(fā)展,相互進(jìn)步。

參考文獻(xiàn):

[1] 黃蓮芬. 分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J]. 臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2011(16)

[2] 張學(xué)艷,王軍. 分子生物學(xué)技術(shù)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用[J]. 中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備. 2008(07)

[3] 王海英. 分子生物學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 當(dāng)代醫(yī)學(xué). 2011(06)

[4] 宮春勇. 淺談醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)向檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的轉(zhuǎn)變[J]. 華北國(guó)防醫(yī)藥. 2010(S1)

第9篇:分子生物學(xué)進(jìn)展范文

一、教學(xué)方法的改革

(一)問題式教學(xué),鼓勵(lì)學(xué)生積極思考

問題式教學(xué)方法是教師根據(jù)所講授的內(nèi)容提出問題,讓學(xué)生在限定時(shí)間內(nèi)閱讀教材,思考教師設(shè)定的問題,教師提問,根據(jù)學(xué)生回答問題的情況進(jìn)行有重點(diǎn)、有目的的引導(dǎo)和講解,最終教師講解鞏固,使課堂氣氛活躍,調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)和思考的積極性,提高教學(xué)效果。崔希福[2] 將問題式教學(xué)方法應(yīng)用在基本原理課堂上,非常有助于抵制和規(guī)避課教學(xué)中普遍存在的問題,使學(xué)生不僅真正掌握基本原理和方法,并且提高了學(xué)生分析問題和解決問題的能力。王榮等[3]利用問題式教學(xué)方法在機(jī)械原理課堂上也進(jìn)行了教學(xué)實(shí)踐,并取得了很好的教學(xué)效果。吉敏麗[4]在憲法學(xué)教學(xué)中通過問題式教學(xué)方法的運(yùn)用,提升了學(xué)生思維能力,并開拓了學(xué)生的知識(shí)面及視野。問題式教學(xué)方法在看似枯燥的原理課程上運(yùn)用將極大提高課堂的教學(xué)效果,使學(xué)生的自主思考和表達(dá)能力得到較好的提升。問題式教學(xué)與傳統(tǒng)的教學(xué)相比,是以“施人以漁而非施人以魚”的方式對(duì)學(xué)生進(jìn)行培養(yǎng),與“填鴨式”傳統(tǒng)教學(xué)模式比較,更利于學(xué)生獲得分析問題和解決問題的能力,也更利于綜合素質(zhì)的培養(yǎng)和提高。通過本研究分析的結(jié)果,問題式教學(xué)在分子生物學(xué)理論課程中取得了較好的教學(xué)效果,有必要進(jìn)一步推廣使用。

(二)研讀外文文獻(xiàn),倡導(dǎo)學(xué)生開展講座

分子生物學(xué)是理論與技術(shù)相互結(jié)合和相互促進(jìn)效果最顯著的學(xué)科,分子生物學(xué)的理論指導(dǎo)新技術(shù)的產(chǎn)生,新技術(shù)的應(yīng)用又促進(jìn)了新理論的形成。因此,分子生物學(xué)知識(shí)的更新速度在生命科學(xué)領(lǐng)域首屈一指,將外文文獻(xiàn)引入到分子生物學(xué)的教學(xué)中不僅能夠拓寬學(xué)生的視野,而且能夠展現(xiàn)這些抽象的理論知識(shí)在實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用以及基于分子生物學(xué)知識(shí)的最新研究進(jìn)展,以啟發(fā)學(xué)生廣闊的思維方式。比如,基因的表達(dá)調(diào)控章節(jié),教材中講述了從基因水平、轉(zhuǎn)錄水平、轉(zhuǎn)錄后水平、翻譯水平和翻譯后水平的基因表達(dá)調(diào)控,正是由于基因表達(dá)調(diào)控的存在,才能使僅僅擁有2.5萬個(gè)基因的人類成為最高級(jí)最復(fù)雜的生物。表觀遺傳學(xué)是基因表達(dá)調(diào)控的新興內(nèi)容,包括小RNA和DNA甲基化對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控等內(nèi)容,這些知識(shí)在教材中一筆帶過,學(xué)生無法真正認(rèn)識(shí)和了解前沿信息。通過推薦外文文獻(xiàn),讓學(xué)生分組學(xué)習(xí)和討論,并在課堂上以講座的形式分享自己學(xué)到的新知識(shí),對(duì)于增強(qiáng)學(xué)生自信心和團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識(shí)、提高自我學(xué)習(xí)思考能力具有顯著的效果。

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