談醫(yī)藥院校高效液相色譜管理

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摘要：本文從制度管理、規(guī)范化操作管理、維護(hù)管理等三個方面來闡述醫(yī)藥院校高效液相色譜的管理，通過規(guī)范的管理，提高儀器的使用率，保障化相關(guān)教學(xué)科研工作的順利進(jìn)行。

關(guān)鍵詞：醫(yī)藥院校；高效液相色譜；管理

高效液相色譜法是儀器分析的一種重要方法[1]，是醫(yī)藥院校中醫(yī)學(xué)類、藥學(xué)類及其相關(guān)專業(yè)必需的實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容，是實(shí)踐性操作性專業(yè)性很強(qiáng)的一種分析方法，在教學(xué)和科研方面為培養(yǎng)技能型醫(yī)藥專才發(fā)揮著重要作用。高效液相色譜適用于分析受熱不穩(wěn)定易分解的、高沸點(diǎn)、不易揮發(fā)的、分子量較大、不同極性的天然和合成有機(jī)化合物，應(yīng)用范圍十分廣泛，具有高效率、高分辨率、高靈敏度、高速度的特點(diǎn)。而且，儀器十分昂貴，并要經(jīng)常維護(hù)，因而，對于高效液相的管理提出了很高的要求。

1制度管理

建立和完善高效液相色譜相關(guān)管理制度，使管理制度科學(xué)化合理化規(guī)范化，在學(xué)校和學(xué)院層面建立《高效液相色譜使用、維護(hù)管理制度》，加強(qiáng)管理。由于使用人員較多，要實(shí)行提前預(yù)約制度，按照預(yù)約時間排隊。儀器使用前要熟悉儀器操作規(guī)程，不得做與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的參數(shù)設(shè)置；不得拆卸儀器，有問題要及時匯報。因?qū)嶒?yàn)人員使用不當(dāng)造成的儀器或軟件損壞由實(shí)驗(yàn)者或其負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)盡快維修。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)存放建立的文件夾，以實(shí)驗(yàn)者名字命名，數(shù)據(jù)拷貝用專用U盤，不得擅自在電腦里安裝軟件，確實(shí)需要安裝需經(jīng)過管理者同意。使用者要經(jīng)過專業(yè)的操作培訓(xùn)，合格后方可單獨(dú)操作儀器。通過規(guī)范化的制度管理，不但能提高儀器的使用率，還能延長儀器的壽命。

2規(guī)范化操作管理

進(jìn)行高效液相色譜實(shí)驗(yàn)時，每個環(huán)節(jié)的操作，直接影響實(shí)驗(yàn)的成敗，有些失誤甚至?xí)斐蓛x器不同零部件的損壞，因而每個操作都要嚴(yán)謹(jǐn)和細(xì)致，因此有必要規(guī)范化操作，制定標(biāo)準(zhǔn)的操作流程。以普通的高效液相色譜儀為例，具體步驟要有嚴(yán)格的先后操作順序：（1）過濾流動相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜。（2）對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。（3）打開HPLC工作站（包括計算機(jī)軟件和色譜儀），連接好流動相管道，連接檢測系統(tǒng)。（4）進(jìn)入HPLC控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動菜單。（5）有一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖洗時速度不要超過10ml/min。（6）調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。點(diǎn)擊injure，選用合適的流速，點(diǎn)擊on，走基線，觀察基線的情況。（7）設(shè)計走樣方法。點(diǎn)擊file，選取selectusersandmethods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法，點(diǎn)擊newmethod。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括：a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流，一般2~5分鐘；b.基線歸零；c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；d.走樣時間，隨不同的樣品而不同。（8）進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣，所有的樣品均需過濾。方法走完后，點(diǎn)擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。（9）關(guān)機(jī)時，先關(guān)計算機(jī)，再關(guān)液相色譜。只有規(guī)范具體的操作流程，才能更好地進(jìn)行分析實(shí)驗(yàn)，獲得準(zhǔn)確真實(shí)科學(xué)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，才能更好地維護(hù)好高效液相色譜儀器。

3維護(hù)管理

在使用高效液相色譜色譜儀器后一定要做好維護(hù)管理，一般來說最好的維護(hù)就是經(jīng)常規(guī)范性使用，在操作使用時充分了解儀器的注意事項，做到科學(xué)分析合理使用。流動相需采用色譜純?nèi)軇?，水須為超純水，?zhǔn)備所需的流動相，以滿足儀器要求，避免損壞色譜柱;超純水須當(dāng)天配當(dāng)天用；進(jìn)樣或溶劑進(jìn)入色譜柱前須經(jīng)徹底的排氣，嚴(yán)禁氣泡進(jìn)入色譜柱;流動相進(jìn)入色譜柱后要檢查流路有沒漏液，特別是色譜柱的接頭；嚴(yán)禁100%水進(jìn)入反相色譜柱，需有一定的有機(jī)溶劑比例；嚴(yán)禁使用沒經(jīng)濾膜過濾的溶劑沖洗色譜柱，避免將互不相溶的溶劑一同進(jìn)入泵內(nèi)；流動相需經(jīng)過濾、除氣后方可使用，用適合的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20~30min；待分析的樣品必須徹底溶解澄清、過濾，配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液，用合適的0.45μm濾膜過濾，以避免堵塞、損壞色譜柱，所有通過色譜柱的液體須經(jīng)嚴(yán)格過濾；流動相的比例須逐步過渡，不能跨度太大；流速不論是由慢到快還是由快到慢也須逐步過渡，最大流速一般不超過10ml/min；分析完成后，須及時清洗色譜柱和檢測器的比色池，原則上先用流動相沖洗30min，再逐步過渡到100%有機(jī)溶劑（甲醇或乙腈）沖洗30min，嚴(yán)禁由一種溶劑馬上變換另一種溶劑，酸堿鹽類須先由90%水:10%甲醇沖洗30~60min，再逐步過渡到100%甲醇沖洗。長時間不用色譜柱，要沖洗好后，用純甲醇或乙腈封存普通；C18柱盡量避免在40℃以上的溫度下分析，定期測柱效，有下降，可以用10％異丙醇甲醇沖洗色譜柱。每次實(shí)驗(yàn)后要做好登記使用記錄，長時間不用時，管理人員應(yīng)該定期檢查高效液相色譜各個部件的狀況，做好相關(guān)的維護(hù)措施。

4總結(jié)

高效液相色譜儀器在醫(yī)藥院校的教學(xué)和科研中使用率和利用率很高，本文通過儀器的制度化管理、操作規(guī)范化管理和維護(hù)管理，使其更好地服務(wù)于教學(xué)和科研，只有加強(qiáng)各方面的管理，提高使用率延長使用壽命[2]，才能更好地提高教學(xué)質(zhì)量和科研水平，為學(xué)校和社會培養(yǎng)創(chuàng)新型技能型高素質(zhì)醫(yī)藥人才，提高畢業(yè)生的就業(yè)競爭力。

參考文獻(xiàn)

[1]吳少敏，張雅芝，殷博昊.高效液相色譜的使用和維護(hù)[J].實(shí)驗(yàn)室科學(xué)，2011，14（3）：183-186.

[2]周陸怡，李琴.高等院校高效液相色譜的管理與維護(hù)[J].廣州化工,2019，47(4)：149-150.

作者：何樹華 陳御珍 鄭明彬 陳銘祥 單位：廣東醫(yī)科大學(xué)