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關(guān)鍵詞 疫苗;接種;原因
隨著城市建設(shè)的迅速發(fā)展,北京作為我國的首都,大量的外來人口涌入,使得流動人口大量的增加,加大了學(xué)齡前兒童疫苗接種工作的難度,為了解北京市大興區(qū)舊宮鎮(zhèn)學(xué)齡前兒童疫苗接種的情況,查找疫苗接種不及時的原因[1-2],以便改進(jìn)工作方法,提高疫苗接種及時率,特進(jìn)行了此次調(diào)查研究,具體內(nèi)容如下:
1 資料和方法
1.1 臨床資料 北京市大興區(qū)舊宮鎮(zhèn)學(xué)齡前兒童3600名,在本地區(qū)居住2個月以上,不論其戶口是否在當(dāng)?shù)?,均為本次調(diào)查對象。
1.2 方法 通過查閱資料、接種門診調(diào)查、入戶調(diào)查等方式對3600例學(xué)齡前兒童的相關(guān)資料用Excel表錄入后進(jìn)行統(tǒng)計分析。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,采用x2檢驗(yàn),P
2 結(jié)果
2.1 一般情況
北京市大興區(qū)舊宮鎮(zhèn)共調(diào)查3600名學(xué)齡前兒童,男1820名(50.6%),女1780名(49.4%),本地戶口700人(19.4%),外地戶口2900人(80.6%),建證率為97.6%,建卡率為97.0%。
2.2 原因分析
2.2.1 不同經(jīng)濟(jì)狀況與學(xué)齡前兒童接種情況的關(guān)系 經(jīng)濟(jì)狀況較好的家庭其疫苗接種及時率較高,經(jīng)濟(jì)狀況較差的家庭其疫苗接種及時率較低,結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=8.135,P
2.2.2 父母的文化程度與學(xué)齡前兒童接種情況的關(guān)系 父母的文化程度越高,學(xué)齡前兒童疫苗接種及時率越高,結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=204.9,65.79,P
2.2.3 父母相關(guān)知識的知曉率與學(xué)齡前兒童接種情況的關(guān)系 父母對相關(guān)知識的知曉率越高,學(xué)齡前兒童疫苗接種及時率越高,結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=8.43,P
2.2.4 父母接種信息的來源 接種信息來源于醫(yī)生的有2460人(68.3%),大眾傳媒的680人(18.9%),宣傳畫和板報220人(6.1%),書本和課本180人(5.0%),其他60人(1.7%),
3 討論
隨著城鎮(zhèn)化的發(fā)展,大量勞動力涌入城市,造成學(xué)齡前兒童接種不及時的現(xiàn)象時有發(fā)生,究其原因,主要為:一是流動人口大量增加,農(nóng)村、城鎮(zhèn)住房變遷頻繁,醫(yī)生的責(zé)任心不強(qiáng),對外來兒童的情況沒有及時掌握更新,造成學(xué)齡前兒童疫苗接種不及時,二是舊宮鎮(zhèn)部分家庭經(jīng)濟(jì)狀況比較差,父母大多從事體力勞動,文化程度低,缺乏基本的衛(wèi)生保健知識,不知道兒童接種疫苗的重要性,三是有些兒童由于生病造成了疫苗接種不及時,四是政府有關(guān)部門配合不力,入托、入學(xué)等兒童查驗(yàn)接種證的力度不大,縱容了疫苗拒種之風(fēng),五是因財力、人力、物力、設(shè)施、設(shè)備等因素的限制致使預(yù)防接種效果評估和獎懲措施責(zé)任追究落實(shí)不到位[3-4],影響了接種人員工作的積極性,六是家長忙于工作,為生計奔波而忘記了預(yù)約時間,導(dǎo)致疫苗接種不及時,七是疫苗的副作用被部分媒體夸大,使得部分家長心有余悸,擔(dān)心副作用而拒絕接種,本文通過分析,匯總各項(xiàng)數(shù)據(jù)后結(jié)果顯示:北京市大興區(qū)舊宮鎮(zhèn)共調(diào)查3600名學(xué)齡前兒童,男1820名(50.6%),女1780名(49.4%),本地戶口700人(19.4%),外地戶口2900人(80.6%),建證率為97.6%,建卡率為97.0%。經(jīng)濟(jì)狀況較好的家庭其疫苗接種及時率較高,經(jīng)濟(jì)狀況較差的家庭其疫苗接種及時率較低,父母的文化程度越高,學(xué)齡前兒童疫苗接種及時率越高,父母對相關(guān)知識的知曉率越高,學(xué)齡前兒童疫苗接種及時率越高,接種信息來源于醫(yī)生的有2460人(68.3%),大眾傳媒的680人(18.9%),宣傳畫和板報220人(6.1%),書本和課本180人(5.0%),其他60人(1.7%),結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義(P
針對以上存在的原因,我們提出以下建議:一是加大對相關(guān)疾病防治知識的宣教力度,要重點(diǎn)宣傳疫苗的防病作用,對其副作用進(jìn)行正面的宣傳,打破失真的報道,從根本上提高大家的認(rèn)識,提高自我保護(hù)的能力。二是流動人口管理。
參考文獻(xiàn):
[1] 林獻(xiàn)丹,陳玲萍,鄭曉春,等.流動兒童免疫規(guī)劃疫苗接種率影響因素分析[J].中國兒童保健雜志,2011,19(1):51-53.
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關(guān)鍵詞 復(fù)方甘草酸苷 肺結(jié)核藥物肝損害 臨床效果
近年來,隨著環(huán)境的惡化以及傳染病的加重的趨勢,肺結(jié)核有回升的現(xiàn)象。而目前臨床上對于控制肺結(jié)核的藥物有異煙肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇等,但是以上藥物均有肝損害的并發(fā)癥。這也是臨床抗結(jié)核失敗的一個重要因素[1]。就采用復(fù)方甘草酸苷治療肺結(jié)核藥物肝損害取得較好的效果,現(xiàn)在介紹如下。
資料與方法
2007年11月~2012年6月收治肺結(jié)核藥物肝損害患者38例,隨機(jī)分為兩組,對照組19例,男11例,女8例;年齡21~73歲,平均428±71歲;按照肝損害的程度分成輕度9例,中度7例,重度3例;觀察組19例,男10例,女9例;年齡22~74歲,平均425±70歲;按照肝損害的程度分成輕度10例[2],中度6例,重度3例;兩組在性別、年齡、分度、治療前的相關(guān)情況等方面無明顯差異,無統(tǒng)計學(xué)意義(P>005)。以上患者治療前肝功能均正常,均經(jīng)過異煙肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇四聯(lián)療法后出現(xiàn)程度不一的肝損害入院。
方法:一般治療為保護(hù)肝功能的藥物,注意生活。飲食等方面的影響,對照組予以用5%葡萄糖注射液加還原型谷胱甘肽12g治療;觀察組予以5%葡萄糖注射液和復(fù)方甘草酸苷120mg。然后每周抽血檢查肝功能1次,如恢復(fù)正常者繼續(xù)用1周后停藥,若未轉(zhuǎn)為正常則繼續(xù)用藥,均治療3周。且在治療過程中適當(dāng)?shù)膶ΠY處理。
統(tǒng)計學(xué)處理:采用SPSS130軟件進(jìn)行分析,計量資料采用t檢驗(yàn),計數(shù)資料采用X2檢驗(yàn),且以P<005為有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié) 果
兩組肝功能影響情況分析:對照組與觀察組在治療前的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和血清總膽紅素水平無明顯的差異性,P>005無統(tǒng)計學(xué)意義;而治療后在丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血清總膽紅素水平上,對照組分別為55±21IU/L、725±267μmol/L,觀察組分別為44±23IU/L、561±145μmol/L。兩組比較差異明顯,P<005有統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。
不良反應(yīng)情況分析:兩組在惡心嘔吐、肝區(qū)不適、腹瀉便秘、疲勞等不良反應(yīng)方面有明顯的差異性,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<005)。見表2。
討 論
復(fù)方甘草酸苷是以β體甘草酸為主要成分,輔以甘氨酸、半胱氨酸制成的強(qiáng)力肝細(xì)胞膜保護(hù)劑,具有保護(hù)肝細(xì)胞膜、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、類固醇樣作用[3]。從本次的研究結(jié)果分析,復(fù)方甘草酸苷具有顯著的降酶、退黃功效,另外,在不良反應(yīng)方面,對照組有14例出現(xiàn)惡心嘔吐、肝區(qū)不適等癥狀,而觀察組僅6例,且為輕度不適,停藥后癥狀好轉(zhuǎn),這說明復(fù)方甘草酸苷的安全性高,關(guān)于其主要的不良反應(yīng)機(jī)制臨床報道較少,有待于臨床進(jìn)一步探討。
參考文獻(xiàn)
1 鄒國強(qiáng),賴映君.復(fù)方甘草酸苷對抗結(jié)核治療的藥物性肝炎的預(yù)防效果觀察[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報,2011,17(5):581-583.
【關(guān)鍵詞】 護(hù)理學(xué);文科;理科;成績;高考;相關(guān)性;分析
在1950年召開的第一屆全國衛(wèi)生工作會議上,我國將護(hù)士教育列為中等專業(yè)教育,并且停辦了高等護(hù)理教育。此后的中等護(hù)理教育成為我國護(hù)理教育的主體[1]。但是,隨著醫(yī)藥科學(xué)技術(shù)的發(fā)展、醫(yī)學(xué)模式和人們健康觀念的轉(zhuǎn)變,使我國長期以來堅持的以中等教育為主體的護(hù)理教育將不能適應(yīng)社會對專業(yè)護(hù)理的要求。因此,我國又于1983年恢復(fù)開辦護(hù)理本科教育。我校也于2001年開始招收本科護(hù)理學(xué)生(文、理科兼收)。那么,護(hù)理專業(yè)學(xué)生在校學(xué)習(xí)成績與其高考成績有無相關(guān)性,文、理科考生在校學(xué)習(xí)情況有無差異,一直是招生工作者和教育工作者關(guān)心的問題。本研究即分析我校護(hù)理本科學(xué)生的學(xué)習(xí)成績,并研究其與高考分?jǐn)?shù)之間的相關(guān)性。
1 研究對象與方法
由于各省考生的錄取分?jǐn)?shù)線、考試科目及人數(shù)有較大差異,為便于比較,我們選擇四川籍考生作為研究對象,因各種原因缺考、重考或補(bǔ)考者的成績除外,共計75名04級四川籍學(xué)生的成績列入分析。以每位學(xué)生14門主干必修課程(包括人體解剖學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)、病理學(xué)、藥理學(xué)、診斷學(xué)、護(hù)理學(xué)基礎(chǔ)、護(hù)理管理學(xué)、內(nèi)科護(hù)理學(xué)、外科護(hù)理學(xué)、婦產(chǎn)科護(hù)理學(xué)、兒科護(hù)理學(xué)、護(hù)理學(xué)研究、社區(qū)護(hù)理學(xué))的平均成績反映其學(xué)習(xí)狀況。學(xué)生的高考成績包括語文、數(shù)學(xué)、英語、綜合及總成績。
統(tǒng)計學(xué)分析采用Sigmstat1.0軟件,計量資料的差異性檢驗(yàn)參照文獻(xiàn)[2]的方法采用KruskalWallis 單因素秩方差分析(三組以上)或t檢驗(yàn)(兩組),并用Spearman秩相關(guān)及Person積差分析法分析高考成績與主干課程成績之間的相關(guān)性。r為相關(guān)系數(shù)。
2 結(jié)果
2.1 學(xué)生各類成績的統(tǒng)計學(xué)描述(見表1)表1 學(xué)生高考成績及主干課程成績的統(tǒng)計學(xué)描述 注:文、理科及文理合計主干課程成績之間的差異性比較用Kruskal-Wallis單因素秩方差分析,H=0.261,P=0.8778。文、理科學(xué)生主干課程成績之間比較用t檢驗(yàn),t=0.248,P=0.8049。2.2 學(xué)習(xí)成績與高考成績的相關(guān)性分析(見表2)表2 主干課程成績與高考成績的相關(guān)性分析
3 討論
在許多人的意識中,護(hù)理學(xué)屬于醫(yī)學(xué)的范疇,按文理分科考慮,應(yīng)屬于理工類。我校自2001年招收護(hù)理專業(yè)學(xué)生以來,一直以招收理科類考生為主,也招收少量文科類學(xué)生。對于文科類考生是否能學(xué)好護(hù)理學(xué),一直是人們關(guān)心的問題。本研究結(jié)果顯示,文、理科考生在校專業(yè)課學(xué)習(xí)成績無顯著差異,說明招收文科考生不會影響護(hù)理學(xué)生的整體專業(yè)素質(zhì)。達(dá)麗等[3]曾對臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)兩個年級民族和漢族班學(xué)生(共489人)的研究發(fā)現(xiàn),高考總成績與醫(yī)學(xué)22門課程成績均呈顯著正相關(guān)(r=0.2358-0.7345,P0.05)。以上結(jié)果提示:臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)與護(hù)理學(xué)專業(yè)學(xué)生的學(xué)習(xí)成績與高考成績的相關(guān)程度的差異性可能說明護(hù)理專業(yè)對數(shù)理化知識水平的要求較低。但考慮到樣本數(shù)較小,有待進(jìn)一步證明。另外還說明,雖然高考分?jǐn)?shù)在一定程度上反映了考生的高中文化基礎(chǔ)和今后的發(fā)展?jié)摿Γ荒芡耆A(yù)測考生今后的發(fā)展,更不能反映考生今后的實(shí)際工作能力。一個人的發(fā)展與其知識基礎(chǔ)有關(guān),更與其非智力心理因素以及外界的影響有關(guān)。因此,高校教育工作者的責(zé)任在于傳授業(yè)務(wù)知識和培養(yǎng)智能,更在于引導(dǎo)和教育學(xué)生,使其理性與情感意志、科學(xué)精神與人文素養(yǎng)方面得到和諧發(fā)展[5]。
參考文獻(xiàn)
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2 楊正偉,唐中,田小兵.一組計量資料的統(tǒng)計分析.川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2005,20(3):357-359.
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【關(guān)鍵詞】結(jié)腸癌;直腸癌;腫瘤根治術(shù);復(fù)發(fā);生物學(xué)行為
【中國分類號】R735.3【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1004-5511(2012)06-0106-02
隨著社會的進(jìn)步,人們生活水平的提高,癌癥的發(fā)病率也在顯著升高,有資料顯示,近年來我國結(jié)腸癌與直腸癌的發(fā)病率與過去十年相比增加了近20%,所以臨床上需加強(qiáng)對于結(jié)腸癌與直腸癌的認(rèn)識[1]。結(jié)直腸癌在根治術(shù)后復(fù)發(fā)主要是指其局部發(fā)生腫瘤,而一般腫瘤復(fù)發(fā)都會伴有遠(yuǎn)處的轉(zhuǎn)移,本文就結(jié)腸癌與直腸癌通過根治術(shù)后復(fù)發(fā)的各項(xiàng)指標(biāo)對比,以此來總結(jié)與分析影響兩種疾病復(fù)發(fā)的相關(guān)因素,具體報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選取本院2009年1月至2011年1月收治的結(jié)直腸癌患者共105例,其中男性患者52例,女性患者53例,年齡為40到79歲不等,平均年齡為(56.8±3.3)歲。105例患者中,結(jié)腸癌患者40例,直腸癌患者65例,均符合以下選取標(biāo)準(zhǔn)[2]:1)對其進(jìn)行結(jié)直腸癌手術(shù)屬于根治性手術(shù);2)在手術(shù)后發(fā)生復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移,且復(fù)況已經(jīng)明確;3)排除術(shù)前接受過放化療的患者;4)排除術(shù)后3個月內(nèi)死亡的患者;5)排除具有家族型息肉以及腸炎惡變患者。對所有患者的年齡、性別、病程進(jìn)行分析與比較,其差異性無統(tǒng)計學(xué)意義,具有可比性。
1.2 觀察內(nèi)容 對105例患者的復(fù)況進(jìn)行分析與探討,主要比對腫瘤的分化程度、大體類型、組織學(xué)類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等,以此作為相關(guān)因素分析標(biāo)準(zhǔn)。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 對所有數(shù)據(jù)使用SPSS12.0軟件進(jìn)行分析與檢驗(yàn),并使用Logistic回歸分析。
2 結(jié)果
2.1 復(fù)況 40例結(jié)腸癌患者其中位復(fù)發(fā)時間為15.2個月,55例直腸癌患者其中位復(fù)發(fā)時間為22.0個月;結(jié)腸癌患者其多部位復(fù)發(fā)率為45.3%,直腸癌患者其多部位復(fù)發(fā)率為66.2%;結(jié)腸癌患者在復(fù)發(fā)后的3年生存率為19.9%,直腸癌患者復(fù)發(fā)后的3年存活率為26.6%。
2.2 腫瘤情況 對105例進(jìn)行結(jié)直腸癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的患者其腫瘤資料進(jìn)行評估與分析可得,結(jié)直腸癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)患者,其在腫瘤的生物學(xué)行為上有明顯的區(qū)別。
注明:通過對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行SPSS軟件分析與檢驗(yàn),P均小于0.05,差異性具有統(tǒng)計學(xué)意義。
3 討論
隨著社會的進(jìn)步,人們的生活質(zhì)量得到了顯著的提高,也導(dǎo)致各種癌癥的發(fā)病率逐漸升高。結(jié)直腸癌是一種常見的腫瘤性疾病,結(jié)腸癌與直腸癌在手術(shù)后發(fā)生復(fù)發(fā)在臨床上主要是指患者在接受手術(shù)后,其局部再次出現(xiàn)腫瘤,一般來說結(jié)腸癌與直腸癌的復(fù)發(fā)往往伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,所以會給患者造成極大的痛苦和負(fù)擔(dān)。結(jié)直腸癌對于患者的生命安全與生存質(zhì)量有嚴(yán)重的影響,故對其進(jìn)行根治術(shù)是臨床上最常用也是最徹底的治療方法。為了對結(jié)直腸癌進(jìn)行根治術(shù)后發(fā)生腫瘤復(fù)發(fā)的原因進(jìn)行對比和分析,本文采用回顧性分析的方法,對105例結(jié)直腸癌患者的臨床資料與檢查結(jié)果進(jìn)行比對,并得出了以下的一些結(jié)論。
腫瘤的大體類型和結(jié)直腸癌的復(fù)發(fā)有直接的關(guān)系,且對于結(jié)腸癌患者與直腸癌患者而言,其腫瘤的大體類型差異性具有統(tǒng)計學(xué)意義[4];除此之外,在腫瘤的大小、發(fā)生的部位、腫瘤的分化、腫瘤的分期、是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等方面,結(jié)腸癌和直腸癌均有顯著性差異。結(jié)腸癌的復(fù)發(fā)腫瘤大小明顯小于直腸癌復(fù)發(fā)腫瘤大小,而其分化主要為中分化,而直腸癌為低分化,結(jié)腸癌的Duke’s分期主要為R期,直腸癌主要為C期,兩者均會發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,但結(jié)腸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況較直腸癌而言更多也更明顯。根據(jù)本文對105例患者的臨床資料進(jìn)行分析后顯示,直腸癌患者復(fù)發(fā)后其三年存活率為26.6%,明顯高于結(jié)腸癌復(fù)發(fā)患者的19.9%,這也說明對于直腸癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)患者而言,其生存質(zhì)量及預(yù)后優(yōu)于結(jié)腸癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)患者。
本文通過對于本組105例結(jié)直腸癌患者的復(fù)發(fā)相關(guān)因素的對比分析,發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌患者與直腸癌的腫瘤發(fā)生部位、腫瘤大小、病理分化、腫瘤大體類型、Dukes分期以及淋巴結(jié)是否出現(xiàn)轉(zhuǎn)移均有顯著差異。近些年來,對結(jié)直腸癌手術(shù)患者進(jìn)行術(shù)后輔助化療的方式得到了醫(yī)師的注重和運(yùn)用,因此,在對結(jié)直腸癌患者進(jìn)行根治術(shù)后,要根據(jù)患者自身的情況以及臨床要求進(jìn)行相應(yīng)的放化療,減少結(jié)直腸癌的復(fù)發(fā)率,為患者減輕生理與心理負(fù)擔(dān),提高其生存率與預(yù)后質(zhì)量。
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目前,很多研究人員對影像資料分析方法的學(xué)習(xí)和理解存在一定困難,尤其初學(xué)者對繁雜的概念、復(fù)雜的計算公式、數(shù)據(jù)資料性質(zhì)判斷以及如何選擇合適統(tǒng)計學(xué)方法等問題難以深刻理解。針對這些問題,王良等[1]建議采用以下模式:判斷資料類型、根據(jù)研究目的選擇分析方法、其他適宜方法。
1.1根據(jù)資料類型初步確定方法
臨床研究中產(chǎn)生的各種不同原始資料,而不同數(shù)據(jù)資料類型采用的統(tǒng)計分析方法也不同。定量資料常用的方法有t檢驗(yàn)、方差分析、非參數(shù)檢驗(yàn)、線性相關(guān)與回歸分析等。定性資料可用的方法有χ2檢驗(yàn)、對數(shù)線性模型、logistic回歸等,影像醫(yī)師可根據(jù)不同需要選用不同統(tǒng)計方法。值得一提的是有些資料類型確定后,統(tǒng)計方法的選用對其有序性有相應(yīng)要求;而多種方法聯(lián)合應(yīng)用或者使用部分少見的分析方法時還需要在選定統(tǒng)計方法后,利用統(tǒng)計軟件(如SAS、SPSS)對應(yīng)的不同命令進(jìn)行初步分析試驗(yàn)。
1.2根據(jù)研究目的選擇方法
1.2.1差異性研究
差異性分析是指評價比較組間均數(shù)、頻數(shù)、比率等的差異。根據(jù)研究需要可選用的方法有χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)、方差分析、非參數(shù)檢驗(yàn)等。臨床上研究兩組、多組樣本比率或構(gòu)成比之間的差別關(guān)系時最常用χ2檢驗(yàn),也是針對計數(shù)資料進(jìn)行假設(shè)檢驗(yàn)的一種常用的統(tǒng)計學(xué)方法,而對兩組定量資料分析常用t檢驗(yàn)和秩和檢驗(yàn),多組資料分析則常用方差分析;Fisher精確概率法主要適用于總體樣本頻數(shù)小于40或四格表中最小格子T值<1。雖然Fisher精確檢驗(yàn)不屬于χ2檢驗(yàn),但仍可以作為有效的補(bǔ)充,而也有人認(rèn)為在統(tǒng)計軟件普遍易得的當(dāng)下,F(xiàn)isher精確概率法也同樣適用于大樣本四格表的資料。如彭澤華等[6]在探討冠狀竇-左心房肌連接的雙源CT冠狀動脈成像(DSCTCA)形態(tài)特征時針對冠狀竇-左心房肌連接的類型在兩組類別變量采用聯(lián)表的χ2檢驗(yàn),結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.115,P=0.944)。Teefey等[7]在研究超聲表現(xiàn)及白細(xì)胞計數(shù)預(yù)測急性膽囊炎壞疽變化關(guān)系時使用Fisher精確分析。t檢驗(yàn)適用于兩組定量資料分析且資料滿足方差齊性和正態(tài)性兩個基本條件;同樣t檢驗(yàn)適用于完全隨機(jī)設(shè)計的單因素兩水平的資料,在選用t檢驗(yàn)時應(yīng)注意對資料進(jìn)行相應(yīng)的變量變換,若資料不能滿足基本條件則選用適合分析偏態(tài)分布的非參數(shù)檢驗(yàn)(如:秩和檢驗(yàn))進(jìn)行分析。如Wang等[8]在研究不同侵襲性的前列腺癌組織和正常前列腺組織以及外周帶前列腺癌Gleason評分與腫瘤信號對比時采用t檢驗(yàn)。Kung等[9]在研究化膿性髖關(guān)節(jié)炎的臨床和放射學(xué)預(yù)測指標(biāo)時也使用t檢驗(yàn)分析。秩和檢驗(yàn)包括基本秩和檢驗(yàn)(Wilcoxon等級檢驗(yàn)、Mann-WhitneyU-檢驗(yàn))和高級秩和檢驗(yàn)(Kruskal-Wallis、Friedmantests、Kolmogorov-Smirnov擬合檢驗(yàn))。當(dāng)研究資料為兩方差齊且呈正態(tài)分布的總體,而總體分布類型未知或者不滿足參數(shù)檢驗(yàn)的條件時,采用t檢驗(yàn)對樣本進(jìn)行比較;但若無需比較總體參數(shù)只比較總置的分布是否相同且總體資料分布類型未知時需要采用非參數(shù)的Wilcoxon秩和檢驗(yàn)進(jìn)行比較。針對兩組或多組樣本的定性資料使用秩和檢驗(yàn)比較時,需要混合兩樣本數(shù)據(jù)、編秩(從小到大)、計量T值、查表或計算求得P值。如Saindane等[10]在對“空蝶鞍”的臨床意義判定因素研究中針對顱內(nèi)壓增高和偶然發(fā)現(xiàn)空蝶鞍患者兩組資料對比時采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)。Filippi等[11]在研究DTI測量兒童Ι型神經(jīng)纖維瘤病胼胝體派生指標(biāo)時運(yùn)用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)。事實(shí)上在影像資料分析中經(jīng)常見到多重組間比較的情況,方差分析(analysisofvariance,ANOVA)就是用來推斷兩個或者多個總體之間是否有差別的檢驗(yàn),又稱F檢驗(yàn)。多重組間比較不能單純選用兩樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn),但是可以根據(jù)資料類型選用ANOVA檢驗(yàn)。若來自兩個隨機(jī)樣本資料呈正態(tài)分布且方差齊性同的定量資料,應(yīng)采用兩因素(處理、配伍)方差分析(two-wayANOVA)或配對t檢驗(yàn)。通過F檢驗(yàn)可以比較可能由某因素所至的變異或隨機(jī)誤差,同時可了解該因素對測定結(jié)果有無影響。當(dāng)不滿足方差分析和t檢驗(yàn)條件時,可對數(shù)據(jù)進(jìn)行變換或采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計資料的FriedmanM檢驗(yàn)。Obdeijn等[12]在研究乳腺術(shù)前MRI能減少術(shù)中切緣和乳腺保守術(shù)后再次手術(shù),使用ANOVA分析兩組資料,結(jié)果對照組(29.3%)相比術(shù)前MRI病例組(15.8%)有效減少切緣和再次手術(shù)(P<0.01)。
1.2.2相關(guān)性分析
相關(guān)性分析不等同因果性,也不是簡單的個性化相比,其涵蓋的范圍和領(lǐng)域較為廣泛。統(tǒng)計學(xué)意義中的相關(guān)性分析包含相關(guān)性系數(shù)的計算,其過程為:每個變量轉(zhuǎn)化為標(biāo)準(zhǔn)單位后,乘積的平均數(shù)即為相關(guān)系數(shù)。相關(guān)性分析可以用直觀地用散點(diǎn)圖表示兩個或者多個變量的離散,當(dāng)其緊密地靠近于一條直線時,即變量間存在很強(qiáng)的相關(guān)性。相關(guān)分析常用的方法有Pearson相關(guān)性分析、Spearman等級相關(guān)分析和卡方檢驗(yàn)。臨床中對兩個或者多個均為定量變量的資料,且變量均呈正態(tài)分布時可選用Pearson相關(guān)分析,但多數(shù)情況下Pearson相關(guān)分析適用于兩組資料的相關(guān)性分析。判斷兩變量之間線性關(guān)系的密切程度主要用Pearson積差相關(guān)系數(shù),其范圍為-1~+1。若相關(guān)系數(shù)的絕對值越接近1,即兩變量間相關(guān)性越密切;反之,相關(guān)系數(shù)的絕對值越接近0,其相關(guān)性越差。實(shí)際上在高質(zhì)量期刊論文中使用Spearman等級相關(guān)分析的研究也很常見,其通過相關(guān)系數(shù)進(jìn)行變量間線性關(guān)系分析來判定兩個變量間相關(guān)性的密切程度。而密切程度的量化指標(biāo)則通過計算樣本相關(guān)系數(shù)r,根據(jù)實(shí)際計算r絕對值所屬范圍來推斷兩個來自總體變量的線性相關(guān)程度,從而推斷總體的相關(guān)性。根據(jù)實(shí)際分析需要,將相關(guān)關(guān)系密切程度分為6等:當(dāng)IrI=0時,說明兩變量完全不相關(guān):當(dāng)0<IrI<0.3時,說明兩變量不相關(guān);當(dāng)0.3<IrI<0.5時,說明兩變量低度相關(guān);當(dāng)0.5<IrI<0.8時,說明兩變量顯著相關(guān);當(dāng)0.8<IrI<1說明兩變量高度相關(guān):當(dāng)IrI=l時,說明兩個變量完全相關(guān)。王效春等[13]在研究磁敏感加權(quán)成像與動態(tài)磁敏感加權(quán)對比增強(qiáng)MR灌注加權(quán)成像聯(lián)合應(yīng)用在腦星形細(xì)胞瘤分級中的價值一文應(yīng)用Spearman等級相關(guān)分析,結(jié)果顯示腫瘤內(nèi)磁敏感信號與相對血容量最大值和病理分級呈正相關(guān)(IrI分別為0.72、0.89,P值均<0.01),相對血容量與病理分級呈顯著正相關(guān)(r=0.78,P<0.01)。又如Lederlin等[14]在比較幾何參數(shù)、相關(guān)功能與組織學(xué)特性在哮喘患者的支氣管壁CT衰減性關(guān)系中同時使用Pearson相關(guān)分析和Spearman等級相關(guān)分析,其r=0.39~0.43,表明與對照組相比常規(guī)CT衰減參數(shù)在哮喘患者平常支氣管的CT參數(shù)、氣道壁衰減方面更好的區(qū)分哮喘患者,同時也更好地區(qū)分氣道梗阻。值得提及的是對資料有序或無序無法作出初步判定,且明確資料類型為定性資料時還可以選擇使用卡方檢驗(yàn)和Spearman等級相關(guān)分析。
1.2.3影響性分析
由于事物之間的聯(lián)系是多種多樣的,而某一結(jié)局可能受到來自其他多個方面的影響,此時為分析某一結(jié)局發(fā)生的影響因素可采用的資料分析方法有線性回歸(一元或多元)、logistic回歸、Cox比例風(fēng)險回歸模型(生存分析)等。在影像資料分析中一元線性回歸是將影像資料中一個最主要影響因素作為自變量來解釋因變量的變化。多元回歸定義為某一因變量的變化受多個重要因素的影響,而此時需要用兩個或多個影響因素作為自變量來解釋因變量的變化,且多個自變量與因變量之間是線性關(guān)系(多個因變量之間相互獨(dú)立)。實(shí)際研究中多元線性回歸模型在影像資料分析應(yīng)用較為廣泛。Langkammer等[15]在磁敏感系數(shù)繪圖在多發(fā)性硬化中應(yīng)用研究中使用多元線性分析,結(jié)果顯示各種影響因素中年齡是預(yù)測磁化率影響最強(qiáng)的因素。Logistic回歸是研究二分類和多分類觀察結(jié)果與某些影響因素自己建關(guān)系的一種多變化分析方法,其經(jīng)常需要分析疾病與各影像指標(biāo)之間的定量關(guān)系,同時又需要排除一些混雜因素影響。Logistic回歸在統(tǒng)計學(xué)上屬于概率型非線性回歸,其分析思路與線性回歸大致相同,能有效解決過高或過低水平因素以及分析因素少而樣本量大等問題。相比多元線性回歸,Logistic回歸在處理分類反應(yīng)數(shù)據(jù)方面更為常用,且適用于結(jié)局為定性影像資料。如Lee等[16]研究高分辨率CT在發(fā)現(xiàn)小蜂窩樣特發(fā)性間質(zhì)肺炎纖維化的連續(xù)變化和預(yù)后應(yīng)用中使用logistic回歸分析,結(jié)果表明高分辨率CT在網(wǎng)狀和磨玻璃狀范圍內(nèi)評價普通肺炎與非特異性纖維化肺炎之間差別明顯(P<0.01)。在臨床實(shí)際工作中常常需要分析生存時間與影像資料之間的關(guān)系,Kaplan-Meier法就是常用的一種分析方法,其又稱乘積極限法,對大小樣本資料分析均適用。實(shí)踐中習(xí)慣上以時間為橫軸、生存率為縱軸回執(zhí)的階梯狀圖稱為Kaplan-Meier生存曲線(survivalcurve),也稱K-M曲線。Cox比例風(fēng)險回歸模型是另一種生存分析方法,包括參數(shù)與半?yún)?shù)模型兩類,其主要是進(jìn)行多因素生存分析的一種方法,同時可分析眾多變量對生存時間和生存結(jié)局的影響。Saad等[17]在經(jīng)頸靜脈肝內(nèi)門體靜脈分流術(shù)在肝移植受者的技術(shù)分析和臨床評估研究中比較成功施行肝移植與非移植病人開展門體分流術(shù)(transjugularintrahepaticportosystemicshunt,TIPS)后的臨床療效評估,使用了Kaplan-Meier法,結(jié)果顯示6~12個月、12~24個月、24個月以上,移植成活率分別為43%、32%和22%。生存期大于1年的晚期肝臟疾病模型存活評分低于17分、等于17分或大于17分的存活率分別為54%和8%(P<0.05)。
2其他適用方法
2.1ROC曲線
ROC(receiveroperatingcharacteristic)曲線是歐美影像學(xué)期刊中應(yīng)用較為常見的統(tǒng)計學(xué)方法,國內(nèi)期刊應(yīng)用相對較少。ROC曲線根據(jù)一系列不同的分界值以真陽性率(靈敏性)為縱坐標(biāo),假陽性率(特異性)為橫坐標(biāo)繪制的曲線。ROC曲線分析結(jié)合靈敏度(sensitivity)和特異度(specificity)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷,也應(yīng)用于影像診斷及人群篩查。ROC曲線根據(jù)曲線下面積(areaundertheROCcurve,AUC)的大小對診斷試驗(yàn)作定量分析。理論上,AUC值在0~1間。根據(jù)實(shí)際情況將診斷分為不符合診斷(AUC<0.5)、無診斷價值(AUC=0.5)、低準(zhǔn)確性(0.5<AUC<0.7)、一定準(zhǔn)確性(0.7<AUC<0.9)、較高準(zhǔn)確性(0.9<AUC<1),AUC越接近于1,表明診斷準(zhǔn)確性越高。Hyodo等[18]在研究乏血管少結(jié)節(jié)的慢性肝臟疾病患者發(fā)展成富血管性肝細(xì)胞癌風(fēng)險因素一文中使用ROC曲線分析,結(jié)果顯示后續(xù)發(fā)展成血管性結(jié)節(jié)平均增長率明顯高于非血管過渡性結(jié)節(jié)。
2.2Kappa檢驗(yàn)
Kappa檢驗(yàn)主要用于評價不同資料間一致性程度,常用Kappa值評價一致程度。Kappa系數(shù)適用于兩項(xiàng)和多項(xiàng)無序分類變量資料。在影像學(xué)試驗(yàn)中常需要判斷多名醫(yī)師測量同一研究對象或者同一醫(yī)師多次測量同一對象的一致性,Kappa一致性檢驗(yàn)便是最佳選擇。Kappa檢驗(yàn)還可通過計算Kappa值對兩種非金標(biāo)準(zhǔn)的診斷方法進(jìn)行診斷結(jié)果一致性分析。一般而言,評價Kappa一致性需要計算Kappa系數(shù),但在研究考察新的診斷試驗(yàn)方法是否優(yōu)于金標(biāo)準(zhǔn),或者檢驗(yàn)是否與金標(biāo)準(zhǔn)一致時,還需要計算特異度、靈敏度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值等指標(biāo)。目前公認(rèn)的Kappa系數(shù)分為六個區(qū)段即一致性極差(Kappa值<0),一致性微弱(Kappa值0~0.2),一致性弱(Kappa值0.21~0.40),中度一致Kappa值(0.41~0.60),高度一致(Kappa值0.61~0.80),一致性極強(qiáng)(Kappa值0.81~1.00)。
2.3Levene檢驗(yàn)
【關(guān)鍵詞】宮外孕;腹腔鏡;開腹;手術(shù);療效
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(s).2014.04.114文章編號:1004-7484(2014)-04-1908-01宮外孕是異位妊娠的俗稱,是指受精卵著床于正常子宮體腔外的任何部位,是婦科常見急腹癥之一,臨床主要表現(xiàn)有停經(jīng),腹痛及陰道不規(guī)則流血等癥狀[1]。伴隨著腹腔鏡技術(shù)的日益成熟和發(fā)展,近年來腹腔鏡手術(shù)被廣泛應(yīng)用在治療婦科宮外孕病例中且取得了顯著療效。本文就腹腔鏡手術(shù)與傳統(tǒng)開腹手術(shù)治療宮外孕的療效對比分析報道如下。1資料與方法
1.1一般資料隨機(jī)選取2012年8月至2013年6月,本院婦科收治的160例宮外孕均為輸卵管妊娠住院患者,依據(jù)手術(shù)方法隨機(jī)分為觀察組與對照組進(jìn)行對比分析。其中觀察組80例病例采用腹腔鏡手術(shù)治療,年齡(25-42)歲,平均年齡32.6歲;對照組80例病例采用傳統(tǒng)開腹手術(shù)治療,年齡(23-44)歲,平均年齡34.9歲;孕周9-12周,平均8周,已婚146例,未婚14例。所有病例均經(jīng)婚育史、妊娠史、腹痛及陰道流血等臨床體征、B超檢查、尿與血β-hCG測定確診[2]。本文兩組病例在年齡及孕期臨床體征等方面無差異性統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。兩組具有統(tǒng)計學(xué)可比性(P
1.2手術(shù)方法160例宮外孕住院患者手術(shù)方式不同。①觀察組80例采用全身麻醉,手術(shù)中均選用心電監(jiān)護(hù)儀,行血壓、脈搏、呼吸、血氧飽和度及尿量等檢測,采用電視腹腔鏡手術(shù)器械系列,取患者頭低足高位或平臥位,在臍輪下緣切約1.0cm小口,利用氣腹針穿刺腹腔并注入CO2氣體2-3L,形成10-12mmHg腹腔內(nèi)壓力,注氣速度≤1L/min。另在患者右側(cè)腹麥?zhǔn)近c(diǎn)及左側(cè)腹部與右側(cè)腹麥?zhǔn)宵c(diǎn)相對應(yīng)部位(避開腹壁血管)做第2、3穿刺孔。放入5mm與10mm穿刺套管,供手術(shù)器械操作。在腹腔鏡下用單極電凝刀縱行切開輸卵管妊娠部位1.5-2.5cm切口,再用無損傷鉗輸卵管內(nèi)側(cè)向傘端擠壓,排出妊娠胚囊或用分離鉗將凝血塊及胚胎組織慢慢鉗出,用生理鹽水沖洗妊娠部位,若殘留少許胚胎絨毛膜組織,可用5mm抓鉗鉗取輸卵管內(nèi)妊娠物,再次沖洗干凈后以雙極電凝止血;②對照組80例病例在硬腰聯(lián)合麻醉下采用傳統(tǒng)開腹手術(shù)治療宮外孕,在麻醉狀態(tài)下,參照《婦產(chǎn)科手術(shù)學(xué)》[3]所描述在患者病例下腹橫行切5-7cm口,探查腹腔尋找到宮外孕妊娠部位的胚囊物,最后用生理鹽水沖洗腹腔后逐層縫合關(guān)腹。術(shù)后輸注抗生素3d進(jìn)行預(yù)防性感染。
1.3評估指標(biāo)兩組病例均檢測術(shù)中出血量、手術(shù)時間、住院時間及術(shù)后排氣時間,同時3d后測定血β-hCG,若3d下降>20%為正常,隨訪至血β-hCG正常為止。
1對象與方法
1.1調(diào)查對象
本次調(diào)查對象采用分層整群抽樣的方法選自某大學(xué)醫(yī)學(xué)院女生700人,臨床女生346人(占49.4%),護(hù)理女生354人(占50.6%),年齡18~25歲;大一182人,大二199人,大三197人,大四122人。研究對象納入標(biāo)準(zhǔn):在校大學(xué)生,既往無精神病史和嚴(yán)重疾病史,愿意參與本次研究者。
1.2調(diào)查工具
1.2.1大學(xué)生壓力源問卷[1]
參考由陶琪編制的大學(xué)生壓力源問卷,經(jīng)預(yù)調(diào)查后變?yōu)?5個條目,采用5級計分方式,每個條目得分在1~5分之間。
1.2.2簡易應(yīng)對方式問卷[2]
由解亞寧編制,共有20個項(xiàng)目,采用4級計分方式,分為積極應(yīng)對和消極應(yīng)對兩個維度,1~12個條目為積極應(yīng)對維度,13~20個條目為消極應(yīng)對維度,該量表具有良好的信度和效度。
1.3調(diào)查方法
采用團(tuán)體方式施測,于2010年4月12~15日發(fā)放問卷,測試時間約為10min,現(xiàn)場收回。發(fā)放問卷時收集一般人口學(xué)資料。本次共發(fā)放調(diào)查問卷720份,回收有效問卷700份,問卷回收有效率為97.2%。1.4數(shù)據(jù)處理將所有數(shù)據(jù)資料輸入SPSS11.5forwindows軟件進(jìn)行統(tǒng)計檢驗(yàn)和處理。采用一般描述性統(tǒng)計方法、t檢驗(yàn)、方差分析及相關(guān)分析。
2結(jié)果
2.1護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生常見壓力源分析用常見壓力源得分運(yùn)行描述統(tǒng)計分析,各項(xiàng)目得分在1~5分之間。壓力源平均得分為(2.98±0.52)分,高于理論中值2.5分。不同專業(yè)間壓力源平均得分:護(hù)理系為(2.94±0.54),臨床醫(yī)學(xué)系為(3.02±0.50),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.905,P=0.057)。不同年級間壓力源平均得分:大一為(3.017±0.54),大二為(3.019±0.47),大三為(2.983±0.50),大四為(2.93±0.57),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.377,P=0.109)。
2.1.1護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生常見壓力源排名前10位評分
護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生常見壓力源大于3的條目得分及排序,見表1。2.1.2護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生常見壓力源差異性分析將護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生常見壓力源,運(yùn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),進(jìn)行比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在下列條目上差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果見表2。2.2護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生應(yīng)對方式測試結(jié)果2.2.1應(yīng)對方式描述性統(tǒng)計分析用簡易應(yīng)對方式得分運(yùn)行描述統(tǒng)計分析,各項(xiàng)目得分在0~3分之間。得分大于等于2(有時采?。┑捻?xiàng)目包括:在生活中經(jīng)受到挫折打擊或遇到困難時可能采取的態(tài)度和做法:①與人交談,傾訴內(nèi)心煩惱(2.15±0.78);②盡量看到事物好的一面(2.11±0.80);③改變自己的想法,重新發(fā)現(xiàn)生活中什么重要(2.11±0.79)。這3個項(xiàng)目均為積極應(yīng)對的條目。1.905,P=0.057)。不同年級間壓力源平均得分:大一為(3.017±0.54),大二為(3.019±0.47),大三為(2.983±0.50),大四為(2.93±0.57),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.377,P=0.109)。2.1.1護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生常見壓力源排名前10位評分護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生常見壓力源大于3的條目得分及排序,見表1。
2.1.2護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生常見壓力源差異性分析
將護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生常見壓力源,運(yùn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),進(jìn)行比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在下列條目上差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果見表2。
2.2護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生應(yīng)對方式測試結(jié)果
2.2.1應(yīng)對方式描述性統(tǒng)計分析
用簡易應(yīng)對方式得分運(yùn)行描述統(tǒng)計分析,各項(xiàng)目得分在0~3分之間。得分大于等于2(有時采?。┑捻?xiàng)目包括:在生活中經(jīng)受到挫折打擊或遇到困難時可能采取的態(tài)度和做法:①與人交談,傾訴內(nèi)心煩惱(2.15±0.78);②盡量看到事物好的一面(2.11±0.80);③改變自己的想法,重新發(fā)現(xiàn)生活中什么重要(2.11±0.79)。這3個項(xiàng)目均為積極應(yīng)對的條目。
積極應(yīng)對方式平均得分為1.91±0.42;消極應(yīng)對方式平均得分為1.19±0.48。
2.2.2應(yīng)對方式差異性分析
護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生應(yīng)對方式比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果見表3。不同年級間應(yīng)對方式比較,積極應(yīng)對方式差異無統(tǒng)計學(xué)意義;消極應(yīng)對方式差異有統(tǒng)計學(xué)意義,年級間的差異再經(jīng)LSD兩兩比較,大一學(xué)生得分比大二、大三、大四都小。見表4。
2.3護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生壓力源與應(yīng)對方式的相關(guān)分析
積極應(yīng)對方式與壓力總分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.273,P﹤0.01)而消極應(yīng)對方式與壓力總分呈正相關(guān)(r=0.336,P﹤0.01)。
3討論
3.1護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生常見壓力源分析
本次調(diào)查顯示:競爭、就業(yè)、學(xué)業(yè)、家庭期望、經(jīng)濟(jì)壓力成為護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生群體壓力的主要來源,與查康[3]所調(diào)查的女大學(xué)生壓力和姜海燕等[4]調(diào)查的醫(yī)學(xué)院大學(xué)生壓力事件比較相似。
3.1.1競爭、就業(yè)壓力“想要獲得獎學(xué)金或三好學(xué)生等榮譽(yù)”、“同學(xué)間的競爭較激烈”、“畢業(yè)找工作很難”分別排第1、4、8位。當(dāng)今時代的一個重要特征就是競爭加劇,整個社會處于激烈競爭之中。由于連續(xù)多年的擴(kuò)招加大了大學(xué)生競爭就業(yè)的力度,也是形成大學(xué)生諸多壓力中最主要的壓力源。
3.1.2家庭期望“家人對我的期望較高”排第2位。此條目得分在4以上的被調(diào)查者有494人,占70.6%。即70.6%的女大學(xué)生覺得承載家長高期望值是形成她們心理壓力的主要來源之一。
3.1.3經(jīng)濟(jì)壓力“每年要交納的學(xué)費(fèi)和住宿費(fèi)較多”、“找不到合適的掙錢機(jī)會”、“家庭經(jīng)濟(jì)比較困難”分別排第3、7、10位。學(xué)生上學(xué)的費(fèi)用一般來自家庭,由于近年來社會的發(fā)展和生活水平的變化,大學(xué)所需費(fèi)用明顯提高。特別是對于來自農(nóng)村和城市低收入家庭的學(xué)生來說則影響更大,他們不僅要面對每年上萬元的學(xué)費(fèi)和生活費(fèi),而且她們都是女生,普遍具有愛美心理,要經(jīng)受更多的物質(zhì)上的誘惑,再加上部分同學(xué)間消費(fèi)的相互攀比,也會使她們產(chǎn)生很大的壓力。
3.1.4學(xué)習(xí)壓力“上課時有的內(nèi)容聽不懂”、“學(xué)業(yè)任務(wù)繁重”、“想好好學(xué)但學(xué)不進(jìn)去”分別排第4、6、9位。主要由于醫(yī)學(xué)課程偏重理科,對于女生來說,若想學(xué)好,必須付出比男生更多的努力[5]。還有部分學(xué)生感到所學(xué)專業(yè)非所愛,使她們長期處于沖突與矛盾痛苦之中。
3.2護(hù)理系與臨床醫(yī)學(xué)系女生常見壓力源差異性分析
3.2.1臨床醫(yī)學(xué)系女生在“畢業(yè)找工作很難”、“所學(xué)的專業(yè)就業(yè)前景不樂觀”感受的壓力比護(hù)理系女生要大。目前各高校畢業(yè)生就業(yè)壓力都比較大,其中醫(yī)學(xué)院校的臨床醫(yī)學(xué)系女生就業(yè)壓力尤其顯著。醫(yī)科院校本科生的就業(yè)單位一般是基層一級醫(yī)院、較偏遠(yuǎn)地區(qū)的二級醫(yī)院、社區(qū)醫(yī)院,內(nèi)心期望值和現(xiàn)實(shí)有很大差距。要想分配到較大的二甲或三甲醫(yī)院,必須要優(yōu)秀碩士研究生畢業(yè)或博士畢業(yè)。而臨床醫(yī)學(xué)的學(xué)制是五年,女大學(xué)生本科畢業(yè)時平均年齡都要比其他專業(yè)的畢業(yè)生大1~2歲,再則有相當(dāng)一部分學(xué)生家庭經(jīng)濟(jì)又比較困難,所以她們在就業(yè)與讀研之間難以抉擇。而護(hù)理專業(yè)的學(xué)生學(xué)制是四年,本科畢業(yè)基本都能在二甲或三甲醫(yī)院就業(yè)。因此,臨床醫(yī)學(xué)系女生比護(hù)理系女生就業(yè)壓力要大。
3.2.2臨床醫(yī)學(xué)系女生在“學(xué)業(yè)任務(wù)繁重”、“家人對我的期望較高”上感受的壓力比護(hù)理系女生要大。臨床醫(yī)學(xué)系比護(hù)理系學(xué)生的學(xué)業(yè)任務(wù)繁重,這是客觀存在的現(xiàn)象;“家人對我的期望較高”,這可能與社會對臨床醫(yī)學(xué)與護(hù)理這兩個專業(yè)的職業(yè)認(rèn)同不一樣,一般觀點(diǎn)認(rèn)為臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展空間要比護(hù)理大有關(guān)。
3.2.3護(hù)理系女生在“不知道將來適合什么工作”上感受的壓力比臨床醫(yī)學(xué)系女生要大。通過問卷以及與學(xué)生的交流表明,護(hù)理系的學(xué)生盡管在就業(yè)上存在的壓力不大,但有相當(dāng)一部分護(hù)理學(xué)生不熱愛護(hù)理專業(yè),對專業(yè)的認(rèn)同感不強(qiáng),畢業(yè)后不想從事護(hù)理專業(yè),想改行,可又不知適合或能找到什么樣的工作。這與我國現(xiàn)階段本科畢業(yè)的護(hù)士與大專、中專畢業(yè)的護(hù)士所干工作一樣,她們感到體現(xiàn)不出自我價值有關(guān)。這一點(diǎn)提示我們,在對學(xué)生的教學(xué)與管理中,要加強(qiáng)對學(xué)生的職業(yè)觀教育。也希望有關(guān)部門盡早制定法律法規(guī),使護(hù)士能按層次、按職稱上崗。
3.2.4護(hù)理系女生在“家庭經(jīng)濟(jì)比較困難”上感受的壓力比臨床醫(yī)學(xué)系女生要大。這與護(hù)理系女生貧困學(xué)生所占比例較大有關(guān)。由于本科護(hù)理學(xué)生與臨床醫(yī)學(xué)女生相比,學(xué)制短一年,畢業(yè)后較易找工作,在招生時就吸引了較多的貧困學(xué)生。我校臨床醫(yī)學(xué)系貧困生大約占到30%~40%,而護(hù)理系貧困生大約占到50%左右。
3.2.5護(hù)理系女生在“自己的外形不夠理想”、“缺乏與異性同學(xué)交往的方法”方面感受的壓力比臨床醫(yī)學(xué)系女生要大。這可能與護(hù)理學(xué)生為女性單一性別群體,在平時學(xué)習(xí)、集體活動中缺乏異性同學(xué)間的互動和交流,而她們正處于“青年期”[6]渴望與異往,因此對自己的外形和與異往的方法關(guān)注較多有關(guān)。覺得“自己的外形不夠理想”還可能與護(hù)理系學(xué)生在求職應(yīng)聘時,用人單位比較注重學(xué)生的身高,長相有關(guān)。
[關(guān)鍵詞] 膀胱結(jié)石;結(jié)石成分;危險因素
[中圖分類號] R694+.4 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721(2013)06(a)-0059-02
膀胱結(jié)石是屬于泌尿系統(tǒng)結(jié)石的一種,也是我國最常見的泌尿系統(tǒng)疾病之一。在我國泌尿系統(tǒng)結(jié)石的發(fā)病率有明顯地域性、民族性、性別等差異,且結(jié)石成分復(fù)雜有很大的個體差異性[1]。近年來隨著生活水平的不斷提高,交通越來越便捷,引起其泌尿系統(tǒng)結(jié)石發(fā)病的地域性和民族性差異逐步降低,其泌尿系統(tǒng)結(jié)石發(fā)病率呈不斷上升趨勢,每年發(fā)病新增人數(shù)150萬~190萬,當(dāng)中有21%的泌尿系統(tǒng)結(jié)石患者需要住院接受治療。泌尿系統(tǒng)結(jié)石病手術(shù)或非手術(shù)治療后復(fù)發(fā)率極高,往往是接受治療后,其生活習(xí)慣沒有改變或地區(qū)性水源影響導(dǎo)致復(fù)發(fā)[2]。泌尿系統(tǒng)結(jié)石常常會引起患者的尿道、膀胱、輸尿管、腎的梗阻或造成這些組織和功能的損傷,嚴(yán)重者有可能引起泌尿系統(tǒng)的感染,威脅到腎臟。本文回顧性分析2007年4月~2012年10月來本院治療膀胱結(jié)石疾病的患者238例,分析其膀胱結(jié)石成分以及相關(guān)的危險因素,現(xiàn)報道如下:
1 資料與方法
1.1 一般資料
回顧性分析2007年4月~2012年10月來本院238例治療膀胱結(jié)石疾病的患者,年齡23~78歲,所有患者均來自同一地區(qū),男性184例,平均年齡(48±8.9)歲;女性54例,平均年齡(51.0±7.8)歲。經(jīng)自排、手術(shù)治療、體外沖擊波碎石術(shù)等方法收集238例患者尿路結(jié)石標(biāo)本。結(jié)石標(biāo)本大小不一,差異性極大,而且不同患者體內(nèi)結(jié)石數(shù)目也有明顯差異。多數(shù)結(jié)石呈多數(shù)結(jié)石呈灰褐色、黃色、灰白色,少數(shù)呈磚紅色、黑褐色。只有少數(shù)患者因結(jié)石堅硬或過大而進(jìn)行手術(shù)治療。
1.2結(jié)石成分分析
采用壓片法并用紅外光譜儀進(jìn)行成分分析。紅外燈下,將適量結(jié)石粉末研細(xì),加入KBr粉末按1∶50~1∶100混合,并充分研磨至2μm級粉末標(biāo)準(zhǔn),采用壓片設(shè)備,壓制成透明度較好的薄片,按實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作指南進(jìn)行操作。得到的樣品圖譜與此物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)圖譜進(jìn)行比對,確定結(jié)石的成分[3]。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
所有數(shù)據(jù)使用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件,計量資料采用t檢驗(yàn),計數(shù)資料用χ2檢驗(yàn),以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1年齡分布
患者年齡23~78歲,其中﹤30歲患者31例(13.03%),﹤40歲患者76例(31.93%),﹤50歲患者60例(25.21%),﹤60歲患者69例(28.99%),﹤80歲患者2例(0.84%)。
2.2 結(jié)石成分
在238例膀胱結(jié)石患者中,尿酸鹽合并草酸鈣結(jié)石占34.03%(84/238),單純性尿酸鹽結(jié)石占24.79%(59/238),單純性草酸鈣結(jié)石占15.55%(37/238),草酸鈣合并磷灰結(jié)石占11.76%(28/238),磷灰石并磷酸鎂銨結(jié)石占8.41%(20/238),單純性碳酸氫鈣結(jié)石占5.46%(13/238)(表1)。
表1 結(jié)石成分分布
2.3 性別與結(jié)石成分
不同性別患者結(jié)石成分,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P > 0.05),可認(rèn)為結(jié)石成分與患者性別無相關(guān)性(表2)。
表2 性別與結(jié)石成分分析[n(%)]
3 討論
泌尿系統(tǒng)膀胱結(jié)石是僅次于前列腺疾病與尿路感染的常見泌尿系統(tǒng)疾病之一,其中膀胱結(jié)石是泌尿系統(tǒng)中比較常見的尿路結(jié)石[4]。從全國范圍來看,膀胱結(jié)石的高發(fā)地區(qū)多位于我國南方城市和工業(yè)發(fā)達(dá)地區(qū),也多見于服務(wù)行業(yè)人群與商業(yè)人群,而高發(fā)人群多為25~40歲,并初次發(fā)病率有所提前且逐漸呈年輕化發(fā)展趨勢[5]。
膀胱結(jié)石成分多以晶體命名為主,主要是由有機(jī)鹽和無機(jī)鹽組成[6]。目前監(jiān)測其成分的分析方法有十多種,本院采用紅外光譜法進(jìn)行分析,具有定性和定量分析的優(yōu)勢,并擁有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分析的圖譜庫,操作簡單、靈敏度高、掃描速度快、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、對樣本無要求等[7],是壓片法制作研究樣本進(jìn)行光譜分析中最優(yōu)的方法,而使用KBr粉末混合是因可見光透明度較好、折射率低、價格合適[8]。通過掃描后與圖庫對比結(jié)果可知,患者膀胱結(jié)石成分主要以含鈣離子的尿結(jié)石為主,混合型尿結(jié)石占54.20%,其中以尿酸鹽合并草酸鈣結(jié)石為主,占34.03%;單純性尿結(jié)石占45.80%,其中以尿酸鹽結(jié)石為主,占24.79%,這可能與本地區(qū)居民有嗜好飲酒、喜歡咸食、高蛋白、高脂肪的食物以及衛(wèi)生條件等相關(guān),且本地區(qū)水質(zhì)硬度比較大,水中含有較高的鈣離子與鎂離子?;颊咝詣e與結(jié)石成分組成無統(tǒng)計學(xué)意義(P > 0.05),不能認(rèn)為結(jié)石成分的不同與患者性別有關(guān),本次研究患者的初次發(fā)病時間為30~50歲。這與我國相同地區(qū)文獻(xiàn)報道一致,但是尿結(jié)石的主要成分占比與我國不同地區(qū)文獻(xiàn)報道有一定的差異性,可能與我國國土面積廣闊,各地的居民與民族生活習(xí)慣、各地的水質(zhì)不同有關(guān)。從本次研究可知,膀胱結(jié)石的發(fā)病周期呈“M”型,2個最高峰分別為30~40歲和50~60歲。男性患者可能是隨著年齡的逐漸增加,前列腺增生造成梗阻引發(fā)膀胱結(jié)石的形成,女性患者可能與免疫器官功能的衰退引起的尿路感染和慢性疾病有關(guān)。
總而言之,隨著人們生活生平的不斷改善,應(yīng)適當(dāng)調(diào)整飲食,通過健康飲食來達(dá)到預(yù)防膀胱結(jié)石的目的,把膀胱結(jié)石的危害性降到最低。
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[關(guān)鍵詞] DNA甲基化;MGMT基因;qPCR;DNA探針;鋸齒狀病變
[中圖分類號] R735.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210(2014)01(b)-0011-06
Expression and significance of MGMT gene methylation status in colorectal serrated lesions
XU Chunwei WANG Luping GE Chang
Department of Pathology, the Military General Hospital of Beijing PLA, Beijing 100700, China
[Abstract] Objective To discuss patients with serrated lesions tissues MGMT gene methylation status and MGMT protein expression and cancer pathways and the role and clinical significance of MGMT gene in different age paragraph methylation level. Methods From 2007 to 2013 in the Military General Hospital of Beijing PLA, 225 cases of serrated lesions [96 cases of hyperplastic polyp (HP), 61 cases of sessile serrated adenoma/polyp (SSA/P) and 68 cases of traditional serrated adenoma (TSA)], 54 cases of tubular adenoma (TA), 69 cases of colorectal cancer (CRC) and 42 cases of normal colorectal mucosa tissues were selected; MGMT gene methylation status of CpG island was detected by qPCR applications Taqman probe (MethyLight) methods, methylation state of amplification target fragment was verified by by sequencing method, at the same time, MGMT protein expression in 116 cases of serrated lesions (including 52 cases of HP, 41 cases of SSA/P, 23 cases of TSA), 20 cases of TA, 24 cases of CRC, 24 cases of normal colorectal mucosa tissue was detected by immunohistochemical method. Results The differences of MGMT gene promoter methylation state and degree of abnormal MGMT protein positive degree in the serrated lesions and the control group were statistically significant (P < 0.05), the negative correlation was found; the positive correlation was found between frequency of MGMT gene promoter methylation and different age paragraph, but the difference was not statistically significant (P > 0.05). Conclusion Organization MGMT gene methylation may induce the protein expression in the main reason for the downgrade, it plays an important role in serrated canceration pathway of hyperplastic polyps-serrated adenoma-carcinoma.
[Key words] DNA methylation; MGMT gene; qPCR; DNA probe; Serrated lesions
鋸齒狀病變是一組具有鋸齒狀(波浪狀或星狀)結(jié)構(gòu)的異質(zhì)性上皮病變,包括增生肉(hyperplastic polyp,HP)、廣基(無蒂)鋸齒狀腺瘤/息肉(sessile serrated adenoma/polyp,SSA/P)、傳統(tǒng)型鋸齒狀腺瘤(traditional serrated adenoma,TSA)。新近統(tǒng)計發(fā)現(xiàn),結(jié)直腸癌(colorectal cancer,CRC)中60%的來自普通腺瘤,35%來自“增生肉-鋸齒狀腺瘤-癌”這條鋸齒狀通路[1],特別是鋸齒狀病變的CpG島甲基化表型(CpG island methylator phenotyp,CIMP)。鋸齒狀通路涉及一系列異常的表觀遺傳學(xué)修飾[2]。這些異常修飾中以DNA甲基化最常見。DNA異常甲基化分為A型和C型,前者與年齡因素有關(guān),年齡越大,甲基化頻率越高,后者與腫瘤相關(guān),通過引起相關(guān)基因表達(dá)下調(diào)或沉默,促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展[3]。
MGMT為DNA損傷修復(fù)基因,定位于人類染色體10q26,全長170 kb,由5個外顯子,4個內(nèi)含子組成。啟動子富含GC堿基,順式作用元件有CpG島中的6個Spl位點(diǎn)、2個糖皮質(zhì)激素反應(yīng)元件(GRE),AP-I元件等。cDNA長約769 bp,編碼207個氨基酸組成的蛋白質(zhì)。MGMT序列具有相對穩(wěn)定性,從結(jié)腸桿菌到哺乳動物均含有結(jié)構(gòu)一致的“-異亮氨酸-脯氨酸-半胱氨酸-組氨酸-精氨酸-纈氨酸-”(IPCHRV)活性基序列,活性位點(diǎn)在145位半胱氨酸殘基上[4]。本研究通過MethyLight方法,一方面分析鋸齒狀病變中MGMT基因啟動子區(qū)CpG島甲基化狀態(tài)和免疫組化中MGMT蛋白的表達(dá)情況,在基因?qū)用婧偷鞍讓用鎸GMT進(jìn)行初步探究,另一方面分析鋸齒狀病變中MGMT基因啟動子區(qū)CpG島甲基化狀態(tài)和年齡相關(guān)因素情況,在甲基化和年齡上對MGMT進(jìn)行初步探究。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 標(biāo)本 收集總醫(yī)院2007~2013年病理診斷為各類結(jié)直腸息肉和腺瘤切片4810例,從中篩選出腺體具有鋸齒狀特征的息肉及腺瘤,進(jìn)行組織學(xué)診斷及分類。由3名病理醫(yī)師按WHO(2010)消化系統(tǒng)腫瘤分類及文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)[5-9]4~5輪回顧性閱片。從中篩選出225例鋸齒狀病變(96例HP、61例SSA/P和68例TSA)作為實(shí)驗(yàn)組,并以54例管狀腺瘤(tubular adenoma,TA)、42例正常結(jié)直腸黏膜組織和69例CRC作為對照。
1.1.2 主要試劑和儀器 DNA提取試劑盒購自德國QIAGEN公司,甲基化修飾試劑盒為美國ZYMO公司產(chǎn)品,核酸蛋白質(zhì)濃度測量儀B-500購自上海創(chuàng)萌生物科技有限公司,甲基化陽性/陰性對照為美國ZYMO公司產(chǎn)品,qPCR反應(yīng)試劑ROX購自TaKaRa公司,Mix購自上海輝睿生物科技有限公司,MGMT抗體購自中杉金橋公司(1∶500稀釋),內(nèi)參基因β-肌動蛋白(β-actin)引物和探針參照文獻(xiàn)[10]設(shè)計,甲基化引物和探針由上海輝睿生物科技有限公司合成。Mx3000P定量PCR擴(kuò)增儀為美國Stratagene公司產(chǎn)品。
1.2方法
1.2.1 甲基化引物和探針設(shè)計 MGMT基因序列參照GenBank(http://ncbi.nlm.nih.gov),GenBank Accession:NC_000010。甲基化引物和探針由Beacon Designer7.9軟件設(shè)計,設(shè)計標(biāo)準(zhǔn):引物擴(kuò)增片段大小在80~150 bp范圍,引物長度17~25 bp,GC含量在40%~70%,兩條引物的Tm值盡量接近。避免引物內(nèi)部或之間形成3 bp以上的互補(bǔ)序列。探針長度20~30 bp,探針的Tm值比引物高5~10℃,探針內(nèi)標(biāo)或探針與引物之間避免形成3 bp以上的互補(bǔ)序列,對其進(jìn)行BLAST檢查,引物和探針符合要求,并由上海輝睿生物科技有限公司合成。見表1。
1.2.2 DNA提取 采用QIAamp DNA FFPE Tissue Kit試劑盒提取組織DNA,將含有DNA組織的蠟塊連切5張10 μm的厚蠟?zāi)?,?yán)格按照試劑盒說明步驟進(jìn)行操作。并測定其純度和濃度備用。
1.2.3 甲基化修飾 采用EZ DNA Methylation-GoldTM Kit(D5005)試劑盒,嚴(yán)格按照試劑盒說明步驟進(jìn)行操作。經(jīng)此步后,DNA序列中未甲基化的胞嘧啶(C)轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏ぃ║)。
1.2.4 MethyLight PCR反應(yīng)體系(20 μL):2×Taq PCR Master Mix 10 μL;修飾后的DNA模板2 μL;上、下游引物各1 μL(10 pmol);探針FAM 0.4 μL(10 pmol);ROX 0.3 μL。反應(yīng)條件:94℃預(yù)變性5 min;94℃ 30 s,56℃ 45 s,72℃ 45 s,共50個循環(huán);72℃延伸5 min,4℃冷卻5 min。每例標(biāo)本設(shè)兩個復(fù)孔,經(jīng)亞硫酸氫鹽修飾的Human Methylated & Non-methylated DNA Set作為陽性、陰性對照,水為空白對照。
1.2.5 測序法驗(yàn)證擴(kuò)增序列 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送北京金唯智生物科技有限公司測序,由于擴(kuò)增序列(94 bp)過小,連接到質(zhì)粒作為載體后,用通用引物的方法測序,結(jié)果如圖1所示,測序目的片段和Beacon Designer 7.9軟件設(shè)計序列吻合。
甲基化片段中CpG二核苷酸的胞嘧啶保持不變
圖1 MGMT基因擴(kuò)增片段部分測序圖
1.2.6 免疫組織化學(xué)染色 所有標(biāo)本常規(guī)石蠟包埋,4 μm厚連續(xù)切片,60℃溫箱烘烤90 min。采用EnVision二步法,實(shí)驗(yàn)過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行,高溫高壓抗原修復(fù),DAB顯色,磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗為陰性對照,已知陽性的結(jié)腸腺體組織為陽性對照。
1.2.7 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) MethyLight結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)[11]:同時擴(kuò)增目的基因(MGMT)和內(nèi)參基因(β-actin),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到兩者的原始拷貝數(shù),計算標(biāo)準(zhǔn)甲基化指數(shù)(normalized index of methylation,NIM)其定義為:NIM=[(MGMT sample/MGMT positive)β-actin sample/β-actin positive)]×100,其中MGMT sample指樣本中甲基化MGMT基因的拷貝數(shù),MGMT positive指陽性對照中甲基化MGMT基因的拷貝數(shù),β-actin sample和β-actin positve與上述相同。NIM≥4為甲基化,NIM25%~50%為2分,Ⅲ級>50%~75%為3分,Ⅳ級>75%~100%為4分。染色強(qiáng)度計分:Ⅰ級淡黃色為1分,Ⅱ級棕黃色為2分,Ⅲ級棕褐色為3分。每張切片兩種評分之乘積為該切片最后的表達(dá)強(qiáng)度:0分為(-),1~3分為(+),4~6分為(++),≥7分為(+++)。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
所有數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件,正態(tài)分布計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。甲基化結(jié)果運(yùn)用χ2及Fisher確切概率法,免疫組化結(jié)果使用多組有序秩和檢驗(yàn),兩組間比較運(yùn)用Bonferroni檢驗(yàn),甲基化和蛋白表達(dá)相關(guān)性及甲基化和年齡相關(guān)性運(yùn)用Pearson相關(guān)法進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 臨床資料特征
225例鋸齒狀病變中HP 96例、SSA/P 61例、TSA 68例,分別占鋸齒狀病變的42.67%、27.11%和30.22%,96例HP中,男63例,女33例,男性多見,年齡31~88歲,平均(56.052±12.448)歲;61例SSA/P中,男43例,女18例,男性多見,年齡23~84歲,平均(56.665±14.976)歲;68例TSA中,男46例,女22例,男性多見,年齡30~85歲,平均(59.470±12.506)歲。
2.2 MGMT基因標(biāo)準(zhǔn)曲線分析
將陽性對照按10的倍數(shù)稀釋成1~1×10-6 7個濃度梯度制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(其拷貝數(shù)為103~109/mL),各濃度梯度反應(yīng)均做復(fù)孔。MethyLight的線性范圍為104~108拷貝/mL,R2為0.942。
2.3 MGMT基因啟動子CpG島甲基化狀態(tài)
MGMT基因啟動子CpG島甲基化陽性表達(dá)率在正常組、TA組、HP組、SSA/P組、TSA組和CRC組分別為0.00%(0/42)、46.30%(25/54)、26.04%(25/96)、60.66%(37/61)、76.47%(52/68)和68.12%(47/69),各組差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義(χ2 = 112.790,P = 0.000)。正常組與SSA/P、TSA、TA、CRC組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.05),HP組與SSA/P、TSA、CRC組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.05),其余各組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P > 0.05)。見表2、圖2(見封三)。
表2 MGMT基因CpG島甲基化陽性率統(tǒng)計結(jié)果[n(%)]
注:與正常組比較,P < 0.05;與HP組比較,P < 0.05;HP:增生肉;TA:管狀腺瘤;SSA/P:廣基(無蒂)鋸齒狀腺瘤/息肉;TSA:傳統(tǒng)型鋸齒狀腺瘤;CRC:結(jié)直腸癌
2.4 MGMT蛋白陽性表達(dá)率
MGMT蛋白陽性表達(dá)率在正常組、TA組、HP組、SSA/P組、TSA組和CRC組分別為100.00%(24/24)、80.00%(16/20)、98.08%(51/52)、78.05%(32/41)、69.57%(16/23)和70.83%(17/24),差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義(χ2 = 26.641,P = 0.000)。正常組與HP、SSA/P、TSA、TA、CRC組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.05),HP組與SSA/P組、TSA組、TA組和CRC組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.05),其余各組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P > 0.05)。見表3、圖3。
2.5 MGMT基因甲基化與MGMT蛋白相關(guān)性分析
經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析顯示,TA、SSA/P、TSA、CRC三組中MGMT甲基化與MGMT蛋白表達(dá)結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.05),且相關(guān)性為負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為r = -0.500、-0.361、-0.437、-0.412;HP中MGMT甲基化與MGMT蛋白表達(dá)結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P > 0.05),但相關(guān)性為負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為r = -0.220。見表4。
2.6 MGMT基因甲基化與年齡相關(guān)性分析
經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析顯示,TA、HP、SSA/P、TSA四組中MGMT基因甲基化與年齡差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P > 0.05)。MGMT基因甲基化與年齡相關(guān)性為正相關(guān),與TA、HP、SSA/P、TSA相關(guān)系數(shù)分別為0.042、0.009、0.087、0.138。見表5。
3 討論
CRC是最常見的惡性消化道腫瘤之一,全球CRC每年新發(fā)病例數(shù)達(dá)123萬,死亡約為發(fā)病率的1/2。近年研究表明,CRC發(fā)病率目前仍呈持續(xù)增長態(tài)勢,其原因之一就是對結(jié)直腸鋸齒狀病變認(rèn)識不足[2,13]。2010年WHO消化系統(tǒng)腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)分類中對鋸齒狀病變的分類比以往更為詳細(xì)[9],HP在鋸齒狀病變中最常見,占所有病變的75%以上,根據(jù)組織學(xué)上的微小差別分為微泡性增生肉(microvesicular hyperplastic polyp,MVHP)、富于杯狀細(xì)胞的增生肉(goblet-cell rich hyperplastic polyp,GCHP)、寡黏液型增生肉(mucin-poor type,MPHP)[14]。SSA/P占鋸齒狀病變的15%~25%,根據(jù)細(xì)胞異型性分為伴/不伴有細(xì)胞異性增生型[14-16]。TSA不常見占鋸齒狀病變的1%左右,特征為具有整體復(fù)雜結(jié)構(gòu)域纖維狀生長方式,常顯示細(xì)胞異型特點(diǎn),與TA及伴細(xì)胞異型的SSA不同[14,17]。TSA一般與高M(jìn)SI癌無關(guān),可能與低MSI有關(guān)[6]。近年來從分子遺傳學(xué)角度對鋸齒狀病變進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),結(jié)直腸鋸齒狀病變通路是一個多因素、多階段、多基因連續(xù)累積發(fā)生的過程,在此演變過程中有眾多CRC相關(guān)基因參與。鋸齒狀通路分為:①無蒂(廣基)鋸齒通路:以SSA/P和MVHP為代表,癌變機(jī)制為BRAF突變,引起錯配修復(fù)基因h-MLH-1甲基化和高水平CpG島甲基化現(xiàn)象,導(dǎo)致腺體不同程度異型性增生直至癌變。②傳統(tǒng)鋸齒狀通路:包括TSA和GCHP,癌變機(jī)制為K-RAS基因突變,引起DNA修復(fù)基因MGMT甲基化和低高水平CpG島甲基化現(xiàn)象等。MGMT基因甲基化后,引起一些基因沉默,導(dǎo)致腺體異型性增加,進(jìn)一步發(fā)展為癌。鋸齒狀通路中有眾多異常基因甲基化,若能深入研究并加以利用,不僅可以用于CRC的早期診斷、高危人群的監(jiān)測、癌變風(fēng)險評估等,還可為CRC靶向治療藥物提供理論依據(jù)支持[1,18]。
在本實(shí)驗(yàn)基因?qū)用嫜芯恐邪l(fā)現(xiàn)正常黏膜組織、TA、HP、SSA/P和TSA中均有MGMT基因啟動子CpG島甲基化,實(shí)驗(yàn)組鋸齒狀病變HP、SSA/P和TSA甲基化率為26.04%(25/96)、60.66%(37/61)和76.47%(52/68),對照組正常黏膜組織、TA和CRC的甲基化率為0.00%(0/42)、46.30%(25/54)和68.12%(47/69)。Dhir等[18]在18例TA中檢測到甲基化率為47.1%,29例不伴異型性的SSA/P中檢測到甲基化率為29.63%,19例伴有異型性的SSA/P中檢測到甲基化率為52.63%,在9例HP中檢測到甲基化率為14.29%,本研究中對照組的TA和實(shí)驗(yàn)組的SSA/P的甲基化率與以上研究結(jié)果基本符合,但實(shí)驗(yàn)組HP的甲基化率明顯高于Dhir等[18]研究,這可能與樣本量、樣本來源、引物在CpG島的位置不同等因素引起系統(tǒng)誤差有關(guān)。本研究對照組與實(shí)驗(yàn)組組間比較過程中,對照組正常黏膜組織與實(shí)驗(yàn)組SSA/P(P = 0.000)和TSA(P = 0.000)有顯著性差異,與實(shí)驗(yàn)組HP(P = 0.230)差異性不顯著;對照組CRC與實(shí)驗(yàn)組HP(P = 0.000),與實(shí)驗(yàn)組SSA/P(P = 0.375)和TSA(P = 0.275)差異性不顯著;對照組TA與實(shí)驗(yàn)組HP(P = 0.012)和TSA(P = 0.001)有顯著性差異,與實(shí)驗(yàn)組SSA/P(P = 0.123)差異性不顯著;實(shí)驗(yàn)組組組間比較過程中,HP和SSA/P(P = 0.000),HP和TSA(P = 0.000)組間有顯著性差異, SSA/P和TSA(P = 0.053)組間差異性不顯著。在本實(shí)驗(yàn)蛋白層面運(yùn)用免疫組化方法研究中發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組HP、SSA/P和TSA蛋白表達(dá)陽性率為98.08%(51/52)、78.05%(32/41)和69.57%(16/23),對照組正常黏膜組織、TA和CRC中蛋白表達(dá)陽性率為100%(24/24)、80.00%(16/20)和70.83%(17/24)。與Sawyer等[19]對39例SA運(yùn)用免疫組化方法發(fā)現(xiàn)MGMT陽性表達(dá)率為18%(7/39)相比,在本實(shí)驗(yàn)中,SSA/P蛋白陽性表達(dá)率[78.05%(32/41)]和TSA蛋白陽性表達(dá)率[69.57%(16/23)]明顯高于Sawyer等[9]研究,具體原因可能與甲基化引物設(shè)計、樣本來源、樣本量大小等因素有關(guān)。本研究對照組與實(shí)驗(yàn)組組間比較過程中,對照組正常黏膜組織與實(shí)驗(yàn)組HP(P = 0.001)、SSA/P(P = 0.000)和TSA(P = 0.000)有顯著性差異;對照組CRC與實(shí)驗(yàn)組HP(P = 0.001)有顯著性差異,但SSA/P(P = 0.515)和TSA(P = 1.000)差異性不顯著;對照組TA與實(shí)驗(yàn)組HP(P = 0.029)有顯著性差異,但與實(shí)驗(yàn)組SSA/P(P = 1.000)和TSA(P = 0.434)差異性均不顯著;實(shí)驗(yàn)組與實(shí)驗(yàn)組組間比較過程中,HP和TSA(P = 0.001),HP和SSA/P(P = 0.006)中組間有顯著性差異,但在SSA/P和TSA(P = 0.452)中組間差異性均不顯著。在本實(shí)驗(yàn)MGMT基因甲基化與蛋白表達(dá)相關(guān)性研究中,發(fā)現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)組HP、SSA/P和TSA中分別呈弱相關(guān)(P = 0.117,r = -0.220)、弱相關(guān)(P = 0.020,r = -0.361)及中等程度相關(guān)(P = 0.037,r = -0.437),對照組正常黏膜組織、TA和CRC中,正常黏膜組織運(yùn)用Pearson法無法計算相關(guān)性,TA中呈中等程度相關(guān)(P = 0.025,r = -0.500),CRC中呈中等程度相關(guān)(P = 0.046,r = -0.412)。通過數(shù)據(jù)可以看出,在實(shí)驗(yàn)組中HP、SSA/P和TSA基因甲基化和蛋白表達(dá)有顯著性差異,相關(guān)性分別為弱相關(guān)、弱相關(guān)和中等程度相關(guān);在對照組中TA和CRC基因甲基化和蛋白表達(dá)有顯著性差異,相關(guān)性都為中等程度相關(guān)。通過基因?qū)用婧偷鞍讓用婕皟烧呦嚓P(guān)性的探究,推測在鋸齒狀病變通路中MGMT基因啟動子甲基化有誘導(dǎo)MGMT蛋白表達(dá)下調(diào),在鋸齒狀通路的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。在年齡相關(guān)性甲基化研究方面,在基因目的序列(-107~-200)這部分的位點(diǎn)上實(shí)驗(yàn)組HP(P = 0.931,r = 0.009)、SSA/P(P = 0.763,r = 0.042)和TSA(P = 0.263,r = 0.138)及對照組TA(P = 0.763,r = 0.042)中差異性均不顯著(P > 0.05),且相關(guān)性為弱正相關(guān)。
綜上所述,MGMT基因啟動子CpG島甲基化可能導(dǎo)致MGMT蛋白表達(dá)下調(diào),與鋸齒狀病變的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),在無蒂(廣基)鋸齒通路和傳統(tǒng)鋸齒狀通路中起重要推動作用,是CRC發(fā)生重要的分子事件。
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