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科學技術在中藥藥理學藥性研究的應用

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科學技術在中藥藥理學藥性研究的應用

一、蛋白質組學在中藥“中藥藥性”本質研究中的應用

蛋白質組學主要采用雙向凝膠電泳(2DE)、雙向熒光差異凝膠電泳(DIGE)、質譜(MS)及蛋白芯片等方法對蛋白的表達、分布、相互作用等進行全面的、整體的研究,現(xiàn)階段,蛋白質組學的研究越來越受到國內外的關注,因為人體的各種代謝和調控途徑主要由蛋白質執(zhí)行,我們只有不斷篩選和鑒定樣本中的蛋白,才能進一步探明疾病的發(fā)生,監(jiān)控疾病的進程和每個階段相應的蛋白表達水平的關聯(lián)性及規(guī)律性,為尋找藥物的作用靶點、作用模式、功效,毒理研究和篩選疾病的標志性蛋白奠定理論基礎,使我們對人類生命本質的認識和疾病的發(fā)生發(fā)展機制提升到一個更高的層次。iTRAQ(isobarictagforrelativeandabsolutequantitation)技術的出現(xiàn)彌補了2DE費時、費力和重復性差等缺點,為中藥“藥性”本質的系統(tǒng)闡釋提供了更新、更準確的方法[1]。2009年,彭淑紅[2]等采用苦參、梔子、黃柏、黃芩、黃連和龍膽草的水提取物灌胃給藥30天,測定、骨骼肌糖原含量和骨骼肌解偶聯(lián)蛋白3(UCP3)的mRNA表達水平,寒性中藥可能通過影響能量代謝相關指標(Na+-K+-ATP、Ca2+-ATP、SDH)的活性減少ATP的消耗及UCP3mRNA的表達,起到調節(jié)骨骼肌能量代謝的作用。

二、代謝組學在中藥“中藥藥性”本質研究中的應用

代謝組學(metabolomics)來源于代謝譜分析。代謝組學可以全面定量地闡釋內源性代謝物,也可以揭示內因和外因的變化規(guī)律,也就是說代謝組學能從靜態(tài)、動態(tài)和整體等多個角度分析和評價中藥藥性理論,從內源性代謝網絡變化角度詮釋中藥藥性的關聯(lián)性。從體內直接作用物質及其代謝規(guī)律層面詮釋藥性理論,豐富了中藥藥性理論的內容,表征了寒涼和溫熱中藥藥性的異同,并在代謝組學上全面地闡明了中藥藥性理論的科學內涵,為藥性理論的研究創(chuàng)建了一個新的方法學平臺。2013年,汪娜[3]等人采用黃芩水提物干預熱證大鼠,應用代謝組學、UPLC/ESI-TOF-MS法、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘-判別分析(OPLS-DA)法等技術,確定了30個熱證特異性生物標志物,揭示了黃芩干預熱病證候的作用及其苦寒性效關系。

三、基因組學在中藥“中藥藥性”本質研究中的應用

基因組學是研究生物體內全部基因的組成、詮釋基因功能的學科,具有全面、系統(tǒng)的特點,其影響已經深入生命科學的各個方面[4],包括結構基因組測序和基因功能鑒定,能建立自己的數(shù)據(jù)庫,通過系統(tǒng)整合分析,篩選出相關的基因信息。目前,基因組學研究快速發(fā)展,其基本理論和技術都在不斷改進和完善,逐漸趨于成熟階段,因此,國內外研究者認識到基因組學對各個領域的重要性,極大地開展基因組學研究,同時也推動了藥性科學進入基因領域。2006年,吳斌[5]等人采用麻辛附子湯結合金匱腎氣丸加減治療虛寒證兄妹45d,獲得276條差異表達基因,涉及18條通路。溫熱藥可以影響代謝基因的表達,溫熱藥可能是通過影響基因網絡發(fā)揮其功效。

四、轉錄組學在中藥“中藥藥性”本質研究中的應用

轉錄組學主要內容是測序技術,指在樣本中測定出全部轉錄本的RNA序列。轉錄組學與中醫(yī)藥具有相似性,都是從整體詮釋問題。中藥轉錄組學的研究推動了中醫(yī)藥發(fā)展,在中藥研究領域中,研究者主要是建立藥物作用前后的基因表達譜,通過對比藥物前后基因表達譜的變化,對中藥進行全面的評價。2008年,陳士林等人[6]建立了四年生西洋參根的EST文庫。通過GeneOntology與BLAST分析獲得基因序列11個,這些基因的發(fā)現(xiàn)為進一步研究基因功能、克隆基因全長、闡明西洋參生長緩慢、改良西洋參品質的分子機制等方面奠定了物質基礎。

五、總結

在中藥藥理理論及現(xiàn)代研究這一章,整個教學過程中加入現(xiàn)代科學技術與方法,通過同學們分組查找相關文獻,進行整合處理。整個過程中,教師只作為指導,通過梳理讓學生進一步明白在系統(tǒng)生物學這個平臺上,主要從蛋白質、基因和代謝等方面全面、系統(tǒng)地進行整合。而這種全面的整合和中藥藥性理論有很大的相似性,讓同學們感受現(xiàn)在的科學技術與方法對傳統(tǒng)理論的驗證。清楚中藥藥性理論體系框架,為傳統(tǒng)理論的研究提供新思想。通過這次整理文獻,讓同學們對中藥藥性現(xiàn)代研究有了一定的了解。學生參與的積極性較高,為后面的科研工作奠定基礎。擴展了學生的知識面,讓學生充分認識傳統(tǒng)醫(yī)學和現(xiàn)代醫(yī)學可以通過先進的科學技術與方法予以評價。

參考文獻:

[2]彭淑紅,黃麗萍,高小恒,等.寒性中藥對大鼠骨骼肌能量代謝相關因子的影響[J].中國中藥雜志,2009,34(23):3064-3066.

[3]汪娜,柳長鳳,劉樹民,等.基于代謝組學研究黃芩對干酵母熱證模型的影響及苦寒性效關系[J].中草藥,2013,44(18):2556-2562.

作者:楊欣 李亞輝 李專 鄧穎 楊光勇 全睿 王慧 單位:貴州中醫(yī)藥大學

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