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公務(wù)員期刊網(wǎng) 精選范文 醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法范文

醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法精選(九篇)

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醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法

第1篇:醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法范文

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎; 血清標(biāo)志物; 檢測(cè); 評(píng)價(jià)

當(dāng)前我國(guó)乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的攜帶率約為10%左右,臨床上用于乙型肝炎病毒血清免疫學(xué)標(biāo)志物(HBV-M)檢測(cè)的方法很多,國(guó)內(nèi)傳統(tǒng)檢測(cè)手段主要使用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),近年來(lái)諸如時(shí)間分辨熒光分析法(TRFIA)、微粒子酶免疫分析法(MEIA)以及電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)等新式檢測(cè)手段也逐漸應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中。本次試驗(yàn)選用ELISA、TRFIA和ECLIA三種方法對(duì)乙型肝炎血清標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè),旨在對(duì)不同方法學(xué)檢測(cè)結(jié)果之間的一致性進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取筆者所在醫(yī)院經(jīng)羅氏ECLIA檢測(cè)證實(shí)的100例乙型肝炎病毒(HBV)感染者的血清,患者均符合慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[1],其中男65例,女35例;年齡16~50歲;另選取50例健康體檢者的血清。

1.2 方法

1.2.1 儀器試劑 ELISA檢測(cè)選用ALISEI全自動(dòng)酶標(biāo)儀(意大利)以及科華生物試劑盒(上海);TRFIA檢測(cè)選用WALLAC DELFIA-1235時(shí)間分辨免疫熒光分析儀(芬蘭)和新波生物試劑盒(上海);ECLIA檢測(cè)選用羅氏E601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(德國(guó))及其標(biāo)準(zhǔn)配置試劑。

1.2.2 檢測(cè)方法 檢測(cè)操作均按照儀器操作說(shuō)明書(shū)以及試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。本組待檢血清樣本均用3種方法進(jìn)行檢測(cè),每次檢測(cè)時(shí)均帶陰、陽(yáng)性質(zhì)控(質(zhì)控來(lái)源為上海市臨床檢驗(yàn)中心以及羅氏公司)。檢測(cè)結(jié)果的判定以試劑說(shuō)明書(shū)中規(guī)定的Cut-off值作為標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)用夾心法檢測(cè)時(shí),結(jié)果大于Cut-off值為陽(yáng)性;應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)時(shí),結(jié)果小于Cut-off值為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 不同檢測(cè)方法結(jié)果的一致性采用Kappa檢驗(yàn),一致性的強(qiáng)弱程度按照Landis以及Koch參照Kappa系數(shù)的大小進(jìn)行判斷,共分為6個(gè)區(qū)段,Kappa系數(shù)小于0時(shí)為極差;0~0.2為微弱;0.21~0.4為弱,0.41~0.6為中度;0.61~0.8為高度;0.81~1.0為極強(qiáng)[2];抽樣誤差的排除應(yīng)用μ檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 使用ELISA法與ECLIA法檢測(cè)乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果比較 見(jiàn)表1。

2.2 使用TRFIA法與ECLIA法檢測(cè)乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果比較 見(jiàn)表2。

3 討論

當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室對(duì)乙型肝炎血清標(biāo)志物的檢測(cè)方法中,ELISA法適用于定性檢測(cè),TRFIA、ECLIA等適用于定量檢測(cè),由于不同實(shí)驗(yàn)室在應(yīng)用這些方法時(shí)的溯源性以及采用的單位各不相同,因此結(jié)果相差較大,給患者的就診以及臨床醫(yī)生對(duì)報(bào)告結(jié)果的正確解讀造成了不便,基于此,不同方法學(xué)檢測(cè)結(jié)果之間的相關(guān)性評(píng)價(jià)就顯得十分必要。本次研究所選用的3種檢測(cè)方法中,ECLIA法是當(dāng)前特異性和敏感性最好的檢測(cè)方法,故將其檢測(cè)結(jié)果與其他方法進(jìn)行比較,以評(píng)價(jià)不同方法學(xué)檢測(cè)結(jié)果之間的一致性。

根據(jù)本次研究結(jié)果顯示,ELISA法和ECLIA法在HBeAg項(xiàng)目上顯示極強(qiáng)一致性,剩余4項(xiàng)均為高度一致性,顯示ELISA法在臨床應(yīng)用中檢測(cè)率良好[3],但HBsAg項(xiàng)目上有8例漏診,提示該法在敏感性方面尚有不足,在血站以及手術(shù)等對(duì)結(jié)果極為敏感的情況下不適合應(yīng)用此法,但是ELISA法試劑成本較低,因此適用于普通人群篩查或者經(jīng)濟(jì)狀況較差的患者。TRFIA法與ECLIA法檢測(cè)結(jié)果在HBsAg、HBeAg、抗HBe以及抗HBc這4個(gè)項(xiàng)目上具有極強(qiáng)的一致性,在抗HBs項(xiàng)目上具有高度一致性,這一結(jié)果亦與國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)[4]報(bào)道基本一致。

綜上所述,酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、時(shí)間分辨熒光分析法(TRFIA)以及電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)三種方法在乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測(cè)方面一致性較高,有利于實(shí)驗(yàn)室之間進(jìn)行結(jié)果互認(rèn)。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲(chóng)病學(xué)分會(huì)、肝病學(xué)分會(huì).病毒性肝炎防治方案.中華肝臟病雜志,2010,(8):324-329.

[2] 夏邦世.時(shí)間分辨免疫熒光技術(shù)檢測(cè)HBV血清標(biāo)志物臨床應(yīng)用評(píng)價(jià).臨床醫(yī)學(xué),2006,33(3):6-7.

[3] 周迎春,陳輝,關(guān)平,等.3種方法測(cè)定低濃度乙型肝炎病毒表面抗原效果評(píng)價(jià).檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2007,4(11):1070-1071.

[4] 陳佑明,黃敬,熊符,等.時(shí)間分辨熒光免疫分析法和免疫放射分析法檢測(cè)HBsAg的對(duì)比分析.標(biāo)記免疫分析與臨床,2006,13(1):50-51.

(收稿日期:2011-05-23)

……………………………………………………………

表1 ELISA法與ECLIA法檢測(cè)乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果比較

注:所有項(xiàng)目P

第2篇:醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法范文

【關(guān)鍵詞】乙型肝炎 血清標(biāo)志物 評(píng)價(jià)分析

中圖分類(lèi)號(hào):R446.6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B 文章編號(hào):1005-0515(2011)7-444-02

乙型肝炎( 乙肝)是在感染了乙肝病毒(HBV)后,所引起的危害較為嚴(yán)重的病毒性肝炎。據(jù)調(diào)查顯示,在我國(guó)人群中,有60%的人感染過(guò)乙型肝炎病毒,其中10%為乙型肝炎表面抗原(HbsAg)攜帶者,每年乙型肝炎的新發(fā)病人數(shù)約有50萬(wàn),不僅嚴(yán)重影響了人們的健康,而且給社會(huì)、家庭造成經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。測(cè)定乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物已經(jīng)在國(guó)內(nèi)廣泛開(kāi)展,它不僅在檢測(cè)穩(wěn)定性和靈敏度大大提高,給臨床上的診斷帶來(lái)好處。近年來(lái),時(shí)間分辨免疫熒光法( TRFI A )、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) ( ELISA)、電化學(xué)發(fā)光法 ( ECLI A)和化學(xué)發(fā)光法( CL I A )等新方法也在逐漸地被臨床實(shí)驗(yàn)室接受。為了解不同方法學(xué)檢測(cè)結(jié)果之間的一致性,我們使用上述4 種方法來(lái)進(jìn)行檢測(cè), 并對(duì)其一致性程度進(jìn)行了評(píng)價(jià)分析。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:選取經(jīng)羅氏 ECLIA證實(shí)的 98例乙型肝炎病毒( HBV)感染者及 46例體檢者的血清,其中男性89人,女性55人。時(shí)間分辨免疫熒光法檢測(cè)使用了芬蘭的w allacDELFI A-1235分析儀及上海新波的生物試劑盒;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)使用了意大利的 ALI SE I全自動(dòng)酶標(biāo)儀及上??迫A的生物試劑盒;電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)使用了德國(guó)羅氏E601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及與其配套的試劑;化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)使用意大利的L I ASON化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及與其配套的試劑。

1.2 檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)操作按試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,全自動(dòng)儀器的操作按廠家說(shuō)明書(shū)和科室儀器標(biāo)準(zhǔn)操作程序的規(guī)定進(jìn)行檢測(cè)。將所有樣本分別用4種方法進(jìn)行檢測(cè)血清標(biāo)志物,即乙肝表面抗原 ( HBsAg )、乙肝表面抗體 (抗 HBs)、 乙肝e抗原 ( HBeAg)、 乙肝e抗體 (抗 H Be)、 乙肝核心抗體 (抗 HBc)的檢測(cè)。每次檢測(cè),均帶有陰、陽(yáng)性質(zhì)控。

1.3 檢測(cè)結(jié)果的判斷:以廠家的試劑說(shuō)明書(shū)所規(guī)定的Cut-off值來(lái)作為判斷的標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)用夾心法,檢測(cè)結(jié)果 > Cut-off值,為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用K appa檢驗(yàn),判斷不同的檢測(cè)方法結(jié)果是否有一致性,并進(jìn)行u檢驗(yàn)以排除抽樣誤差帶來(lái)的影響。而一致性的強(qiáng)弱程度按Koch和Landis以K appa系數(shù)的大小劃分為6個(gè)區(qū)段的方法進(jìn)行判斷:Kappa系數(shù)<0 為極差; 0~ 0.2 為微弱; 0.21~0.4 為弱; 0. 41~0.6為中度; 0.61~0. 8 為高度; 0.81~1.0 為極強(qiáng)。

2 結(jié)果

2.1 ELISA與 ECLIA方法檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物的結(jié)果比較見(jiàn)表 1。

表 1

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,在所有項(xiàng)目中, P < 0. 05, 此2種方法有一致性。

2.2 TRFIA與 ECLIA方法檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物的結(jié)果比較見(jiàn)表 2。

表 2

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,在所有項(xiàng)目中, P < 0. 05,此2種方法有一致性。

2.3 CLIA 與 ECLIA 方法檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物的結(jié)果比較見(jiàn)表 3

表 3

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,在所有項(xiàng)目中,P < 0. 05,此2種方法有一致性。

3 結(jié)論

采用不同的檢測(cè)方法,對(duì)乙型肝炎疑似患者進(jìn)行乙肝血清標(biāo)志物(HbsAg、抗-HBs 、HbeAg、抗-Hbe和抗-HBc)檢測(cè),并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,為有效地預(yù)防控制乙型肝炎提供了科學(xué)的依據(jù)。

4 討論

乙型肝炎病毒血清學(xué)標(biāo)志物的變化是評(píng)估乙型肝炎病毒感染后的病情轉(zhuǎn)歸重要依據(jù), 也是抗考核病毒治療療效的指標(biāo)之一[1]。據(jù)報(bào)道,在部分H BsAg 和抗- H Be 陽(yáng)性的慢性活動(dòng)性肝炎、肝癌和肝硬化患者中,抗- HBe陽(yáng)性不能說(shuō)明病毒復(fù)制程度已經(jīng)減低,也不代表復(fù)制的停止,病變?nèi)匀挥锌赡馨l(fā)展。[2]

檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物的多種方法中,既有定性的金標(biāo)法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),又有定量的時(shí)間分辨免疫熒光法、化學(xué)發(fā)光法、電化學(xué)發(fā)光法等。這些方法由于所采用的單位和溯源性不同,其結(jié)果差異極大,給臨床醫(yī)生與患者正確解讀檢測(cè)報(bào)告和將檢測(cè)結(jié)果用于診療帶來(lái)了很大困難。在醫(yī)療改革的背景下,檢驗(yàn)也正面臨著實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的互認(rèn)問(wèn)題,對(duì)不同的方法學(xué)所檢測(cè)出來(lái)的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性評(píng)價(jià),這是結(jié)果互認(rèn)的前提。對(duì)定量項(xiàng)目的方法學(xué)比對(duì),通常采用回歸性分析,對(duì)定性項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果,應(yīng)用K appa檢驗(yàn)進(jìn)行判斷不同方法的一致程度[3]。本組所采用了4種常見(jiàn)的檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物方法,其中電化學(xué)發(fā)光法是當(dāng)前特異性和敏感性最好的檢測(cè)方法,作為參考方法,而其他方法學(xué)的結(jié)果和電化學(xué)發(fā)光法的結(jié)果進(jìn)行比對(duì),來(lái)探討不同的方法學(xué)的應(yīng)用價(jià)值。

從結(jié)果上分析,目前采用最廣泛的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和電化學(xué)發(fā)光法在HBeAg項(xiàng)目上表現(xiàn)出極強(qiáng)的一致性,其余的4項(xiàng)表現(xiàn)為高度的一致性,這說(shuō)明了盡管酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在應(yīng)用多年,并且試劑在不斷改進(jìn)后仍然可以滿(mǎn)足目前一般的臨床檢測(cè)需要[4]。但也可以看到,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在敏感性方面還有不足,在判斷結(jié)果的時(shí)候還會(huì)受檢測(cè)的灰區(qū)所影響,使部分結(jié)果誤讀,在血站和手術(shù)等情況不適合使用。但酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)也有很多優(yōu)點(diǎn),即試劑的成本低、收費(fèi)低,有利于降低醫(yī)療上的費(fèi)用,適于普通人群篩查與對(duì)醫(yī)療費(fèi)用要求較為敏感的患者。從結(jié)果上還可以看出,使用時(shí)間分辨免疫熒光法與電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)結(jié)果在HbeAg、HBs Ag、抗 HB c、抗 Hbe這 4項(xiàng)上有極強(qiáng)的一致性,在抗HBs上有高度的一致性,和文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[5]。但在檢測(cè)正常人的HBs A g時(shí),出現(xiàn)4例不一致,這反映出方法學(xué)的特異性差異。由于時(shí)間分辨免疫熒光法試劑已實(shí)現(xiàn)國(guó)產(chǎn)化,所以在缺少全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀和需要定量檢測(cè)結(jié)果時(shí),可以使用此方法代替應(yīng)用進(jìn)口試劑和儀器的化學(xué)發(fā)光法。

本組研究結(jié)果顯示,電化學(xué)發(fā)光法和化學(xué)發(fā)光法的檢測(cè)結(jié)果在HBs Ag、HbeAg、抗 Hbe、抗 HB s 這4項(xiàng)上有極強(qiáng)的一致性,在抗HBc上有高度的一致性。由于此2種方法目前均應(yīng)用進(jìn)口試劑,這些試劑常常溯源至國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),具有可比性,而無(wú)法溯源的項(xiàng)目 (例如抗 HBc),一致性的程度稍差。因此,這2種方法學(xué)在臨床上的常規(guī)檢測(cè)中沒(méi)有大的差異, 其差異主要表現(xiàn)為檢測(cè)病毒變異的能力。對(duì)已經(jīng)具備全自動(dòng)化發(fā)光檢測(cè)儀的實(shí)驗(yàn)室,使用此方法操作簡(jiǎn)便,可以獲得較好的精密度和檢測(cè)敏感性與特異性,不足之處在于儀器、試劑的成本昂貴,適于已經(jīng)明確診斷的患者進(jìn)行治療后療效判斷或者在其他的方法學(xué)不能確定結(jié)果時(shí)檢測(cè)。而對(duì)溯源一致的項(xiàng)目,則可以通過(guò)回歸分析定量結(jié)果來(lái)評(píng)價(jià)其一致性的程度,而對(duì)處在病毒復(fù)制期和可能發(fā)生變異的患者,還應(yīng)與HBV DNA與YMDD基因檢測(cè),進(jìn)行相關(guān)性分析,便于明確方法學(xué)檢測(cè)的臨床價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]衛(wèi)國(guó),王福生,陳菊梅.病毒載體動(dòng)態(tài)檢測(cè)在乙型肝炎治療和研究的意義.中華肝臟病雜志, 2003,11 ( 1) :54-56;

[2] 于愛(ài)英,乙肝血清標(biāo)志物“兩對(duì)半”310例獻(xiàn)血者檢測(cè)結(jié)果分析[J] . 中國(guó)煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志1007- 9564( 2009) 05- 0792- 01;

[3]夏邦世. 時(shí)間分辨免疫熒光技術(shù)檢測(cè)HBV血清標(biāo)志物臨床應(yīng)用評(píng)價(jià) [J]. 臨床醫(yī)學(xué), 2006,33( 3): 6 -7 ;

第3篇:醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法范文

【關(guān)鍵詞】酶聯(lián)免疫法;放射免疫法;乙肝表面抗體效價(jià) 文章編號(hào):1004-7484(2013)-12-7477-02

酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法,簡(jiǎn)稱(chēng)酶聯(lián)免疫法,或者ELISA法。它的中心就是讓抗體與酶復(fù)合物結(jié)合,然后通過(guò)顯色來(lái)檢測(cè)[1]。放射免疫法是利用同位素標(biāo)記的與未標(biāo)記的抗原,同抗體發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng)的方法,研究機(jī)體對(duì)抗原物質(zhì)反應(yīng)的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)化規(guī)律[2]。本文分析了采用酶聯(lián)免疫法和放射免疫法對(duì)人體血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價(jià)進(jìn)行檢測(cè)的效果。以下是我的報(bào)道:

1材料與方法

1.1樣品材料研究對(duì)象為來(lái)自國(guó)家臨檢中心乙肝表面抗體質(zhì)控品2份,來(lái)自中國(guó)生物制品檢定所提供的線性參比品的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品3份。

1.2儀器和試劑盒抗-HBs免疫球蛋白國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品,標(biāo)示濃度值為2.5lU/支(批號(hào)20041001)。北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)有限公司表面抗體酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)試劑盒(批號(hào)R20110503),線性范圍和正常參考范圍分別為10-300mlU/ml,0-10mlU/ml。放免r測(cè)量?jī)x(上海原子核研究所四環(huán)儀器廠生產(chǎn)),放射免疫法試劑盒(北京北方生物技術(shù)研究所提供),表面抗體放射免疫定量檢測(cè)試劑盒(批號(hào):110620),線性范圍和正常參考范圍分別為0-1000mlU/ml、0-10mlU/ml。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法選取SPSS13.0軟件,對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料采用t檢驗(yàn)。差異明顯具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

2結(jié)果

對(duì)于中國(guó)生物制品檢定所提供的3份參比品、國(guó)家臨檢中心2份質(zhì)控品乙肝表面抗體效價(jià)的檢測(cè),分別采用放射免疫法、酶聯(lián)免疫法的檢測(cè)效果無(wú)明顯差異,P>0.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,樣本濃度值相關(guān)性良好,相關(guān)系數(shù)r均大于0.95;對(duì)于1-400號(hào)高抗血漿、401-800號(hào)低抗血漿、801-1000號(hào)普通血漿乙肝表面抗體效價(jià)的檢測(cè),分別采用放射免疫法、酶聯(lián)免疫法的檢測(cè)效果無(wú)明顯差異,P>0.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,樣本濃度值相關(guān)性良好,相關(guān)系數(shù)r均大于0.95。

3討論

采用放射免疫法對(duì)人體血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價(jià)進(jìn)行檢測(cè),不但費(fèi)時(shí)、復(fù)雜,而且一次無(wú)法進(jìn)行大量樣品檢測(cè)。酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法,簡(jiǎn)稱(chēng)酶聯(lián)免疫法,或者ELISA法[3]。本文研究了酶聯(lián)免疫法對(duì)乙型肝炎病毒表面抗體效價(jià)的檢測(cè),其基本原理是使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性[4]。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi),最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺來(lái)進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體②酶標(biāo)記的抗原或抗體③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類(lèi)型的檢測(cè)方法。采用酶聯(lián)免疫法不但檢驗(yàn)成本低、操作簡(jiǎn)單快捷,而且特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高。

參考文獻(xiàn)

[1]許麗楓,張效林.酶聯(lián)免疫法和膠體金法對(duì)乙肝病毒表面抗原檢測(cè)的對(duì)比分析[J].疑難病雜志,2010,04:257.

[2]胡曉.乳膠層析法與酶聯(lián)免疫法測(cè)定乙肝病毒標(biāo)志物的相關(guān)性分析[J].浙江預(yù)防醫(yī)學(xué),2010,05:92-93.

第4篇:醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法范文

關(guān)鍵詞:多巴胺;化學(xué)修飾電極;綜述;電化學(xué)

前言:目前,測(cè)定DA的方法有很多種常見(jiàn)的有分光光度法儀、色譜法、熒光光度法和化學(xué)發(fā)光法等。由于多巴胺分子中含有兩個(gè)酚羥基,酚羥基易被氧化,在電極上更容易發(fā)生化學(xué)反應(yīng),所以,在過(guò)去的幾十年中,越來(lái)越多的人對(duì)它的各種電化學(xué)檢測(cè)方法產(chǎn)生了興趣并進(jìn)行了大量的研究。電化學(xué)檢測(cè)法主要是研究電與化學(xué)反應(yīng)的關(guān)系,目前,電化學(xué)的很多方法早已應(yīng)用到了電化學(xué)修飾電極(CMEs)中了。

1.簡(jiǎn)介

1.1化學(xué)修飾電極:chemically modified electrode?;瘜W(xué)修飾電極是20世紀(jì)70年代中期發(fā)展起來(lái)的一門(mén)新興的、也是目前最活躍的電化學(xué)和電分析化學(xué)的前沿領(lǐng)域?;瘜W(xué)修飾電極是通過(guò)化學(xué)修飾的方法在電極表面進(jìn)行分子設(shè)計(jì),將具有優(yōu)良化學(xué)性質(zhì)的分子、離子、聚合物固定在電極表面,造成某種微結(jié)構(gòu),賦予電極某種特定的化學(xué)和電化學(xué)性質(zhì),以便高選擇性的進(jìn)行所期望的反應(yīng),在提高選擇性和靈敏度方面具有獨(dú)特的優(yōu)越性。利用電化學(xué)表征化學(xué)修飾電極主要是通過(guò)測(cè)試電極的表面在被修飾的前后的電化學(xué)反應(yīng)時(shí)電流、電量、電極電位或電解時(shí)間等參數(shù)來(lái)定性或定量地表征化學(xué)修飾電極的電極過(guò)程與性能。

玻碳電極

1.2玻璃碳:簡(jiǎn)稱(chēng)玻碳,是將聚丙烯腈樹(shù)脂或酚醛樹(shù)脂等在惰性氣氛中緩慢加熱至高溫(達(dá)1800℃)處理成外形似玻璃狀的非晶形碳,適于作電極的電子導(dǎo)體材料。玻璃碳電極的優(yōu)點(diǎn)是導(dǎo)電性好,化學(xué)穩(wěn)定性高,熱脹系數(shù)小,質(zhì)地堅(jiān)硬,氣密性好,電勢(shì)適用范圍寬(約從-1~1V,相對(duì)于飽和甘汞電極),可制成圓柱、圓盤(pán)等電極形狀,用它作基體還可制成汞膜玻碳電極和化學(xué)修飾電極等。在電化學(xué)實(shí)驗(yàn)或電分析化學(xué)中得到日益廣泛的應(yīng)用。由于玻碳電極用途廣泛,是一種較好的惰性電極,本身具有良好的導(dǎo)電性,硬度高,表面比較光潔,氫過(guò)電位高,極化范圍寬,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,可作為惰性電極直接用于陽(yáng)極溶出,陰極和變價(jià)離子的伏安測(cè)定。所以在做化學(xué)修飾電極的實(shí)驗(yàn)時(shí),多以玻碳電極作為被修飾電極。

2.化學(xué)修飾電極材料

2.1聚氨基黑10B/Nafion修飾電極:氨基黑10B中文別名:苯胺藍(lán)黑,酸性黑1,萘酚藍(lán)黑,酸性黑10B。由于結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)共軛體系,該試劑有媒介的作用。同時(shí),氨基黑10B中含有多個(gè)苯環(huán),所以在修飾電極時(shí)有利于改善電催化活性和穩(wěn)定性。正常的以玻碳電極為基地的電極在物理吸附這一方面存在著吸附量少并且容易受到環(huán)境的影響的缺點(diǎn)。所以,采用了修飾到電極上。因?yàn)槿跛嵝缘陌被?0B染料的分子結(jié)構(gòu)中存在大的共軛芳香環(huán),通過(guò)鍵的作用使其在玻碳電極上的物理吸附力增強(qiáng)。Gorton等發(fā)現(xiàn)了弱酸性氨基黑10B染料分子能與碳材料電極通過(guò)電子云的重疊進(jìn)行耦合,著不僅增加了物理吸附強(qiáng)度,同時(shí)也使電荷傳遞的速率加快。然后在向其中滴加Nafion,進(jìn)而制得聚氨基黑10B/Nafion修飾電極。該修飾電極對(duì)多巴胺有很好的電催化作用,同時(shí)能有效的排除抗壞血酸對(duì)檢測(cè)的干擾,提高了選擇性;使用該電極時(shí)多巴胺的氧化峰電位負(fù)移,峰值變大。該電極的另外的優(yōu)點(diǎn)就是制作過(guò)程簡(jiǎn)單,而且可用于多種多巴胺鹽酸注射液和小牛血清中的多巴胺的檢測(cè)和測(cè)定,這為藥劑中的多巴胺的測(cè)定提供了一種新的方法。

2.2碳納米管復(fù)合薄膜修飾電極:碳納米管(CNTs),又名巴基管,是一種具有特殊結(jié)構(gòu)(徑向尺寸為納米量級(jí),軸向尺寸為微米量級(jí),管子兩端基本上都封口)的一維量子材料。碳納米管是主要由呈六邊形排列的碳原子構(gòu)成數(shù)層到數(shù)十層的同軸圓管。納米管作為一維納米材料,重量輕,六邊形結(jié)構(gòu)連接完美,具有許多異常的力學(xué)、電學(xué)和化學(xué)性能。自1991年被Lijima發(fā)現(xiàn)以來(lái),由于其廣闊的性能逐漸展現(xiàn)出來(lái),近些年來(lái),越來(lái)越多的學(xué)者開(kāi)始關(guān)注碳納米管在電極的制備方面的應(yīng)用了。碳納米管本身具有π-π共軛鍵和疏水表面,這種特殊的結(jié)構(gòu)可以促進(jìn)某些含有共軛π電子的有機(jī)化合物與碳納米管通過(guò)π-π共軛鍵和疏水的相互作用進(jìn)而形成新的復(fù)合材料。利用聚合物的吸附作用,經(jīng)過(guò)層層組裝在碳納米管上面,制成了聚合物/碳納米管復(fù)合薄膜電極,從而實(shí)現(xiàn)了在抗壞血酸的干擾下對(duì)多巴胺的電分析測(cè)定。一些類(lèi)似三明治層狀結(jié)構(gòu)的復(fù)合薄膜如果利用非共價(jià)吸附,電沉積等手段,也可以被用于納米器件的設(shè)計(jì)利用碳納米管的吸附特性及其與亞甲基藍(lán)(MB)π-π共軛電子效應(yīng)制備的多壁碳納米管/亞甲基藍(lán)復(fù)合納米材料,在構(gòu)建亞甲基藍(lán)/功能化多壁碳納米管/Nafion三組分復(fù)合薄膜電化學(xué)傳感器。這種方法得到的修飾電極能使多巴胺的氧化峰電流明顯增加,消除抗壞血酸等常見(jiàn)干擾物質(zhì)對(duì)多巴胺的干擾。

3.結(jié)論

總結(jié)以上研究成果,這幾種化學(xué)修飾電極都具有良好的應(yīng)用前景,但是,也存在著一定的局限性。同時(shí),應(yīng)用與實(shí)際分析中時(shí)總會(huì)出現(xiàn)不同的問(wèn)題,應(yīng)為實(shí)際的分析中總會(huì)出現(xiàn)人們無(wú)法從理論推測(cè)出的問(wèn)題來(lái)。另外一方面,進(jìn)一步的提高化學(xué)修飾電極的穩(wěn)定性和對(duì)干擾物質(zhì)的消除等問(wèn)題,更需要人們探索,是今后研究的一個(gè)方向。相信在未來(lái)的發(fā)展中人們會(huì)克服重重困難,將化學(xué)修飾電極進(jìn)一步完善,能更準(zhǔn)確的檢測(cè)和測(cè)量,為人類(lèi)造福。

參考文獻(xiàn):

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第5篇:醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法范文

【關(guān)鍵詞】小學(xué)語(yǔ)文教學(xué)方法

一、課前構(gòu)思藝術(shù)化授課方法的重要性

語(yǔ)文是學(xué)好各類(lèi)學(xué)科的基礎(chǔ)。語(yǔ)文教學(xué)的任務(wù)在于幫助學(xué)生培養(yǎng)與提高運(yùn)用語(yǔ)言的能力。這種能力概括起來(lái)有三種:吸收(讀、聽(tīng)、看)、表述(說(shuō)、寫(xiě))和思考。當(dāng)然還有其他能力,如觀察力、想象力等。這一切能力培養(yǎng)的關(guān)鍵,是調(diào)動(dòng)學(xué)生的思維,引導(dǎo)他們好奇探幽,并將此自覺(jué)轉(zhuǎn)化為獨(dú)立的探索和追求。一個(gè)語(yǔ)文老師,如能調(diào)動(dòng)學(xué)生的思維,把課教“活”,達(dá)到課堂藝術(shù)的佳境,那就是一位出色的教師。語(yǔ)文教學(xué)不可能限于一種模式,一種方法。應(yīng)根據(jù)語(yǔ)文的不同類(lèi)型,不同內(nèi)容、不同文體,采用不同的教學(xué)方法。當(dāng)代語(yǔ)文教學(xué)法正處在變革發(fā)展中,各類(lèi)教學(xué)方法形式繁多。諸如講讀法、分析法、串講法、比較法、直觀法、暢想法、帶讀法、讀議結(jié)合法、八字教學(xué)法、一次多文教學(xué)法、線索法、評(píng)點(diǎn)法等。根據(jù)不同教材,不同教學(xué)對(duì)象運(yùn)用不同教學(xué)方法。教學(xué)中有的應(yīng)重于欣賞、如:課文中的精品、有的應(yīng)重于知識(shí)的傳授或基本技能的訓(xùn)練、有的應(yīng)重于思想的開(kāi)啟,有的應(yīng)引導(dǎo)學(xué)生尋根究底、有的以講為主、有的以練為中心、有的以導(dǎo)讀為重點(diǎn)。總之要從實(shí)際出發(fā),善于變通。否則,即使運(yùn)用最先進(jìn)的教學(xué)法,亦不免流于形式。搞花架子教學(xué),表面熱熱鬧鬧,其實(shí)空空蕩蕩,決不會(huì)取得良好效果。

二、實(shí)施切合實(shí)際的藝術(shù)化課堂教學(xué)

教師的課堂教學(xué),應(yīng)該向市場(chǎng)管理那樣,“放而不亂,管而不死”。所謂“放”。一、放下老師架子,以平等態(tài)度對(duì)待學(xué)生,講究課堂民主,不搞一言堂。我們有些老師,往往習(xí)慣于傳統(tǒng)教育師道尊嚴(yán),習(xí)慣于用訓(xùn)斥口吻而不是用“導(dǎo)游”口吻,對(duì)于“俯身側(cè)耳以聽(tīng)”,訓(xùn)斥后“色愈恭,禮愈至,不敢出一言以復(fù)”的學(xué)生,表示欣賞。二、放開(kāi)學(xué)生思路,讓其思路暢開(kāi)而不凝滯,聯(lián)想滔滔而不漫流,這里有兩個(gè)方面的問(wèn)題,后面再談。至于“管”,一要管住自己,不燒野火,不隨心所欲,不損害學(xué)生自尊心;二管課堂紀(jì)律,不能聽(tīng)之任之,讓學(xué)生任意喧嘩吵鬧;三管學(xué)生視聽(tīng),有的學(xué)生上課,身在教室,神卻游于江河之上。教師應(yīng)以最快方式,凝聚學(xué)生的目視、耳聽(tīng)、心思。所以,教師既要重視講課,又要善于組織教學(xué)。

三、營(yíng)造和諧而熱烈的藝術(shù)化教學(xué)環(huán)境

教師從進(jìn)教室到走向講臺(tái),就已經(jīng)把一種帶有藝術(shù)魅力的氣勢(shì)無(wú)聲地傳給了學(xué)生。這堂課的成功與否是從這一刻開(kāi)始的,和演員在臺(tái)上演戲一樣。如果沒(méi)精打采,唱念做打,老是走神,觀眾就會(huì)“卷堂大散”。同樣,教師在課堂上精神倦怠、有聲無(wú)氣或者精神不佳,學(xué)生就會(huì)懨懨欲睡。精神充沛不在于音高八度,聲聲震耳,那樣易使學(xué)生過(guò)度緊張,造成疲勞。教書(shū)是細(xì)活,必須細(xì)水長(zhǎng)流。侃侃而談,娓娓動(dòng)聽(tīng)易使人接受。教師的課堂精神,還表現(xiàn)在專(zhuān)注、敏銳和機(jī)智。無(wú)論講、讀或板書(shū),應(yīng)力避出現(xiàn)紕漏;還要注意觀察學(xué)生的情緒,掌握火候。課堂上常常會(huì)出現(xiàn)一些意想不到的情況,教師要隨機(jī)應(yīng)變靈活處置,巧妙地創(chuàng)設(shè)充滿(mǎn)激情的教學(xué)藝術(shù)環(huán)境,把學(xué)生的注意力從始至終吸引著,把學(xué)生的情緒最大限度調(diào)動(dòng)起來(lái),讓學(xué)生象看“演出”一樣愉快地接受知識(shí)。

四、采用風(fēng)趣幽默的藝術(shù)化講課語(yǔ)言

第6篇:醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法范文

關(guān)鍵詞:血糖;便攜式血糖儀;全自動(dòng)生化分析儀;檢測(cè)系統(tǒng)比對(duì)

我院是一家二級(jí)綜合性醫(yī)院,對(duì)于血糖檢測(cè),因便攜式快速血糖儀具有體積小、攜帶方便、檢測(cè)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)而深受臨床各科認(rèn)可,因此我院臨床多個(gè)科室都備有便攜式快速血糖檢測(cè)儀。按相關(guān)檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)要求看,同一醫(yī)療機(jī)構(gòu),采用不同的檢測(cè)系統(tǒng)來(lái)測(cè)定相同項(xiàng)目,根據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)便攜式血糖檢測(cè)儀管理和臨床操作規(guī)范》(試行) 的要求,各個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定血糖的結(jié)果,應(yīng)與本機(jī)構(gòu)專(zhuān)業(yè)實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化分析儀的檢測(cè)血糖結(jié)果之間應(yīng)該具有可比性。因此,我科收集全院各科的血糖儀、配套同批號(hào)校準(zhǔn)及試紙,與我科全自動(dòng)生化分析儀,進(jìn)行了相應(yīng)的比對(duì)檢測(cè),并進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)上的評(píng)估與分析,現(xiàn)論述如下:

1資料與方法

1.1一般資料 分別收集全院10個(gè)科室SIMCHECK速康血糖儀DS-5,共計(jì)11臺(tái)(急診科2臺(tái)),及儀器配套血糖校準(zhǔn)試紙及試劑,其檢測(cè)血糖的線性范圍為1.1~33.3 mmol/L;BECKMAN DXC800生化分析儀一臺(tái),配套原裝血糖試劑及 SYNCHRON Systems MULTITM校正液和原裝質(zhì)控品,其檢測(cè)血糖的線性范圍為 0.3-38.8 mmol/L;

1.2方法

1.2.1方案 本次實(shí)驗(yàn)參照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究院(CLSI)標(biāo)準(zhǔn),以及衛(wèi)計(jì)委頒布的《醫(yī)療機(jī)構(gòu)便攜式血糖檢測(cè)儀管理和臨床操作規(guī)范》(試行)的要求,設(shè)定此方案。采用的SIMCHECK速康血糖儀DS-5,其檢測(cè)血糖的方法為生物酶法(POCT)。以BECKMAN DXC800生化分析儀為參考方法,其是以已糖激酶法測(cè)定葡萄糖濃度,其總反應(yīng)的特異性高于氧化酶法,因該檢測(cè)系統(tǒng)每年二次參加省室間質(zhì)評(píng),成績(jī)優(yōu)秀,全年日常室內(nèi)質(zhì)控測(cè)定,CV(%)值小于2,符合中華人民共和國(guó)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T403-2012《臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量指標(biāo)》中對(duì)血糖的要求,允許CV(%)3.0。

以上兩種檢測(cè)系統(tǒng),以全年日常室內(nèi)質(zhì)控檢測(cè)數(shù)據(jù)來(lái)估計(jì)其不精密度,最大與最小CV之間的差異小于2倍。

1.2.2操作過(guò)程 實(shí)驗(yàn)前,對(duì)儀器進(jìn)行常規(guī)保養(yǎng)、清洗、相關(guān)項(xiàng)目校準(zhǔn)及三個(gè)濃度室內(nèi)質(zhì)控測(cè)定,所有項(xiàng)目均在控的狀態(tài)下,選取當(dāng)天門(mén)診30min內(nèi)采集的肝素抗凝血標(biāo)本80份,及同時(shí)間送檢的住院已確診糖尿病的急診肝素抗凝血標(biāo)本20份(以增加極低血糖值及極高血糖檢出機(jī)率),輕輕倒轉(zhuǎn),使其充分混勻,并將靜脈血樣的氧分壓PO2調(diào)節(jié)至8.67 kPa±0.67kPa(65mmHg±5mmHg),紅細(xì)胞比容HCT在30%~60%;然后先取適量全血標(biāo)本,按照血糖儀操作要求,進(jìn)行快速血糖檢測(cè);剩余血樣15min內(nèi)離心分離血漿,30 min內(nèi)用全自動(dòng)生化分析儀完成血漿葡萄糖測(cè)試。排除有明顯人為誤差的數(shù)據(jù)標(biāo)本,并按照以下條件,選取53份標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果,每臺(tái)便攜式血糖儀測(cè)得的靜脈全血結(jié)果與全自動(dòng)生化分析儀測(cè)試的靜脈血漿檢測(cè)結(jié)果之間的差異即為偏差,見(jiàn)表1。

1.2.3評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 按美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究院(CLSI)標(biāo)準(zhǔn)要求,當(dāng)血糖濃度

1.2.4 數(shù)據(jù)收集及處理 可接受范圍計(jì)算如下:

RCV%=(X1-X2)/X2×100%

X1為SIMCHECK速康血糖儀結(jié)果

X2為BECKMAN DXC800生化分析儀結(jié)果

2結(jié)果

2.1 11組血糖儀所測(cè)得的53份標(biāo)本的血糖結(jié)果,與全自動(dòng)生化分析儀的53份血糖結(jié)果分別比較,按上述RCV%計(jì)算方式,遵照評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn),其中10臺(tái)血糖儀所測(cè)得的血糖低值、正常值及高值區(qū)間的檢測(cè)結(jié)果與參考分析儀比較,在可接受范圍內(nèi),比對(duì)通過(guò)。急診-2血糖儀在正常值區(qū)間的部分檢測(cè)結(jié)果與參考分析儀比較,超過(guò)可接受范圍,且在低值區(qū)間結(jié)果接近最大可接受范圍,結(jié)果偏低明顯,重復(fù)性較差,建議聯(lián)系廠商更換,重新校準(zhǔn)并比對(duì)。

2.2由10組血糖儀檢測(cè)數(shù)據(jù)(比對(duì)通過(guò))與全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)數(shù)據(jù)比較,可以明顯得出,同一標(biāo)本,血糖儀與生化分析儀檢測(cè)血糖值比較,相對(duì)偏差均在5%~10%之間,低于全自動(dòng)生化分析儀所檢測(cè)的血漿葡萄糖結(jié)果,符合《醫(yī)療機(jī)構(gòu)便攜式血糖檢測(cè)儀管理和臨床操作規(guī)范》所述,用全血校準(zhǔn)的血糖儀檢測(cè)數(shù)值空腹時(shí)血糖要較實(shí)驗(yàn)室數(shù)值低12%左右。因此,可以反映血糖儀的檢測(cè)結(jié)果是符合要求的。

第7篇:醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法范文

【關(guān)鍵詞】D-二聚體;肺栓塞;實(shí)驗(yàn)研究;臨床意義

methodology research and clinical significance of D-dimer examination diagnosis pulmonary embolism

ZHOU Yu-huan,PENG He-ping,HE Wen,et al.Clinical lab in Karen Health and Hospital,Guangdong,Shenzhen 518102,China

【Abstract】 Objective To discusses clinical practice of the blood plasma D-dimer(D-dimer,DD)examination fast accurate method and the diagnosis pulmonary embolism.Methods Using the colloid gold double immune body to contain filling separately Norwegian Nycocard ReaderⅡ;The multi-purpose entire quota instrumentation law,the immunity completely automatic blood congeal the meter law compared to muddy Japanese Sysmex the CA1500; The manual range estimate qualitative method three methods examine in the blood plasma to 42 example diagnoses for the pulmonary embolism patient the DD content,the recording result carry on the comparison.Results 42 example pulmonary embolism patient DD examination colloid gold law masculine gender 42 examples,masculine gender rate was 100%; Immunity turbidimetric method masculine gender 42 examples,masculine gender rate was 100%; There was the remarkable statistics significance with the manual range estimate qualitative method(P0.05).Conclusion colloid Jin Fa,the immunity turbidimetric method examination blood plasma D-dimer result accurate,is fast、 convenient,as the lung diagnosis embolism first choice sieving experiment,is worth promoting the application.

【Key words】D-dimer;Pulmonary embolism;Experimental study;Clinical significance

作者單位:518102廣東省深圳恒生醫(yī)院檢驗(yàn)科(周玉環(huán) 陳愛(ài)寶);

江西省吉安市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科(彭和平 何文)

血漿-二聚體(D-dimer,DD)是一種纖維蛋白降解產(chǎn)物,正常人血中含量很低,遇微風(fēng)栓形成的疾病可導(dǎo)致DD升高,肺檢塞(PE)時(shí),凝固后的血栓在纖溶酶的作用下,降解成大小不等的多肽片段,其中最小最簡(jiǎn)單的降解產(chǎn)物即是DD[1],肺栓塞患者的血漿DD含量明顯高于臨床癥狀相似的非PE患者[2],近年來(lái)血漿DD檢測(cè)作為PE診斷的過(guò)篩試驗(yàn)已得到業(yè)界認(rèn)同,由于方法較多,我們特將膠體金法、免疫比濁法、手工目測(cè)定性法三種進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)比較,現(xiàn)報(bào)導(dǎo)如下。

1 材料與方法

1.1 對(duì)象 病例采自2003年1月至上009年10月醫(yī)院內(nèi)科和手術(shù)科患者以螺旋CT和動(dòng)脈造影等確診的PE患者42例,其中男28例,女14例,年齡26~77歲。所有PE患者均符合《中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)肺栓塞病診斷與治療指南(草案)》診斷標(biāo)準(zhǔn)確診。并排除其他血栓形成(如血液病、腫瘤、肝病)等疾病。

1.2 材料 ①膠體金雙抗體夾心挪威進(jìn)口試劑盒,挪威Nycocard ReaderⅡ多功能全定量檢測(cè)儀;②免疫比濁德靈(DADEBEHRING)進(jìn)口試劑盒,日本Sysmex CA1500全自動(dòng)血凝儀法;③手工目測(cè)定性太陽(yáng)公司試劑。

1.3 方法 取枸椽酸鈉抗凝血,3000 r/min,離心10 min,分離血漿,分別用上述三種方法檢測(cè)。記錄結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)分析采用SP10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件,以P

2 結(jié)果

2.1 肺栓塞42例患者用三種不同方法檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 從表中可以發(fā)現(xiàn),膠體金法、免疫比濁法DD陽(yáng)性率均為100%,敏感性高,二者比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05;而手工目測(cè)法陽(yáng)性率只有54.7%,膠體金法、免疫比濁法同手工法比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P

表1

三種不同方法檢測(cè)DD的實(shí)驗(yàn)結(jié)果(例,%)

組別PE例數(shù)(n)DD陽(yáng)性數(shù)(n)陽(yáng)性率(%)

膠體金法4242100

免疫比濁法4242100

手工目測(cè)法422354.7

3 討論

急性肺栓塞起病急,病癥隱匿,臨床表現(xiàn)復(fù)雜,誤診率高,其死亡率僅次于心肌梗死和腫瘤,高達(dá)60%,若能及時(shí)診斷可降至7%[3],目前診斷肺栓塞的金標(biāo)準(zhǔn)是肺血管造影,但其具有侵襲性、技術(shù)性強(qiáng)、存在并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)、費(fèi)用高等特點(diǎn)[4],肺通氣/灌注掃描是目前公認(rèn)的對(duì)可疑PE患者最為精確的無(wú)創(chuàng)檢查,但高達(dá)70%的可疑PE患者的掃描結(jié)果沒(méi)有診斷意義,它更適用于對(duì)高度可疑患者的確診;螺旋CT對(duì)診斷肺動(dòng)脈干、葉及段級(jí)別的肺動(dòng)脈栓塞敏感性和特異性較高,但對(duì)亞段及更小分支肺動(dòng)脈栓塞的診斷價(jià)值及可靠性眾說(shuō)不一[5],而DD檢測(cè)診斷PE的陽(yáng)性率為100%,陰性預(yù)期值也為100%[6],因此,DD檢測(cè)作為PE篩選試驗(yàn),不失為一種簡(jiǎn)單可靠、敏感性高和無(wú)創(chuàng)性檢查手段,具備快速、準(zhǔn)確、便捷的和特點(diǎn),目前已被告臨床逐步稍應(yīng)用,尤其是基層醫(yī)院和應(yīng)酬激狀態(tài)時(shí)意義重大。

近年檢測(cè)DD的方法有乳膠手工目測(cè)法、酶聯(lián)免疫法、免疫比濁法。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:手工目測(cè)法陽(yáng)性率只有54.7%,雖試劑便宜,不需特殊設(shè)備,但敏感性低,得到與王榕生[7]相近的結(jié)論;而膠體金雙抗體夾心挪威Nycocard ReaderⅡ多功能全定量檢測(cè)儀法和免疫比濁日本Sysmex CA1500全自動(dòng)血凝儀法陽(yáng)性率均達(dá)100%,敏感性高、費(fèi)時(shí)短、結(jié)果準(zhǔn)確,我們推薦采用該二種方法。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 傅金階.高血壓性腦出血患者血漿中D-二聚體測(cè)定的臨床價(jià)值.廣西醫(yī)學(xué),2003,25(3):39.

[2] 余悅心.血漿D-二聚體檢測(cè)對(duì)肺栓塞的診斷價(jià)值.現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué),2008,20(11):847-849.

[3] 張洪以.實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)聯(lián)合測(cè)定在肺栓塞診斷中的應(yīng)用.江漢大學(xué)學(xué)報(bào),2008,36(4):65-67.

[4] Kline JA,Runyon MS,Webb WB,et al,Prospective study of the diagnostic accuracy of the simplify D-dimer assay for pulmonary embolism in emergeny department patients.Chest,2006,129(6):1417-1423.

[5] 張海晨,沈博,宋云霄,等.850例腦血管病D-二聚體、Feb 和APTT水平差異及臨床意義.中國(guó)實(shí)用醫(yī)學(xué)研究雜志,2005,4:149-151.

第8篇:醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法范文

[關(guān)鍵詞]乙型肝炎;病毒表面抗原;時(shí)間分辨免疫熒光分析法;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

[中圖分類(lèi)號(hào)]R511 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B [文章編號(hào)]1673-7210(2007)05(b)-094-01

乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)檢測(cè)是診斷乙型肝炎病毒(hepatits B virus,HBV)感染的重要依據(jù)之一,不同人群血清HBsAg濃度可相差成千上萬(wàn)倍,低水平血清HBsAg人群不容忽視,提高HBsAg檢測(cè)靈敏度有重要意義。許多高靈敏度的測(cè)定方法應(yīng)用于臨床免疫學(xué)檢測(cè),其中酶聯(lián)免疫法應(yīng)用最廣,我們對(duì)低濃度HBsAg人群血清進(jìn)行了乙肝病毒表面抗原二種檢測(cè)方法的比較,結(jié)果如下:

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本

234例標(biāo)本均來(lái)自本院門(mén)診與住院的病人,濃度介于0~0.5 ng/ml。

1.2 儀器

EL311S酶標(biāo)儀;上海新波ANYTEST-2000型時(shí)間分辨熒光測(cè)定儀;新波Egate 2310全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī),新波2510酶標(biāo)變頻振蕩器。

1.3 試劑

ELISA試劑采用上??迫A,TRFIA試劑采用新波生物科技有限公司;質(zhì)控品采用衛(wèi)生部門(mén)臨床檢驗(yàn)中心提供的HBsAg定值質(zhì)控品(濃度1 ng/mL)。

1.4 方法

分別用TRFIA試劑和ELISA試劑檢測(cè)HBsAg方法檢測(cè)質(zhì)控品及血標(biāo)本中的HBsAg濃度,兩種檢測(cè)方法均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2 結(jié)果

ELISA法S/CO≥1.0為陽(yáng)性,S/CO

3 討論

乙肝病毒感染是我國(guó)最常見(jiàn)的感染性疾病之一,而應(yīng)用免疫技術(shù)測(cè)定 HBV 特異性抗原抗體是 HBV 感染診斷的主要手段。由于免疫學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,抗原抗體檢測(cè)靈敏度明顯提高,使低水平 HBV 感染得以檢出,對(duì)臨床診斷及流行病學(xué)有重要意義。HBsAg是診斷乙型肝炎病毒感染的指標(biāo)之一,其結(jié)果逐漸引起人們廣泛注意,特別是一些低水平的血清HBsAg,由于多種因素的影響容易造成時(shí)陰時(shí)陽(yáng)的結(jié)果。據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計(jì)顯示,低水平的乙肝表面抗原(1~2 ng/mL)并不代表其他的乙肝指標(biāo)就是陰性或陽(yáng)性。本資料中234例乙肝病毒表面抗原濃度介于0~0.5 ng/ml的測(cè)定結(jié)果顯示,陽(yáng)性檢測(cè)率ELISA>TRFIA,兩者的符合率為87.18%,而TRFIA法與免疫發(fā)光法在檢測(cè)HBsAg上符合率為98.8%。以上資料顯示,ELISA的靈敏度比TRFIA法高。

時(shí)間分辨熒光免疫分析技術(shù)是一個(gè)靈敏度高、特異性強(qiáng)的免疫檢測(cè)技術(shù),它的基本原理是延遲檢測(cè)壽命較長(zhǎng)的特異性激發(fā)熒光以排除非特異性及背景熒光的干擾,當(dāng)標(biāo)本中膽紅素800 μmol/L,甘油三酯20 nmol/L,血紅蛋白18 g/ml時(shí),對(duì)TRFIA也無(wú)干擾作用[1]。TRFIA法的靈敏度特異性均較好,試驗(yàn)結(jié)果可以保存較長(zhǎng)時(shí)間,由于可進(jìn)行定量分析,這對(duì)藥物療效觀察和病情監(jiān)測(cè)具有重要意義。

酶聯(lián)免疫法的優(yōu)點(diǎn)在于它的操作簡(jiǎn)單,適用于大批量標(biāo)本的檢測(cè),且成本低廉,其靈敏度也很好,但要注意其一些影響因素,內(nèi)源性物質(zhì)(補(bǔ)體、AFP、RF、自身抗體)的干擾和外源性物質(zhì)(血液抗凝劑)[2]、試劑盒質(zhì)量(特別是抗體包被的質(zhì)量)等均可影響ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度,對(duì)其檢測(cè)的弱陽(yáng)性標(biāo)本應(yīng)復(fù)查,以減少誤報(bào)。

綜上所述,國(guó)產(chǎn)HBsAg試劑盒中,TRFIA與ELISA相比,特異性較高但靈敏度較低,在臨床應(yīng)用中應(yīng)注意0.2~0.5 ng/ml的低值報(bào)告。

[參考文獻(xiàn)]

第9篇:醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法范文

【關(guān)鍵詞】 尿沉渣定量分析儀; 干化學(xué)分析法; 尿液細(xì)胞; 應(yīng)用

doi:10.14033/ki.cfmr.2017.6.025 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805(2017)06-0045-03

尿液檢查內(nèi)容通常包括尿常規(guī)分析、蛋白成分定量測(cè)定、尿液中細(xì)胞檢查、尿酶測(cè)定等,尿液檢查對(duì)臨床診斷、判斷療效和預(yù)后有著十分重要的價(jià)值,在尿液檢查中尿液細(xì)胞檢查有體外腎活檢之稱(chēng),因?yàn)槟蛞杭?xì)胞中白細(xì)胞和紅細(xì)胞的數(shù)量及形態(tài)能反應(yīng)出眾多病理信息,尤其對(duì)于尿流感染、腎出血及泌尿系統(tǒng)疾病的臨床診斷有重要參考價(jià)值[1]。隨著科學(xué)技術(shù)的日趨發(fā)展,尿液沉渣定量分析儀、干化學(xué)分析儀等尿液細(xì)胞檢測(cè)方法被應(yīng)用于臨床中,各種檢測(cè)方法均有自身優(yōu)缺點(diǎn),如尿沉渣離心鏡檢法具有準(zhǔn)確、客觀等優(yōu)點(diǎn),而且其可觀察尿液中細(xì)胞形態(tài),但操作繁瑣、檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng),干化學(xué)分析儀具有快速、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),但其準(zhǔn)確性、靈敏度和特異性不及鏡檢法,尤其是鏡檢法可分析尿液細(xì)胞的形態(tài),進(jìn)而具有不可替代性[2-4],為比較三種不同檢測(cè)方法的利用效能,本文將三種檢測(cè)方法同時(shí)應(yīng)用于臨床中,現(xiàn)將比較研究結(jié)果匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月-2016年4月600例來(lái)筆者所在醫(yī)院的體檢者為本文研究對(duì)象,男439例,女161例,年齡27~69歲,平均(46.3±2.5)歲。

1.2 檢測(cè)儀器與試劑

一次性無(wú)菌尿液采集杯,SysmexUF-1000i型全自動(dòng)尿沉渣定量分析儀及其配套試劑,迪瑞H-800型干化學(xué)尿液分析儀及其配套試劑。

1.3 檢測(cè)方法

161例女性體檢者收集尿液標(biāo)本時(shí)均避開(kāi)了月經(jīng)期,收集600例對(duì)象的新鮮中段晨尿,尿液標(biāo)本收集后2 h內(nèi)完成各項(xiàng)檢測(cè)。

使用一次性無(wú)菌尿液采集杯采集體檢者新鮮中段晨尿30 ml,用潔凈試管將尿液標(biāo)本分為3份,每份均為10 ml,第一份標(biāo)本進(jìn)行尿液沉渣定量分析,第二份標(biāo)本進(jìn)行干化學(xué)分析,第三份標(biāo)本進(jìn)行尿液沉渣離心鏡檢,鏡檢標(biāo)本于2000 r/min下離心3 min,去除離心上清液,將殘余的0.5 ml尿沉渣涂片,在高倍視野下觀察尿液細(xì)胞數(shù)量和形態(tài),細(xì)胞數(shù)量取10個(gè)視野平均數(shù)作為最終計(jì)數(shù)量[5-6]。尿液沉渣定量分析法中男性紅細(xì)胞參考值為0~8 ?l,女性參考值為0~17 ?l,男性白細(xì)胞參考值為0~10 ?l,女性參考值為0~28 ?l,干化學(xué)分析法中紅細(xì)胞和白細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果分為-、±、+、2+、3+、4+,+即可判斷為陽(yáng)性,尿液離心鏡檢法紅細(xì)胞參考值為0~3個(gè)/HP,白細(xì)胞參考值為0~5個(gè)/HP,大于以上數(shù)值即可判斷為陽(yáng)性。將尿液沉渣離心鏡檢法檢測(cè)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn),衡量尿液沉渣定量分析法和干化學(xué)分析法的檢測(cè)結(jié)果,計(jì)算兩組檢測(cè)方法的陽(yáng)性率、準(zhǔn)確度、靈敏度和特異性[7-9]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 16.0對(duì)兩組資料進(jìn)行分析,計(jì)量資料用(x±s)表示,比較用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,比較用字2檢驗(yàn),P

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測(cè)方法的陽(yáng)性率比較

尿沉渣定量分析儀紅細(xì)胞和白細(xì)胞檢測(cè)陽(yáng)性率分別為36.7%和32.8%,干化學(xué)分析法檢測(cè)陽(yáng)性率分別為35.5%和34.2%,金標(biāo)準(zhǔn)尿沉渣離心鏡檢法檢測(cè)陽(yáng)性率分別為34.5%和31.8%。尿沉渣定量分析法與尿沉渣離心鏡檢法檢測(cè)陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),干化學(xué)分析法與尿沉渣離心鏡檢法檢測(cè)陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具體見(jiàn)表1、表2。

2.2 兩種方法檢測(cè)紅細(xì)胞的比較

尿沉渣定量分析法和干化學(xué)分析法檢測(cè)尿液樣本中紅細(xì)胞的準(zhǔn)確度分別為89.5%和89.7%,兩種檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(字2=1.897,P>0.05)。尿沉渣定量分析法和干化學(xué)分析法檢測(cè)尿液樣本中紅細(xì)胞的特異性分別為90.3%和91.3%,兩種檢測(cè)方法的特異性比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(字2=1.692,P>0.05)。尿沉渣定量分析法和干化學(xué)分析法檢測(cè)尿液樣本中紅細(xì)胞的靈敏度分別為87.9%和86.5%,兩種檢測(cè)方法的靈敏度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(字2=1.591,P>0.05),具體見(jiàn)表3。

2.3 兩種方法檢測(cè)白細(xì)胞的比較

尿沉渣定量分析法和干化學(xué)分析法檢測(cè)尿液樣本中白細(xì)胞的準(zhǔn)確度分別為85.0%和84.7%,兩種檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(字2=2.084,P>0.05)。尿沉渣定量分析法和干化學(xué)分析法檢測(cè)尿液樣本中白細(xì)胞的特異性分別為88.3%和87.0%,兩種檢測(cè)方法的特異性比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(字2=1.955,P>0.05)。尿沉渣定量分析法和干化學(xué)分析法檢測(cè)尿液樣本中白細(xì)胞的靈敏度分別為78.0%和79.6%,兩種檢測(cè)方法的靈敏度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(字2=2.156,P>0.05),具體見(jiàn)表4。

2.4 兩種方法聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析

聯(lián)合檢測(cè)樣本中紅細(xì)胞的準(zhǔn)確度、特異性及靈敏度分別為96.8%、97.2%和96.1%,聯(lián)合檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度、特異性及靈敏度明顯高于尿沉渣定量分析法和干化學(xué)分析法,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

3 討論

尿液細(xì)胞檢測(cè)方法是臨床診斷疾病的重要手段之一,傳統(tǒng)尿液細(xì)胞檢測(cè)方法為尿沉渣離心鏡檢法,尿沉渣鏡檢法雖然檢測(cè)速度慢、樣本處理繁瑣[10],但其有效避免尿液樣本中過(guò)氧化物酶類(lèi)、還原性物質(zhì)等造成的假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果,在鏡檢過(guò)程中不僅可定量分析紅細(xì)胞和白細(xì)胞數(shù)量,而且可清晰觀察尿液細(xì)胞形態(tài),因此尿沉渣離心鏡檢法被視為尿液細(xì)胞檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn),但此方法也有一定局限性[11],首先,該檢測(cè)方法檢測(cè)速度慢、樣本處理繁瑣,而且檢測(cè)過(guò)程完全由人工完成,因此檢測(cè)結(jié)果具有一定的主觀性,對(duì)于檢測(cè)操作人員技能熟練程度亦有一定要求;其次,尿液樣本離心過(guò)程中部分細(xì)胞會(huì)遭到破壞,加上滲透壓、pH值變化等均會(huì)不同程度破壞尿液細(xì)胞,進(jìn)而導(dǎo)致檢測(cè)值低于實(shí)際值[12]。

隨著科學(xué)技術(shù)和醫(yī)療器械水平的發(fā)展,各種快速檢測(cè)方法被廣泛應(yīng)用于臨床中,其中應(yīng)用較多的幾種手段包括尿液沉渣定量分析法和干化學(xué)分析法等,各種自動(dòng)檢測(cè)方法的應(yīng)用大大降低了一線工作人員的工作量,但這些檢測(cè)方法受影響因素也較多,進(jìn)而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果異常、漏診和誤診等[13]。如采用干化學(xué)分析法檢測(cè)紅細(xì)胞使用的試劑紙中含有聯(lián)苯胺衍生物,其會(huì)產(chǎn)生一系列生化反應(yīng)使指示劑增強(qiáng)顯色,進(jìn)而導(dǎo)致紅細(xì)胞含量檢測(cè)值高于實(shí)際值。尿液中如果存在具有干擾氧化還原反應(yīng)的物質(zhì)也會(huì)影響紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。另外,該方法檢測(cè)白細(xì)胞使用的試紙中含有重氮鹽、吡咯酚等會(huì)發(fā)生一系列重氮反應(yīng),進(jìn)而形成紫色絡(luò)合物使顯色增強(qiáng),導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果與實(shí)際值不相符的假陽(yáng)性,而檢測(cè)對(duì)象體內(nèi)的抗生素、蛋白尿等會(huì)使檢測(cè)結(jié)果假陰性[14],此外,腎移植術(shù)后排斥反應(yīng)、免疫性疾病等均會(huì)不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。尿沉渣定量分析儀是上世紀(jì)80年明的一種新型檢測(cè)手段,該檢測(cè)儀器具有自動(dòng)化程度高、重現(xiàn)性好、檢測(cè)速度快等優(yōu)點(diǎn),而且檢測(cè)樣本不需要離心,即簡(jiǎn)化了樣本處理流程,亦可減少離心對(duì)尿液細(xì)胞形態(tài)的破壞。該檢測(cè)儀器能直觀、清晰的一次性呈現(xiàn)12大類(lèi)有形成分,檢測(cè)效率得到顯著提升,但其數(shù)字成像技術(shù)會(huì)誤讀與紅細(xì)胞、白細(xì)胞大小相近的有形成分[15]。大量的實(shí)驗(yàn)結(jié)果和文獻(xiàn)顯示,真菌孢子、細(xì)菌、草酸鈣結(jié)晶等與紅細(xì)胞形態(tài)相似的有形成分,腎上皮細(xì)胞、細(xì)胞核酸等與白細(xì)胞形態(tài)相似的有形成分,極易被檢測(cè)儀器誤讀,從而大大降低了檢測(cè)的準(zhǔn)確性和特異性[16]。

為了探尋不同檢測(cè)方法的優(yōu)劣和聯(lián)合應(yīng)用不同檢測(cè)方法的可行性,本文將三種常用檢測(cè)方法同時(shí)應(yīng)用于臨床中,結(jié)果顯示,尿沉渣定量分析法、干化學(xué)分析法及尿離心鏡檢法的檢測(cè)陽(yáng)性率無(wú)明顯差異,以尿離心鏡檢法為標(biāo)準(zhǔn)分析尿沉渣定量分析法和干化學(xué)分析法顯示,兩種檢測(cè)方法靈敏度、準(zhǔn)確度和特異性無(wú)明顯差異,此結(jié)果提示臨床檢測(cè)中單獨(dú)應(yīng)用一種檢測(cè)方法難以滿(mǎn)足要求,實(shí)際應(yīng)用中可將多種方法聯(lián)合應(yīng)用,以提高檢測(cè)的可靠性和標(biāo)準(zhǔn)化。

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