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根據(jù)醫(yī)學檢驗專業(yè)的學科特點、課程性質(zhì)和學生素質(zhì)培養(yǎng)要求,將醫(yī)學檢驗專業(yè)的所有課程劃分為六大類課程群:通識課程、專業(yè)基礎課程、臨床醫(yī)學課程、專業(yè)課程、選修課程和實訓課程。通識課程包括高教部規(guī)定的所有基本課程。專業(yè)基礎課程又稱基礎醫(yī)學課。是醫(yī)學檢驗專業(yè)的主干學科,包括無機化學、有機化學、分析化學、正常人體解剖學、組織胚胎學、生理學、生物化學、醫(yī)學分子生物學、病理學、病理生理學、醫(yī)學統(tǒng)計學等。臨床醫(yī)學課是醫(yī)學檢驗專業(yè)的主要學科,它包括內(nèi)科學、外科學、婦科學、兒科學、診斷學。專業(yè)課是醫(yī)學檢驗專業(yè)的主干學科,包括臨床基礎檢驗、衛(wèi)生檢驗概論、臨床生化檢驗、分子診斷學、臨床檢驗儀器學、臨床微生物學檢驗、臨床寄生蟲學檢驗、臨床血液學檢驗、臨床免疫學檢驗、臨床輸血學等。選修課程,除了學校目前已經(jīng)存在的公共選修課和醫(yī)藥類選修課以外,還建議開設醫(yī)學文獻檢索、治療藥物監(jiān)測、專業(yè)外語、醫(yī)學科研設計、細胞病理學檢驗、床旁檢測、實驗室信息系統(tǒng)、試劑盒研發(fā)、實驗動物學、檢驗核醫(yī)學等選修課,從而拓展學生的專業(yè)素質(zhì)、突出檢驗專業(yè)的特色,同時還要嚴格要求專業(yè)選修課的最低學分。實訓課程即實習課,應統(tǒng)計出學分,包括軍事訓練、社會實踐、臨床見習、畢業(yè)實習、畢業(yè)論文(設計)等。
2課程設置
2.1課程的調(diào)整與整合
將生理學、病理學、病生學的實驗等基礎醫(yī)學實驗課程整合成《機能學實驗》;將無機化學、有機化學和分析化學實驗整合為《醫(yī)用化學綜合實驗》;將內(nèi)、外、婦、兒等臨床課程整合成《臨床醫(yī)學概要》。這樣既減輕了繁重的教學任務,也減輕了學生的學習負擔。醫(yī)學檢驗技術專業(yè)的專業(yè)課包括《臨床免疫學檢驗》《臨床微生物學檢驗》《臨床生物化學檢驗》專業(yè)基礎課包括《醫(yī)學免疫學》《醫(yī)學微生物學》《生物化學》等,這些課程之間存在著部分內(nèi)容重復以及內(nèi)容銜接不當?shù)膯栴},以至于學生在學習專業(yè)課程時常會遺忘了之前基礎課中所學過的相關知識。為此,老師授課時不得不重復基礎課的內(nèi)容。因此,建議將專業(yè)基礎課與專業(yè)課程合并在一起,使學生在學習完專業(yè)基礎知識后更好地繼續(xù)學習臨床技能。《分析化學》包括化學分析和儀器分析,學時較多,針對現(xiàn)代檢驗技術專業(yè)的特點,即已進入儀器檢驗的時代,因此該門課應側(cè)重儀器分析的講解,減少化學分析授課的比重。
2.2設置臨床見習期
現(xiàn)有的課程設置與臨床實踐結(jié)合的還不夠密切,由于未能很好地讓學生早期接觸臨床,致使部分學生并不知道臨床檢驗報告是什么,不知道檢驗報告上各項指標代表何意,也就更談不上有專業(yè)感情。因此,建議在對學生進行專業(yè)課教學之前應安排學生在醫(yī)院的檢驗科臨床見習一段時間,具體了解檢驗工作的流程,培養(yǎng)學生的感性認識,加深對檢驗知識的印象,達到百聞不如一見的效果。醫(yī)學檢驗專業(yè)的課程教學應該針對檢驗技師的培養(yǎng)目標,強化檢驗專業(yè)的特色,突出檢驗技師崗位的基本能力和基本素質(zhì)培養(yǎng),具體表現(xiàn)在檢驗方法學、實驗種類、檢驗項目、技術種類等教學內(nèi)容的特色和優(yōu)勢。
2.3增設一些有特色的選修課
以加強學生對當前最新技術的了解和應用。如針對檢驗科的大型儀器設備,檢驗人員只需了解儀器性能及常見故障排除。因此,可以將《檢驗儀器維修》這門課程改為選修課或以專題講座形式開出。也可將幾門臨床主干課程中的臨床檢驗儀器集中為臨床檢驗儀器學課程,避免重復講授。為加強實驗室質(zhì)量控制,開設《臨床實驗室管理》課程,可以將生化、免疫、細胞等質(zhì)量管理的內(nèi)容集中起來,不必在多門專業(yè)課中重復講授;而針對《臨床實驗室管理》內(nèi)容比較抽象,可以組織學生在臨床實習期間邊實踐邊學習,其教學效果會更好。
3課程開設順序
課程開設順序總體要求是通識課程、專業(yè)基礎課程、臨床醫(yī)學課程、專業(yè)課程、選修課,這樣依照學科的發(fā)展、知識的關聯(lián)與銜接來設置。有平行課程時要平衡開課實驗室和教研室的學年工作量。實訓課中的軍事訓練建議在新生入學時安排,以規(guī)范學生的行為習慣,養(yǎng)成良好的時間觀念、組織紀律觀念、集體觀念和講求規(guī)范及雷厲風行的工作作風,促進校風校紀建設;社會實踐課應安排在每年的寒假和暑假進行;臨床見習時間宜安排在進入專業(yè)課之前;畢業(yè)實習安排在最后一學年。
4課程學時的設置和教學內(nèi)容的要求
關鍵詞:甲狀腺腫瘤,腫瘤標志物,診斷
甲狀腺癌多起病隱匿,常以無痛性甲狀腺結(jié)節(jié)為最初臨床表現(xiàn)。雖然通過臨床觸診、B超、核素顯像及細針穿刺細胞學活檢(FNAB)等綜合評價可在一定程度上提高診斷的精確性,但早期診斷仍有困難。隨著分子和蛋白水平對腫瘤研究的進展,與甲狀腺癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸有關的腫瘤標志物近年來出現(xiàn)較多,而理想的腫瘤標志物應該具有特異性高、敏感性強、可信度高及穩(wěn)定性強的特點[1]。我們就近年來對甲狀腺癌腫瘤標志物的研究進展作一綜述。
1 Galectin3 Galectin3(Gal3)是β半乳糖苷酶結(jié)合蛋白家族成員,分子質(zhì)量為31ku,主要存在于細胞質(zhì)中,亦可位于胞膜及胞核。已有研究證明[2],Gal3可作為甲狀腺惡性腫瘤特別是甲狀腺狀癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)的一個表型特征,考慮Gal3的表達和PTC細胞保持高度增殖活性有關,但其具體作用機制仍不明確。Paron等[3]利用2DE和MALDIMS方法研究大鼠甲狀腺細胞系FRTL5和Kiras癌基因轉(zhuǎn)化細胞系Kimol的細胞核蛋白質(zhì)表達差異,發(fā)現(xiàn)Gal3過度表達于Kimol中,而在FRTL5中不表達。研究表明Gal3通過和甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子(thyroid transcriptionfactor1, TTF1)的同源結(jié)構域相互作用使TTF1的轉(zhuǎn)錄活性上調(diào), TTF1是甲狀腺特有的甲狀腺球蛋白和甲狀腺過氧化物酶基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控因子,它的表達水平和甲狀腺細胞增殖水平成正比。Gal3通過和TTF1的相互作用調(diào)控甲狀腺細胞的生長分化過程,在腫瘤的轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)移方面起重要作用。Galectin-3免疫過氧化物酶染色可在針吸細胞中進行,具有簡單、易推廣、結(jié)果相對可靠的特點。
2 細胞角蛋白(CK) 細胞角蛋白是形成表皮細胞中的角質(zhì)蛋白,是哺乳類動物細胞5種支架成分之一,來源于局部上皮細胞。以前的研究表明高分子量CK的免疫組化可用于組織切片中PTC的輔助診斷。近年來,CK 的研究方向漸轉(zhuǎn)向低分子量CK-19。CK-19為I型角蛋白,可表達于正常非角化上皮及異常增生上皮的基底層細胞,主要表達于單層上皮細胞,當這些細胞癌變后角蛋白組成不變,但CK-19表達增加。在正常甲狀腺濾泡中僅為局灶性陽性,而在甲狀腺狀癌中表達增多,尤其當染色強陽性時,支持狀癌的診斷,普遍用于區(qū)別狀癌和狀增生,但陽性率也不盡相同。總的來說,CK是一個有用的甲狀腺癌輔助診斷標記,但特異性不高。
3 組織蛋白酶B Srisomsap1等[4]利用2DE對多種甲狀腺疾病組織的蛋白質(zhì)表達情況進行了研究,分離出組織蛋白酶B(cathepsin B, CB)等。CB是細胞溶酶體中的一種半胱氨酸蛋白酶,可降解層連蛋白、纖連蛋白、IV 型膠原等細胞外基質(zhì)成分。研究表明, CB在乳腺癌、甲狀腺癌、肺癌、卵巢癌等多種惡性腫瘤中表達上調(diào),且活性明顯升高[5]。腫瘤細胞CB的表達上調(diào)及活性增強有助于降解基底膜主要成分―層粘蛋白和IV 型膠原,同時CB通過激活其他蛋白酶如膠原酶、尿激酶等產(chǎn)生協(xié)同作用使腫瘤易于侵襲及擴散。利用ESIMS分析CB,結(jié)果顯示有4個特異性的斑點:CB1、CB2、CB3、CB4,其中CB2、CB3在甲狀腺濾泡型腺瘤、PTC和甲狀腺濾泡癌中的表達明顯上調(diào),而在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫和Graves病中表達減低。提示可以通過檢測CB水平鑒別那些在顯微鏡下難以區(qū)分的甲狀腺濾泡型腺瘤和結(jié)節(jié)性甲狀腺腫。
4 血管內(nèi)皮生長因子(VEGF) 新血管的生成是實體瘤生長和進展過程中很重嬰的因素。VEGF.C又稱淋巴管生成因子,是近幾年新發(fā)現(xiàn)的VEGF家族中的新成員,是唯一能使淋巴管增生的因子,在惡性腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中起一定作用。多項實驗表明,甲狀腺癌中VEGF、VEGF—C的表達明顯高于正常甲狀腺,但慢性淋巴細胞性甲狀腺炎的組織和血清中也有高水平的VEGF表達。VEGF、VEGF.C在不同類型的甲狀腺癌中表達量不同:VEGF在PTC中陽性表達低于FTC、MTC和ATC,VEGF.C在PTC中陽性表達高于其他類型甲狀腺癌。這可能與濾泡狀癌易發(fā)生血行轉(zhuǎn)移,狀癌易發(fā)生淋巴道轉(zhuǎn)移的生物學行為有關[6]。Jiang[7]等研究了VEGF,VEGF.C和VEGF.D在PTC中的表達和意義,認為VEGF.C和VEGF.D 與PTC 的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關,且可作為PTC淋巴轉(zhuǎn)移的預測因子。
5端粒酶 端粒酶是一種核糖蛋白酶,能以自身RNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄合成端粒DNA,保持端粒的長度而維持細胞的分裂能力,使細胞逃脫衰老和死亡而獲得永生化,因此端粒酶的異常激活是惡性腫瘤細胞無限增殖的關鍵。研究表明,端粒酶活性不僅在甲狀腺癌中高表達,而且與癌的甲狀腺外侵犯。Ki67標記指數(shù)及低分化密切相關。有學者認為,對于組織和細胞病理學不易區(qū)分的濾泡性甲狀腺癌和濾泡性甲狀腺腺瘤來說,端粒酶活性是很好的鑒別標志物,他們發(fā)現(xiàn)100%的濾泡性甲狀腺癌有端粒酶活性表達,而良性濾泡性甲狀腺腺瘤的陽性率只為19%,癌旁的正常甲狀腺組織則無端粒酶活性。由于端粒酶活性檢測具有高度的特異性和敏感性,適用于術前組織FNA標本,有希望作為早期病例的篩查手段。。[8]
6 降鈣素 降鈣素由甲狀腺癌濾泡旁細胞合成及分泌,是MTC較敏感且特異的腫瘤標志物,在MTC幾乎都呈陽性表達且水平升高,而且表達程度與MTC分化程度和侵襲生長能力有關。在未經(jīng)刺激的情況下,血清降鈣素>100 pg/ml,則提示可能存在MTC。Costante等[9] 測定了5817例甲狀腺結(jié)節(jié)的血清基礎降鈣素水平,當該值>t20 pg/mI且<100pg/ml時,用五肽胃泌素刺激后再次測定血清降鈣素值,若血清基礎降鈣素值或者刺激后降鈣素值>100pg/ml則有手術指征。Bugalho等[10]評估了血清降鈣索測定與FNAB 用于MTC術前診斷的價值,發(fā)現(xiàn)前者較后者敏感性更高(98%VS 63%)。
7 P53 P53基因是人類腫瘤研究中較為重要的腫瘤抑制基因,定位于染色體17P13上,編碼一個由393個氨基酸組成的核磷蛋白。P53蛋白分為野生型及突變型兩種。野生型P53蛋白據(jù)認為是細胞周期相關蛋白.可通過誘導P21基因表達來抑制細胞周期G1/S轉(zhuǎn)換。而突變型P53蛋白失去誘導P21轉(zhuǎn)錄功能,從而喪失G1/S轉(zhuǎn)換抑制作用。P53蛋白為轉(zhuǎn)錄因子,其生物學作用為細胞周期G1期DNA損傷的監(jiān)控點,在維持細胞正常生長,抑制惡性增殖過程中起重要作用[11]。在甲狀腺腫瘤中P53基因突變幾乎全部發(fā)生在惡性度極高的間變性癌中或低分化癌中,說明P53突變是甲狀腺腫瘤發(fā)生中的晚期事件,其存在常預示預后不良。。
這些特異性腫瘤標志物作為甲狀腺癌的分子標記與甲狀腺細針穿刺活檢、免疫組化及臨床檢驗等技術一起分析,可提高對良性和惡性甲狀腺腫瘤診斷的精確性和敏感性,并且為甲狀腺腫瘤的分類及惡性程度的預測提供新的分子基礎,也為研究甲狀腺癌形成的分子發(fā)病機制提供重要的線索。。可見它們的確立對于指導甲狀腺癌的診斷和早期治療具有重要的臨床意義。然而要在與腫瘤發(fā)病有關的諸因素中找出它們的內(nèi)在聯(lián)系,使它們真正成為臨床應用工具尚需長期艱苦的探索。
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